Matrilin-4对大鼠牙髓损伤后修复性牙本质形成的促进作用

目的:研究Matrilin-4对大鼠牙髓损伤后修复性牙本质形成的作用,探讨其作为新型盖髓剂的可能性。方法:28只雄性Wistar大鼠,在大鼠的双侧上颌第一磨牙牙合面备洞至露髓后,左侧用含Matrilin-4的胶原蛋白海绵盖髓(Matrilin-4组),右侧用含磷酸盐缓冲溶液(PBS)的胶原蛋白海绵盖髓(PBS组),双侧均用玻璃离子封洞。分别于3、7、14和28d灌流固定处死大鼠并取上颌双侧第一磨牙标本,HE染色和免疫组织化学染色观察分析各组大鼠修复性牙本质形成及成牙本质细胞中牙本质涎蛋白(DSP)的表达情况。结果:HE染色,3d时与PBS组比较,Matrilin-4组穿髓孔下方较少量炎症细胞聚集,并可见明显的血管扩张;7d时2组穿髓孔下方炎症反应加重,但Matrilin-4组明显轻于PBS组,且可见前期牙本质形成;14d时Matrilin-4组露髓区域可被较连续完整的修复性牙本质桥覆盖;28d时,与PBS组比较,Matrilin-4组穿髓孔下方可见厚而完整的修复性牙本质桥,牙本质桥下面有重组的成牙本质细胞层。免疫组织化学染色,2组大鼠成牙本质细胞中DSP阳性表达强度在术后3、7和14d呈逐渐增强趋势,28d时减弱;盖髓后各时间点Matrilin-4组大鼠成牙本质细胞中DSP阳性表达强度均强于PBS组,且14d时阳性表达达高峰。与PBS组比较,3、7和14d时Matrilin-4组大鼠成牙本质细胞中DSP阳性表达强度明显升高(P<0.01)。结论:Matrilin-4对牙髓损伤后修复性牙本质的形成具有促进作用。

下颌单侧游离端冠外精密附着体义齿三维有限元分析

目的:分析不同载荷下下颌单侧游离端冠外精密附着体义齿应力值和应力分布,为冠外附着体义齿应力分析提供新的方法。方法:应用美国I-DEAS软件,采用接触单元进行三维有限元分析。结果:应力较集中在基牙颈部和缺牙区牙槽嵴顶,远下斜向加载时应力峰值分别为(7.83 D+4)Mpa和(5.96 D+4)MPa,垂直加载时应力峰值分别为(5.56D+3)MPa和(2.92D+4)MPa。结论:远下斜向加载应力峰值最大,垂直加载时应力峰值最小,在基牙颈部应力值大于缺牙区牙槽嵴顶。游离端缺失应用冠外精密附着体义齿修复时,应注意基牙颈部牙槽嵴及缺牙区牙槽嵴顶的健康,采取措施减小斜向力。

3种可流动材料充填人离体牙Ⅴ类洞模型后微渗漏发生情况及影响因素

目的:比较Z350XT流动树脂、Beautifil Flow Plus F00和PRG Barrier Coat3种可流动充填材料在体外模拟充填人离体牙Ⅴ类洞后微渗漏发生的程度以及唾液污染的影响,筛选适用于临床充填楔状缺损的材料。方法:选取42颗正畸需要拔除的下颌第一前磨牙,24颗离体牙用于无唾液污染条件下实验,随机分为4组,每组6颗,分别为Z350XT流动树脂组、Beautifil Flow Plus F00组、PRG Barrier Coat组和玻璃离子水门汀(GIC)组;18颗离体牙用于有唾液污染条件下实验,随机分为3组,每组6颗,分别为Z350XT流动树脂组、Beautifil Flow Plus F00组和PRG Barrier Coat组。无唾液污染条件下实验各组离体牙在离体牙颈部预备Ⅴ类洞型,充填相对应的材料;有唾液污染条件下实验各组离体牙在涂布粘结剂后置于人工唾液中,再充填相对应的材料。各组离体牙样本经冷热循环后,自凝塑料封闭根尖孔,亚甲基蓝染色,制作切片,体视显微镜观察和测量离体牙染料染色深度即微渗漏程度,计算微渗漏程度评分。结果:在无唾液污染条件下,GIC组微渗漏程度及微渗漏程度评分高于其他各组(P<0.05),PRG Barrier Coat组微渗漏程度及微渗漏程度评分高于Z350XT流动树脂组和Beautifil Flow Plus F00组(P<0.05),各材料组龈壁微渗漏程度及微渗漏程度评分均高于同种材料组壁的微渗漏程度及微渗漏程度评分(P<0.05)。有唾液污染条件下各组材料微渗漏程度和微渗漏程度评分比较差异无统计学意义(P>0.05),但均高于无唾液污染条件下同种材料组的微渗漏程度及微渗漏程度评分(P<0.05)。结论:Z350XT流动树脂和Beautifil Flow Plus F00比PRG Barrier Coat更适用于楔状缺损的充填,值得在临床广泛推广应用,防止唾液污染对减少微渗漏至关重要。

MMP-3和CCN2在牙髓损伤模型大鼠牙髓组织中的表达及其意义

目的:建立大鼠牙髓损伤模型,初步探讨牙髓损伤后基质金属蛋白酶3(MMP-3)和结缔组织生长因子2(CCN2)促进组织修复的作用。方法:28只大鼠随机分为对照组和损伤后0 h、6 h、1 d、3 d、7 d及14 d组,每组4只,除对照组外,其余各组大鼠采用单纯开放法制备上颌磨牙牙髓损伤模型,损伤后不同时间点取各组大鼠牙髓组织,采用HE染色观察各组大鼠牙髓组织病理形态表现,免疫组织化学染色观察各组大鼠牙髓组织中MMP-3和CCN2的定位并检测其蛋白表达水平。结果:HE染色,对照组大鼠牙髓组织中可见成牙本质细胞层、乏细胞层、多细胞层和固有牙髓分界清楚;损伤后0 h组大鼠牙髓组织可见血管轻度扩张;损伤后6 h组大鼠牙髓组织中血管扩张明显;损伤后3 d组大鼠牙髓组织中可见炎症细胞聚集;损伤后7 d组大鼠牙髓组织中可见新生血管,成纤维细胞增生活跃,并可见新生牙本质样细胞;损伤后14 d组大鼠牙髓组织中可见修复性牙本质形成。免疫组织化学染色,对照组大鼠牙髓组织中MMP-3和CCN2均呈阴性表达;损伤后0和6 h组大鼠牙髓组织中可见MMP-3和CCN2弱阳性表达;损伤后1 d组大鼠开髓点下方牙髓组织成牙本质细胞和细胞基质中MMP-3和CCN2均呈阳性表达;损伤后3和7 d组大鼠牙髓组织成牙本质细胞、成纤维细胞和中性粒细胞中均可见MMP-3和CCN2强阳性表达;损伤后14 d组大鼠修复性牙本质中MMP-3和CCN2阳性表达减弱。与对照组比较,损伤后不同时间组大鼠牙髓组织中MMP-3和CCN2蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与损伤后0 h组比较,损伤后6 h组大鼠牙髓组织中MMP-3和CCN2蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),损伤后1 d、3 d、7 d和14 d组大鼠牙髓组织中MMP-3和CCN2蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:MMP-3和CCN2在大鼠牙髓损伤后的表达呈现先升高后降低的趋势,提示MMP-3和CCN2在促进牙髓损伤后的自身修复过程中起重要作用。

促红细胞生成素对大鼠即刻再植牙牙髓血运重建的促进作用

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)在大鼠即刻再植牙牙髓愈合过程中的表达,阐明促红细胞生成素(EPO)对大鼠即刻再植牙牙髓血运重建的作用及机制。方法:80只4周龄健康雄性Wistar大鼠随机分为未拔牙组、阴性对照(生理盐水)组、阳性药对照(庆大霉素)组和EPO组,每组20只,各组大鼠拔除的牙齿在其相对应的溶液中浸泡4min后再植,于再植术后3、7、14、21和28d分别处死4只大鼠,制作术区标本,行HE染色观察各组大鼠在不同时间段内再植牙牙髓血运重建的情况,免疫组织化学染色观察不同时间段各组大鼠再植牙牙体组织中VEGF蛋白表达水平。结果:HE染色,与未拔牙组比较,生理盐水组大鼠再植牙牙髓组织中炎症较重,牙根发育情况较差,修复性牙本质和牙骨质沉积较少,根尖孔较宽;庆大霉素组和EPO组大鼠再植牙牙髓组织中炎症较轻,牙根发育情况相对较好,修复性牙本质和牙骨质沉积较多,根尖孔缩窄。免疫组织化学染色,与未拔牙组比较,3、7和14d时生理盐水组、庆大霉素组和EPO组大鼠再植牙牙体组织中VEGF呈强阳性表达,随着时间的延长,VEGF阳性表达强度逐渐减弱;VEGF阳性表达区的平均吸光度(AOD)值,EPO组>庆大霉素组>生理盐水组>未拔牙组。与未拔牙组比较,3、7、14和21d时生理盐水组、庆大霉素组和EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而在28d时各组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与生理盐水组比较,3、7、14和21d时庆大霉素组和EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而在28d时庆大霉素组和EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与庆大霉素组比较,各时间点EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:EPO通过上调VEGF表达,诱导牙髓组织中血管新生,为再植牙提供了丰富的血管床,从而发挥牙髓的防御修复潜能,促进了再植牙的牙髓愈合。

rhBMP_2／TGF-β对β-磷酸三钙与骨髓基质细胞自体皮下成骨能力的影响

目的:观察rhBMP2／TGF-β对β-磷酸三钙与骨髓基质细胞在自体皮下成骨能力的影响。方法:应用矿化条件培养液体外培养成年新西兰兔的骨髓基质细胞,收集细胞并以5×106·mL-1浓度分成4组,A组加入 rhBMP2(15μg)／TGF-β(30 ng),B组加入rhBMP2(15μg),C组不加因子作为对照,然后将细胞接种在β-磷酸三钙上,体外培养3 d,D组细胞不接种材料上,继续体外培养。组织化学方法检测碱性磷酸酶。将复合物埋植于新西兰兔自体皮下。5周后常规HE染色、免疫组织化学染色并进行图像分析,观察I型胶原、骨形成蛋白合成情况。结果:A、B组的碱性磷酸酶平均A值显著高于C、D组(P<0．01);复合物植入皮下5周时 HE染色见各组均有条索状骨基质形成,A、B组I型胶原平均灰度值明显低于C组(P<0．01),各组免疫组织化学检测及图像分析显示骨形成蛋白的表达差异无显著性(P>0．05)。结论:β-磷酸三钙与骨髓基质细胞在自体皮下能够形成骨组织,rhBMP2／TGF-β较rhBMP2有更强的促进骨形成作用。