老年结肠癌患者树突细胞免疫治疗后免疫功能的变化及其疗效

目的观察老年结肠癌患者树突细胞(DC)免疫治疗后免疫功能的变化及其治疗效果。方法选取该院收治的96例老年结肠癌患者为研究对象,按照入院顺序随机均分为观察组和对照组,观察组患者在手术治疗和化疗基础上给予DC免疫治疗,对照组患者给予手术治疗和化疗,比较两组患者免疫功能的变化和临床疗效。结果对照组患者治疗后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群比例与治疗前比较无明显差别(P>0.05)。观察组治疗后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群比例与治疗前比较均增加(均P<0.05);且高于对照组治疗后(均P<0.05)。观察组患者治疗有效率为60.42%高于对照组有效率(χ2=7.07,P<0.05)。结论结肠癌患者的DC免疫治疗可明显提高患者免疫功能和肿瘤清除效果,术后化疗联合细胞免疫治疗可获得较单纯术后化疗更为满意的治疗效果。

pcIL-18-MAGE-1共表达基因疫苗对肝癌细胞株SMMC-7721、Hepal-6增殖的影响

目的观察pc IL-18-MAGE-1共表达基因疫苗接种小鼠所引起的免疫应答情况以及对肝癌细胞株SMMC-7721、Hepal-6增殖抑制情况,探究pc IL-18-MAGE-1共表达基因疫苗抗肿瘤作用。方法用pc IL-18-MAGE-1基因疫苗免疫小鼠,同时设空白对照组和阴性对照组,免疫后收集脾细胞作为效应细胞,分别作用于靶细胞即肝癌细胞株SMMC-7721、Hepal-6。应用流式细胞仪(FCM)检测小鼠T细胞亚群情况及自然杀伤(NK)细胞活性,MTT法检测肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对靶细胞的杀伤作用。结果与对照组比较,共表达pc IL-18-MAGE-1基因疫苗对靶细胞均有明显的杀伤作用(P<0.01);对SMMC-7721细胞杀伤作用高于Hepal-6细胞(P<0.05)。免疫组CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均高于阴性对照组(P<0.05)。结论 pc IL-18-MAGE-1共表达基因疫苗通过同时激活CD4+T细胞及CD8+T细胞、增加NK细胞活性及诱导肿瘤特异性CTL直接杀伤肿瘤细胞,发挥抗肿瘤作用。

pcIL-18-MAGE-1基因疫苗免疫荷瘤小鼠抑瘤作用

目的观察pcIL-18-MAGE-1基因疫苗对MAGE-1(+)及MAGE-1(-)荷瘤小鼠的成瘤情况和生存时间的影响。方法将稳定表达MAGE-1基因的Hepal-6-MAGE-1细胞,接种于C57BL/6J小鼠,制备MAGE-1(+)荷瘤鼠,利用Hepal-6细胞制备MAGE-1(-)荷瘤鼠,实验设为pcIL-18-MAGE-1基因疫苗免疫组、阴性对照组及空白对照组,观察各组小鼠成瘤时间,肿瘤形成率、生长速率,抑瘤效果及生存期;应用HE观察瘤体病理改变。结果 MAGE-1(+)及MAGE-1(-)荷瘤小鼠的成瘤效果较一致,致瘤性检验差异无显著性(P>0.05);HE结果显示瘤体肿瘤细胞排列不规则,可见核分裂;疫苗免疫组成瘤率,生长速率均小于对照组,差异显著(P<0.05)。成瘤时间、生存时间长于对照组(P<0.05),MAGE-1(+)荷瘤鼠免疫组与MAGE-1(-)荷瘤鼠免疫组比较,抑瘤效果显著(P<0.05)。结论 pcIL-18-MAGE共表达基因疫苗对荷瘤鼠具有一定抗肿瘤作用。

共表达pcIL-18/MAGE-1 DNA疫苗对JEG-3细胞HLA-G基因表达的影响

目的观察共表达基因疫苗pc IL-18/MAGE-1对绒癌JEG-3细胞株HLA-G基因表达的影响,探究pc IL-18/MAGE-1抗肿瘤作用机制。方法应用构建的共表达pc IL-18/MAGE-1 DNA疫苗免疫小鼠,同时设阴性对照组和空白对照组,免疫后分别收集脾细胞,作用于靶细胞JEG-3,应用FCM检测小鼠T细胞亚群情况及NK细胞活性,MTT法检测肿瘤特异性CTL对靶细胞的杀伤率,RT-PCR法检测HLA-G基因表达情况。结果免疫组HLA-G基因表达降低,且对JEG-3细胞杀伤活性增加,与对照组比较,差异显著(P<0.05)。免疫组NK细胞活性及CD4+/CD8+、CD8+、CD4+值均高于对照组(P<0.05)。结论共表达基因疫苗pc IL-18/MAGE-1通过降低HLA-G基因的表达,进而增加NK细胞活性以及诱导肿瘤特异性CTL直接杀伤肿瘤细胞,发挥抗肿瘤作用。

GPR30-EGFR信号通路在双酚A促乳腺癌细胞增殖中的作用

目的:探讨GPR30-EGFR信号传导通路在双酚A促乳腺癌MCF-7细胞增殖中的作用,为研究双酚A诱导乳腺癌的确切机制提供依据。方法:采用Western blot检测双酚A处理乳腺癌MCF-7细胞24 h和48 h后GPR30-EGFR的表达情况,采用MTT法检测AG1478抑制EGFR后双酚A对乳腺癌细胞增殖的影响。结果:EGFR在1μM双酚A作用48 h后其诱导表达最明显(P<0.05);GPR30在双酚A作用48 h后表达下调明显(P<0.05)。通过EGFR的高选择性抑制剂AG1478对乳腺癌细胞中的EGFR进行阻断,当AG1478和双酚A协同作用时,乳腺癌MCF-7细胞的增殖相对于双酚A单独作用组无明显区别(P>0.05)。结论:在双酚A所诱导的乳腺癌MCF-7细胞的增殖作用中,EGFR被有效地激活,GPR30蛋白在与双酚A作用后表达有所减弱;EGFR不是双酚A促细胞增殖的必经通路,双酚A可能通过其他通路发挥促细胞增殖作用。

STAT3在双酚A促乳腺癌细胞增殖中的作用研究

目的:探讨STAT3在双酚A促乳腺癌MCF-7细胞增殖中的作用,为研究双酚A诱导乳腺癌的确切机制提供依据。方法:采用Western blot检测双酚A处理乳腺癌MCF-7细胞24 h和48 h后STAT3的表达情况,采用MTT法检测RNA干扰技术抑制STAT3后双酚A对乳腺癌细胞增殖的影响。结果:Western blot结果表明,STAT3在1μM双酚A作用48 h后其诱导表达最明显(P<0.05);通过对照研究筛选出有效的干扰片段,能显著抑制STAT3基因的表达,当干扰片段抑制了STAT3基因表达后,双酚A未能抑制STAT3的MCF-7细胞发生增殖效应(P>0.05)。结论:在双酚A诱导乳腺癌细胞的增殖作用中,STAT3的活化和活化后的信号传导是非常重要的一个环节。

20（S）-人参皂苷Rg3对U266细胞增殖及其自分泌血管内皮生长因子的影响

目的 探讨20（S）-人参皂苷Rg3[简称20（S）-Rg3]体外对多发性骨髓瘤（MM）细胞增殖及其自分泌血管内皮生长因子（VEGF）的影响.方法 以MM细胞系U266细胞为研究对象,利用MTT法检测不同浓度20（S）-Rg3对细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期及凋亡率;ELISA法检测细胞培养上清VEGF水平;Westem blot法检测凋亡相关蛋白caspase-3、8和9的表达.结果 20（S）-Rg3在一定浓度范围内可抑制U266细胞增殖,并呈浓度依赖性（P＜0.05）,作用24、48 h的IC50值分别为（71.07±2.63）μmol/L和（44.06±3.98）μmol/L;ELISA法检测结果显示20（S）-Rg3处理24 h细胞培养上清中VEGF的含量呈剂量依赖性减少（P＜0.05）,未加药组和加近IC50浓度（80 μmol/L）组的细胞培养上清中VEGF的含量分别为（419.93±36.76）和（314.82±27.05）pg/106细胞.流式细胞术检测显示0、20、40、80 μmol/L 20（S）-Rg3处理后U266细胞凋亡率分别为（0.51±0.05）％、（8.32±0.83）％、（10.72±1.29）％和（15.27±2.26）％,呈剂量依赖性升高（P＞0.05）;G0/G1期细胞比率分别为（49.11±1.71）％、（52.72±7.75）％、（60.29±5.76）％和（61.81±3.46）％,呈剂量依赖性增多（P＜ 0.05）;Western blot检测显示随20（S）-Rg3浓度的增加,procaspase-3、8和9表达略下降,cleaved caspase-3、8和9显著表达上升（P＜0.05）.结论 20（S）-Rg3可抑制U266细胞增殖,其机制可能是通过诱导细胞凋亡,上调cleaved cas-pase-3、8、9的表达及阻滞细胞周期进程实现的;20（S）-Rg3可抑制U266细胞分泌VEGF,潜在治疗MM的新制剂.