长春地区儿童龋病与维生素D受体基因多态性相关性的研究

目的:探讨长春地区儿童龋病与维生素D受体基因(VDR)多态性的关系。方法:采用PCR技术和限制性酶切片段长度多态性(RFLP)技术,检测长春地区312例儿童维生素D受体基因多态性;并分析维生素D受体基因多态性与儿童龋病的关系。结果:在VDR-BB基因型中95·0%是龋病患者。在VRD-B等位基因中93·5%为龋病患者;龋齿的数量与VDR基因型有关,龋病重的患者中VRD-BB基因型占多数。结论:龋病的发生发展可能与VDR基因型有关,检测VDR基因型及早干预,对于预防龋病的发生有重要意义。

大豆总甙对病毒的抑制作用及其临床应用的研究

大豆总甙（TotalSoyasaponinTS）对单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV－I）、柯萨奇Bs（CoxBs）病毒的复制有明显的抑制作用；同时体现出对病毒感染细胞很强的保护作用。其作用机理与TS对病毒的直接杀伤作用有密切关系。临床应用研究表明，对疱疹性口唇炎和口腔溃疡效果显著，有效率达88．8％和76．9％。本研究为应用TS治疗病毒性疾病提供了一定的实验依据。

胰岛素样生长因子Ⅰ对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的:研究胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)对人牙周膜成纤维细胞(PDLF)增殖能力的影响,为牙周组织改建工作提供理论依据。方法:取本实验室自行制备生长状态良好的转染IGF-Ⅰ的PDLF和未转染IGF-Ⅰ的PDLF,分别用0.25%胰蛋白酶消化,制成细胞悬液,经计数后进行接种并计数,绘制成细胞生长曲线,比较2种细胞生长速度的差异;用0.25%胰蛋白酶分别消化转染和未转染IGF-Ⅰ的PDLF,培养后采用MTT法测定A值,并比较2种细胞增殖活性的差异;采用碱性磷酸酶(ALP)比色法检测比较转染和未转染IGF-Ⅰ的PDLF的ALP活性。结果:细胞生长曲线显示转染IGF-Ⅰ的PDLF的生长速度高于未转染IGF-Ⅰ的PDLF,差异有显著性(P<0.05);转染IGF-Ⅰ的PDLF的增殖能力及ALP活性高于未转染IGF-Ⅰ的PDLF,差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:IGF-Ⅰ可能通过PDLF发挥其调节牙周组织改建的作用。

地塞米松对体外培养人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的：研究地塞米松（DEX）对体外培养人牙周膜成纤维（PDLF）细胞增殖的影响，寻找体外培养人PDLF（hPDLF）细胞的优化条件，为牙周组织再生的研究工作奠定基础。方法：体外分离培养的hPDLF细胞随机分为5组，分别用5种含10％胎牛血清的DMEM细胞培养基培养5～8代：①空白对照组（无DEX）；②含5mg·L^-1 DEX；③含10mg·L^-1 DEX；④含20mg·L^-1 DEX；⑤含50mg·L^-1 DEX。以MTT法测定DEX对hPDLF细胞增殖率的影响；采用倒置相差显微镜观察hPDLF细胞在添加不同浓度DEX的胎牛血清培养基中培养后的细胞形态学改变。结果：将hPDLF细胞接种于24孔板后的第3天，细胞出现汇合现象。细胞在孔底呈鳞片状。采用DEX条件DMEM细胞培养液培养，可见细胞逐渐变成多层，细胞形态变小，突起变钝。MTT法检测结果表明含不同浓度DEX的DMEM培养基中培养的hPDLF细胞数均高于对照组（P〈0．05）；不同浓度的DEX对hPDLF细胞增殖均有影响（P〈0．05），且随着浓度增加，hPDLF细胞增殖能力逐渐增高。结论：DEX能使体外培养的hPDLF细胞表现很强的增殖活性。

改良Millard术式修复唇裂68例临床观察

目的:探究采用经过改良后的Millard法修复唇裂的临床疗效。方法:选择68例唇裂患者作为研究对象,并随机分为观察组和对照组,每组34例,观察组采用改良Millard术治疗,对照组采用常规Millard方式治疗,对比两组治疗后的效果。结果:观察组经过手术治疗,治愈效果良好,其疗效较优于对照组。结论:采用改良Millard术治疗唇裂,在临床治疗上疗效显著。

殊异韦荣菌sahH基因的克隆、表达和纯化

目的:对殊异韦荣菌S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(sahH)基因进行克隆、鉴定、表达和纯化,为研究龋病的微生物致病机制提供理论依据。方法:提取殊异韦荣菌基因组DNA,采用PCR方法扩增sahH基因序列,构建pET28a-sahH重组质粒,转化到大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)感受态细胞中,酶切、PCR鉴定和测序后,IPTG诱导蛋白表达,并进行分离纯化。结果:PCR扩增产物全长为1 410bp。测序结果经BLAST软件分析,与GenBank中所报道的绿脓假单胞菌sahH基因序列进行对比分析,其同源性为99%。该基因序列已登陆GenBank,序列号为KC477409。SDS-PAGE分析,重组质粒在E.coli JM109中表达并纯化,得到的融合蛋白相对分子质量约为50 000,诱导5h蛋白表达量最高,浓缩后蛋白浓度为5.4g.L-1。Western blotting法得到的蛋白条带与目的蛋白大小相符。结论:成功克隆了殊异韦荣菌sahH基因,并通过基因序列和氨基酸分析证明其具有完整的阅读框架,且重组载体表达出融合蛋白,分离纯化得到目的蛋白。

残根残冠的保存修复及其临床应用

近年来，在牙体移植术中，不论自体移植或同种异体移植，都有很大发展。但是植入牙齿的根吸收等一系列问题，仍未得到解决。