木犀草素对原发性硬化性胆管炎治疗作用研究

目的探讨木犀草素对3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢-2,4,6-三甲基吡啶(3,5-diethoxycarbonyl-1,4-dihydrocollidine,DDC)诱导的原发性硬化性胆管炎(primary sclerotic cholangitis,PSC)的治疗作用及可能机制。方法将6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机均分成空白对照组、DDC组、DDC+木犀草素组和木犀草素组,每组各6只。DDC组和DDC+木犀草素组小鼠使用0.1%DDC饲料喂养2周,造模成功后改用正常饲料喂养。自第15天起,DDC+木犀草素组和木犀草素组小鼠给予木犀草素40mg/kg连续灌胃20d,每天一次。其余组在此期间正常饲料喂养。比较各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平;苏木精–伊红染色(hematoxylin and eosin staining,HE染色)观察肝组织病变程度;检测小鼠肝组织炎症因子[白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]和纤维化相关因子[α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)、基质金属蛋白酶抑制剂1(matrix-metalloproteinase inhibitor 1,Timp1)]mRNA表达情况;蛋白质印迹法检测p65和p-p65蛋白活化情况。结果DDC组小鼠的血清ALT、AST、TBA及ALP均显著高于空白对照组(P<0.05),DDC+木犀草素组小鼠的血清ALT、AST、TBA及ALP均显著低于DDC组(P<0.05)。HE染色病理切片可见,空白对照组小鼠的肝细胞排列规则,形态正常,无胆汁淤积及炎细胞浸润;DDC组小鼠的肝细胞排列紊乱,胆管周围出现炎症浸润,大量胆汁淤积并伴有小胆管增生;DDC+木犀草素组小鼠的肝组织相较于DDC组胆汁淤积程度减轻,炎症浸润面积减小,且小胆管增生情况得到抑制。DDC组小鼠的IL-1β、IL-6、TNF-ɑ、α-SMA、collagenⅠ、Timp1的mRNA表达均显著高于空白对照组(P<0.05),DDC+木犀草素组小鼠的IL-1β、IL-6、TNF-ɑ、α-SMA、collagenⅠ、Timp1的mRNA表达均显著低于DDC组(P<0.05)。DDC组小鼠的p-p65蛋白活化水平显著高于空白对照组(P=0.002),经木犀草素治疗后,p-p65蛋白活化水平下降(P=0.012)。结论木犀草素对DDC诱导的PSC有一定的治疗作用,其作用机制可能与核因子-κB信号通路有关。