损伤性嗅觉诱发电位的实验研究

目的 建立损伤性嗅觉功能障碍动物模型 ,了解电刺激嗅觉诱发电位的特性及变化规律。方法 通过立体定位和电解损毁技术 ,对动物一侧或双侧嗅球造成损伤 ,动态观察损伤后不同时间点 (2 4h、4 8h和 1周 )嗅觉诱发电位的变化 ,并观察嗅球与嗅黏膜病理和超微结构改变。结果一侧嗅球损伤后 ,诱发电位N2波消失 ,N1和P1波潜伏期延长 ,波幅减小 ;双侧嗅球损伤后 ,表现为N1、N2波消失 ,仅记录到P1波 ,其潜伏期明显延长 ,波幅变化较大 ,以上改变均以 2 4～ 4 8h变化最显著。组织病理学和超微结构显示 ,2 4～ 4 8h嗅球周围大量炎性细胞浸润 ,神经元变性样改变。结论嗅球损伤程度不同 ,对嗅觉诱发电位的影响也不相同 ,这种改变是以其组织病理和超微结构变化为基础的。

人参皂甙和维生素E防护牛视网膜色素上皮细胞脂质过氧化作用的实验研究

目的：探讨人参皂甙Ｒｂ１、Ｒｇ１及维生素Ｅ对氧化损伤后的牛视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞的抗氧化作用。方法：建立牛ＲＰＥ细胞氧化损伤的模型，并分为正常对照组（１ｍｌＤＭＥＭ培养液），次黄嘌呤（ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ，ＨＸ）／黄嘌呤氧化酶（ｘａｎｔｈｉｎｅｏｘｉｄａｓｅ，ＸＯ）损伤组（ＨＸ／ＸＯ组），Ｒｂ１组，Ｒｇ１组和维生素Ｅ组。利用硫代巴比妥酸比色法，检测各组ＲＰＥ细胞培养上清液中脂质过氧化（ｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ，ＬＰＯ）产物丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉ－ａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）含量。结果：ＨＸ／ＸＯ组ＭＤＡ与正常对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５），Ｒｂ１、Ｒｇ１和维生素Ｅ组中两种药物浓度均能有效地降低ＭＤＡ的生成（Ｐ＜０．０５）。

CD_3AK细胞体内、外抗喉鳞癌细胞株(Hep-2)的实验研究

为探索更理想的过继免疫治疗手段,对由健康人外周血分离、经 CD_3单克隆抗体与白细胞介素-2共同诱导激活的 CD_3AK 细胞的体外扩增情况及其杀伤喉癌细胞 Hep-2的活性水平进行了观察和研究,并与 LAK 细胞作了比较。研究发现,CD_3AK 细胞除具有体外扩增能力强、存活时间长、IL-2依赖性低等特点外,其体内、外抗喉癌作用亦十分显著。培养早期,CD_3AK 细胞的抗瘤活性与常规培养的 LAK 细胞相似,延长培养时间至7～10天,则抗瘤活性大增,培养9天的CD_3AK 细胞在效靶比30:1的条件下平均抑瘤率高达99.8%,几乎完全抑制了喉癌细胞在裸鼠皮下的生长。研究提示,CD_3AK 细胞有望成为继 LAK 细胞之后的新一代肿瘤免疫杀伤细胞而应用于头颈肿瘤局部过继免疫治疗中。

晚发型自身免疫性脑炎:一项单中心回顾性队列研究

目的研究晚发型自身免疫性脑炎(AE)患者临床特征、治疗及预后情况。方法收集2014年6月至2019年10月作者医院收治的AE患者67例,根据首发年龄将患者分为晚发型AE(首发年龄≥45岁)25例和早发型AE(首发年龄<45岁)42例。比较两组患者临床表现、实验室检查、影像学特征、治疗及预后等情况。结果(1)晚发型AE中抗富含亮氨酸胶质瘤失活蛋白1(LGI1)脑炎及抗γ氨基丁酸B受体(GABA BR)脑炎比例均较早发型AE高(P<0.01和P<0.05),而抗NMDAR脑炎比例则较低(P<0.01);(2)晚发型AE与早发型AE在伴发肿瘤概率方面无统计学差异,但肺部肿瘤在晚发型AE中多见(P<0.05);(3)晚发型AE较早发型拒绝应用二线免疫治疗比例高(P<0.05);(4)晚发型AE合并神经系统副肿瘤综合征抗体较早发型多见(P<0.05);(5)晚发型AE较早发型头MRI海马病变多见(P<0.05)。结论晚发型AE在脑炎种类、伴发肺癌、合并副肿瘤综合征抗体及海马MRI改变等方面与早发型AE比较不同,在诊断及治疗方面均较复杂,应予特殊关注。

新型平阳霉素杀伤喉癌细胞系Hep-2细胞的体外实验研究

The cytotoxic effect of Pingyangmycin (PYM) (Bleomycin A5) on the laryngeal cancer Hep 2 line in vitro was observed with two experimental methods of MTT colorimetric assay and living cell count.Results:(1) The PYM value of IC50 (index of light density of PYM inhibited Hep 2 cell line) was 35μg/ml by MTT colorime tric assay.It showed that the proliferation activity of Hep 2 cell was inhibited strongly when the concentration of PYM increased.(2) The assay of living cell count showed that the livability of the Hep 2 was 46% when the concetration of the PYM in 30μg/ml.In our study,it was found that the PYM could induce the apoptosis effect of the Hep 2 cell in a certain range.

幼年型复发性呼吸道乳头状瘤病中人乳头状瘤病毒感染状态与病情变化的相关性分析

目的本研究拟探究幼年型复发性呼吸道乳头状瘤病(juvenile-onset recurrent respiratory papillomatosis,JORRP患儿人乳头状瘤病毒(HPV)亚型与含量的长期变化情况,及其对病程的影响。方法纳入2011年6月~2022年6月于北京同仁医院反复多次就诊、病程持续3年以上的43例JORRP患儿,收集其就诊期间的267例术中标本及留取标本时的手术时间间隔和年手术次数等临床资料,RT-PCR法检测HPV6和HPV11的DNA含量,依据临床病情特点分为缓解组(n=22)和复发组(n=21),统计分析HPV亚型及含量的变化与病情特点变化之间的相关性。结果13例患儿出现HPV感染转阴趋势,其中缓解组11例,复发组2例,HPV感染状态转阴与病情缓解相关(χ^(2)=6.537,P<0.05)。缓解组HPV11型转阴10例,复发组HPV11型转阴2例,组间比较转阴率差异显著(χ^(2)=5.224,P<0.05)。经Mc Nemar检验,缓解组HPV11的感染率降低具有统计学意义(χ^(2)=4.08,P<0.05)。线性回归结果提示缓解组的HPV6 DNA含量与年手术次数之间存在线性关系F(1,138)=10.478(P<0.05),HPV6 DNA含量会对年手术次数产生正向影响关系。结论JORRP患儿的HPV感染型别和病毒含量在病程中均可发生变化,均与病情存在相关性。HPV11型感染转阴者病情呈现缓解趋势,HPV6型的病毒含量与患者手术频率正相关。

焦虑障碍患者血中一氧化氮含量的测定

目的 :探讨一氧化氮在焦虑障碍患者发病中的作用。方法 :用氧化还原酶法检测 48例焦虑障碍患者和 3 5名正常人 (对照组 )的血清一氧化氮的水平。结果 :焦虑障碍患者血清中的一氧化氮的水平显著低于对照组。结论 :一氧化氮可以考虑作为焦虑障碍患者的一项检测指标。

嗅神经切断术后白血病抑制因子在嗅上皮中的表达

目的分析白血病抑制因子(leukemiainhibi-toryfactor,LIF)与嗅感觉神经元(olfactoryreceptorneurons,ORNs)再生的关系。方法建立嗅神经切断的小鼠动物模型,在术后8小时、2天、3天和5天分别通过免疫组化和相对半定量RT-PCR的方法,在蛋白和mRNA水平观察LIF及其特异性受体LIF-R在嗅上皮中的表达情况。结果LIF和LIF-R的表达都是在术后8小时迅速、一过性地上升,随后又迅速恢复至对照组水平。LIF由残留的ORNs表达,LIF-R则由基底细胞和嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)表达。结论LIF是在ORNs凋亡再生机制中较早表达的一种细胞因子,凋亡中的ORNs产生并分泌的LIF作用于基底细胞和嗅鞘细胞,从而启动调节ORNs再生的一系列分子机制。

六种免疫相关疾病血清sIL－2Ra水平

本文研究了一组免疫相关疾病，如系统性红斑狼疮、干燥综合症、非何杰金氏淋巴瘤、类风湿性关节炎、Ｇｒａｖｅｓ’病和头颈部肿瘤患者血清ｓＩＬ－２Ｒａ水平，并与正常人对照组作了比较。结果显示上述各病种患者血清ｓＩＬ－２Ｒａ明显增高，与正常人血清ｓＩＬ－２Ｒａ水平比较均存在极显著性差异。本文还就ｓＩＬ－２Ｒａ的临床意义和应用前景等若干问题进行了讨论。

川芎嗪对兔血管平滑肌细胞增殖及c-fos和c-myc基因表达的影响

目的:观察川芎嗪对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及c-fos、c-myc基因表达的影响。方法:对高脂诱导动脉粥样硬化模型兔体外培养的主动脉VSMC增殖模型应用3H-TdR掺入、流式细胞仪和cDNA探针原位杂交方法观察川芎嗪对VSMC增殖和c-fos、c-myc基因表达的影响。结果:川芎嗪可显著抑制兔VSMC增殖,使处于G1期的VSMC显著增多,S期和G2+M期的细胞减少;同时抑制VSMC中c-fos和c-myc基因的表达。结论:川芎嗪对VSMC增殖有显著抑制作用,其机制可能与抑制VSMC中c-fos和c-myc基因表达有关。

唾液胃蛋白酶检测对胃食管反流病的诊断价值

目的探讨唾液中胃蛋白酶水平对胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)的诊断价值。方法纳入GERD症状评分>8分的患者,依据胃镜检查及24 h食管pH-阻抗监测结果,将患者分为GERD组和非GERD组,依据食管高分辨测压分为食管动力减退亚组和食管动力正常亚组。收集各组患者的唾液,应用酶联免疫吸附法进行胃蛋白酶检测。结果GERD组50例,非GERD组68例,空腹唾液胃蛋白酶含量分别为(11.4±2.3)ng/ml及(5.6±1.4)ng/ml,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。食管动力减退亚组及食管动力正常亚组的唾液胃蛋白酶含量差异无统计学意义(P>0.05)。以空腹唾液胃蛋白酶含量>3.6 ng/ml为诊断标准,诊断GERD的敏感性为72.0%,特异性为76.0%。结论唾液中胃蛋白酶浓度的检测可辅助诊断GERD,食管动力对唾液胃蛋白酶含量无影响。

人参皂甙Rg1、Rb1和维生素E对氧化损伤的牛RPE细胞凋亡的影响

目的检验氧化损伤的牛ＲＰＥ细胞是否存在着凋亡以及人参皂甙Ｒｇ１、Ｒｂ１和维生素Ｅ对其的影响，以期进一步研究ＲＰＥ细胞氧化损害的机理，并试图为预防和治疗与ＲＰＥ细胞相关的视网膜疾病提供有效的手段。方法建立牛ＲＰＥ细胞氧化损伤模型，利用原位末端标记技术测定ＲＰＥ细胞凋亡。结果发生凋亡的ＲＰＥ细胞细胞核染成紫蓝色，形态不一，往往成颗粒状着色，与次黄嘌呤（ＨＸ）／黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）（ＨＸ＝０．１ｍｍｏｌ·Ｌ－１，ＸＯ＝５Ｕ·Ｌ－１）组阳性细胞数相比较，正常对照组Ｒｇ１（０．１ｍｇ·Ｌ－１）组及维生素Ｅ（１０ｍｇ·Ｌ－１）组存在显著性差异（Ｐ＜０．０５），而与Ｒｂ１（１０ｍｇ·Ｌ－１）组无显著性差异。结论氧化损伤可使培养的牛ＲＰＥ细胞发生凋亡。人参皂甙Ｒｇ１和维生素Ｅ对抗氧自由基对ＲＰＥ细胞损伤的机制可能是通过清除氧自由基、减少ＲＰＥ细胞脂类过氧化的发生，从而有效地抑制ＲＰＥ细胞凋亡，利于ＲＰＥ细胞的生存。

检测脑梗死患者血小板膜表面P-选择素与纤维蛋白原受体的临床意义

目的探讨脑梗死急性期血小板活化在血栓形成中的作用。方法采用流式细胞术检测脑梗死患者全血标本血小板膜表面P-选择素(CD62P)与纤维蛋白原受体(FIB-R)的表达。结果与正常对照组比较,脑血栓形成组(例及腔隙性梗死组(例于发病后43)47)1～3d内CD62P与FIB-R的表达(阳性细胞百分率)均有显著性增高。脑血栓形成组FIB-R表达增加明显高于腔隙性梗死组,至病程第日7FIB-R表达增高仍有显著性差异。两患者组中发病前服用阿司匹林与否未见对检测结果有显著影响。结论脑血栓形成与腔隙性梗死急性期均存在血小板活化;阿司匹林对血小板膜表面表达CD62P及FIB-R无影响。

转化生长因子-β对房水免疫抑制作用的影响

目的 研究房水的免疫抑制功能,分析转化生长因子－β2(TGF－β2)在其中的作用。方法 分别用正常房水、酸化房水和加有TGF－β2抗体的酸化房水作用于淋巴细胞,通过 MTT比色法测定各种处理因素下的房水对脐带血淋巴细胞增殖的抑制作用,并计算抑制率。结果 正常房水可抑制淋巴细胞的增殖,抑制率为7. 87%;酸化房水的抑制作用明显加强,抑制率提高到 51. 53%;TGF－β2抗体可阻断酸化房水的活性,加入TGF－β2抗体后,抑制率下降到 9. 7%。结论 房水具有免疫抑制功能,可抑制淋巴细胞的增殖,而TGF－β2是产生这一作用的分子学基础。

送检脑脊液病原宏基因组第二代测序技术客观标准再探讨

目的对比分析脑脊液病原宏基因组第二代测序技术(mNGS)、传统病原学检测与临床最终诊断中枢神经系统感染的符合程度,探讨脑脊液病原mNGS测序的送检标准。方法 2017年3月至2020年4月首都医科大学附属北京同仁医院对35例需排除中枢神经系统感染的患者送检脑脊液标本,同时行脑脊液病原mNGS测序和传统病原学检测,分别计算两种检测方法的灵敏度、特异度和Youden指数;绘制受试者工作特征(ROC)曲线并计算曲线下面积(AUC),比较两种检测方法的诊断效能。根据送检脑脊液病原mNGS测序的客观标准进行评分(满足1项计为1),计算不同评分下mNGS测序的阳性符合率。结果 35例患者中19例临床最终诊断为中枢神经系统感染。有18例脑脊液病原mNGS测序呈阳性,总阳性率为51.43%(18/35);有17例传统病原学检测呈阳性,总阳性率约48.57%(17/35)。临床最终诊断为中枢神经系统感染的患者中17例mNGS测序呈阳性,其诊断灵敏度为17/19、特异度为15/16,Youden指数为0.832;14例传统病原学检测呈阳性,其诊断灵敏度为14/19、特异度为13/16,Youden指数为0.612。ROC曲线显示,脑脊液病原mNGS测序的曲线下面积为0.916(95%CI:0.822~1.000,P=0.000);传统病原学检测的曲线下面积为0.806(95%CI:0.674~0.938,P=0.000);二者诊断效能差异无统计学意义(Z=1.245,P=0.213)。根据送检脑脊液病原mNGS测序的客观标准评分,mNGS测序的阳性符合率分别是0为0/4、1为0/2、2为1/8、3为3/4、4为4/6、5为3/4、6为6/7,随着评分的增加,mNGS测序阳性符合率呈升高趋势,其中评分≥3组mNGS测序阳性符合率高于评分<3组(16/21对1/14;Fisher确切概率法:P=0.000)。结论脑脊液病原mNGS测序可以辅助明确诊断中枢神经系统感染,进一步按照基于临床和常规辅助检查的客观标准送检脑脊液可以提高mNGS测序的阳性符合率。

人血清的分离和保存条件对补体溶血活性的影响

我们首次用琼脂糖凝胶内溶血法研究了人血清分离和保存条件对补体溶血活性的影响。结果表明：人血离体后，在冰浴、室温和３７℃条件下凝固和分离血清，其补体溶血活性无显著性差异。血清在３７℃８ｈ、室温１２ｈ、－１０℃Ｃ１４ｄ、－４０℃９０ｄ和－８０℃３６５ｄ，其补体溶血活性与新鲜血清无显著性差异。－８０℃冻存血清可用作补体溶血活性测定的质控参考品。

GAD65抗体相关性小脑性共济失调一例报道及文献复习

目的探讨抗谷氨酸脱羧酶65(glutamic acid decarboxylase,GAD65)抗体相关性小脑性共济失调的临床表现、治疗及预后。方法报道一例抗GAD65抗体相关性小脑性共济失调患者的临床资料,进行诊断、鉴别诊断、治疗及预后分析。结果患者为中老年男性,急性起病,缓慢进展,主要表现为步态不稳并渐出现复视、不能独立行走;神经系统体检发现双眼上视受限、双侧跟膝胫试验及双手轮替试验欠稳准;血清及脑脊液抗GAD65抗体阳性;头颅MRI未见异常萎缩及责任病灶;大剂量甲强龙冲击后症状明显减轻。结论抗GAD65抗体相关性小脑性共济失调可有脑干及小脑受累症状,是一种可以治疗性疾病,早期诊断并积极治疗有望改善预后。

血清SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌诊断中的应用

目的探讨血清代替血浆检测SEPT9基因甲基化在结直肠癌（CRC）诊断中的价值。方法收集70例CRC患者、38例腺瘤或息肉患者及15例其他肠道疾病患者血清样本。用Epi pro Colon 2.0试剂盒进行SEPT9基因甲基化检测,依据肠镜病理诊断进行验证,比较SEPT9、癌胚抗原（CEA）和粪便潜血试验（FOBT）的敏感性和特异性,并进行统计学分析。结果 CRC患者血清SEPT9的阳性率（81.4%）明显高于对照组（13.2%）,差异有统计学意义（χ2=92.814,P〈0.01）。CRC患者血清SEPT9的敏感性为81.4%（95%CI：72.4%-90.4%）、特异性为86.7%（95%CI：72.4%-100%）。临床分期为Ⅰ期的CRC患者SEPT9阳性率为42.9%,Ⅱ期为88.9%,Ⅲ期为82.4%,Ⅳ期为100%,差异有统计学意义（χ2=16.572,P〈0.01）。SEPT9的ROC曲线下面积（AUCROC）为0.841,明显高于CEA（0.716）和FOBT（0.792）。3者联合检测AUCROC可达0.935。结论血清SEPT9基因甲基化的检测是早期诊断CRC的有效方法,联合检测CEA及FOBT可以提高诊断效能。

血管紧张素转换酶基因多态性与慢性阻塞性肺病易感性的关系

探讨ACE基因插入 (insertion ,I)与缺失 (deletion ,D)多态性对COPD易感性、气道重构和肺功能损害程度的影响。从外周血白细胞中提取人类基因组DNA ,应用血管紧张素转换酶 (ACE)基因第 16内含子多态区两侧序列作为引物 ,采用PCR方法测定 12 2例COPD患者、15 9例健康人的ACE基因型。用多元线性逐步回归分析纠正性别、年龄等影响因素后确定独立危险因子。COPD组中DD基因型的分布频率显著高于正常对照组 (分别为 0 4 7、0 16 ,P<0 0 5 ) ;D等位基因频率也高 (分别为 0 6 2、0 4 3,P <0 0 5 ) ;DD型COPD患者肺通气功能损害较II型者为重 (P <0 0 5 )。ACE基因D型纯合子可能与COPD的遗传易感性相关 ,DD型基因可能是COPD发病新的独立危险因素。

Leber遗传性视神经病的线粒体基因突变及临床特征

目的 了解Leber遗传性视神经病 (LHON)线粒体基因突变及其临床特征。方法 采用PCR法扩增96例视神经病变患者mtDNA中ND1、ND4、ND6上的 3个片段后 ,用 377测序仪对mtDNA上 11778、346 0、14 4 84位点进行序列分析确定有无碱基突变。结果 96例患者中 4 0例 (41 7% )线粒体基因突变 ,其中男性 34例 (85 % ) ,女性 6例 (15 % ) ;34例 (85 % )为 11778位点突变 ,2例 (5 % ) 346 0位点突变 ,4例 (10 % ) 14 4 84位点突变 ;346 0及 14 4 84突变均为散发病例 ;有家族史者突变表达占 87 0 % (2 0 /2 3) ,无家族史者突变占 2 7 4 % (2 0 /73) ;头颅MR显示 11778突变者中 3例有脑白质区病灶 ,1例LHON合并垂体瘤 ;12例突变阳性者检查脑脊液 ,11例有炎性脱髓鞘改变。结论 LHON以 11778突变常见 ;起病及病程多样化、散发病例比例较高、眼底微血管病改变不易发现、脑脊液改变与炎性脱髓鞘雷同导致LHON在临床上易漏诊误诊 ,应尽早行突变检测明确诊断。