滑膜肉瘤临床病理分析

目的:探讨滑膜肉瘤的临床病理诊断和鉴别诊断。方法:收集滑膜肉瘤石蜡包埋标本41例,采用组织化学染色,免疫组织化学标记和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)等方法对肿瘤进行临床病理分析,为肿瘤的诊断和鉴别诊断提供科学依据。结果:12例(29%)双相分化型,22例(54%)单相纤维型,7例(17%)低分化型。36例(88%)上皮性标记[CK和(或)EMA]和间叶性标记(Vim)均阳性,5例(12%)仅间叶性标记阳性。RT-PCR检测20例标本,其中18例(90%)有融合基因SYT-SSX表达。结论:通过常规染色组织形态观察,结合免疫组织化学标记及特异性融合基因SYT-SSX检测,能够对滑膜肉瘤做出临床病理诊断。

巨结肠类缘病病理形态学诊断的探讨

目的采用NSE和S-100蛋白免疫组化染色方法,探讨巨结肠类缘病的病理形态学特征,提高其诊断率。方法对97例行巨结肠根治术后的病变肠段进行常规HE染色,并对其中21例采用NSE和S-100蛋白免疫组化,观察肠神经元及神经节细胞形态和数量的变化并与正常组进行比较。结果巨结肠类缘病(alliedHD)标本的神经元与神经节细胞数与正常组及巨结肠症(HD)比较差异有显著性(P<0.01)。结论巨结肠类缘病的诊断主要根据病理特征而定,在HE染色基础上结合NSE及S-100蛋白免疫组织化学染色能提高确诊率。

39例胃肠道间质瘤的病理诊断与临床分析

目的探讨胃肠道间质瘤(GIST)的临床病理、免疫组化特点及危险度参考指标,分析其在临床预后评估中的价值。方法观察39例GIST的病理形态特征,完成肿瘤性质初步判定,采用免疫组化方法检测分析CD117、CD34、SMA及S-100的表达水平,最终确定GIST的临床病理诊断性质、特征、组织来源以及良恶性。结果免疫组化染色显示CD117呈弥漫强阳性,CD34多呈弥漫强阳性,SMA及S-100偶呈局灶或散在阳性,阳性率分别为100%、81%、20%和16%。确诊该组39例GIST,其中可能良性5例,潜在恶性10例,恶性24例。结论免疫组化测定是GIST病理诊断的重要依据,CD117是诊断GIST的敏感而特异性的标志物。肿瘤病理判定与患者预后密切相关。

关于肿瘤移植模型病理学方面的探讨

应用小鼠S1 80 肉瘤 ,小鼠EAC腹水瘤实体型两种瘤株 ,进行BALB c小鼠移植瘤模型的研究。试验设S1 80 对照组 ,S1 80 给药组 ,EAC对照组 ,EAC给药组 ,比较给药 10d后实体瘤大小及其病理学变化特征。病理学观察对照组和给药组间、瘤体切面积和瘤细胞坏死率差异均有极显著性 ,两对照组的小鼠肝脏内均发现有瘤细胞转移。

丹参改善小鼠慢性酒精性肝损伤机制的研究

目的探讨丹参改善小鼠慢性酒精性肝损伤的机制。方法建立小鼠慢性酒精性肝损伤模型,采用苏木素伊红(Hematoxylin eosin ,HE)染色,观察丹参干预后肝组织形态学改变,逆转录多聚酶链式反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT -PCR)检测肝组织toll样受体4(tolllikereceptor 4,TLR4)mRNA及血红素氧合酶1(hemeoxygenase -1,HO -1)mRNA的水平,以免疫组织化学方法检测TLR4蛋白表达水平。结果丹参能减轻酒精所引起的肝细胞脂肪变性、坏死,下调TLR4mRNA表达及HO 1mRNA表达,并能使TLR4阳性细胞数明显减少。结论丹参可通过对TLR4信号传导途径的影响来减少酒精所引起的肝损伤。

蛇床子素对大鼠成骨细胞中OPG和RANKL基因mRNA表达的影响

目的 观察蛇床子素(OST)对体外培养的大鼠成骨细胞中OPG中RANKL基因表达的影响。方法 新生SD大鼠颅骨成骨细胞培养,设空白对照组和用不同浓度蛇床子素培养液(10-7,10-6,10-5mol／L)培养处理的大鼠成骨细胞为实验组,未经处理的细胞为空白对照组,分别提取48 h和7 d的细胞总mRNA,用RT-PCR技术分析OPG／RANKL的mRNA表达情况进行半定量比较。结果48h两基因都已有表达,相对空白对照组,OST上调OPG mRNA的表达(P<0.05),但对RANKL的表达无显著影响,OPG／RANKL比值变大;7 d时OPG和RANKL表达都有增加,OST上调OPG的表达(P<0.01),OST在10-5mol／L下调RANKL的表达(P<0.05),OPG／RANKL比值增大。结论OST可以增加大鼠成骨细胞OPG的表达,同时轻微抑制RANKL的表达,早期对RANKL的表达影响不大。

盐酸阿霉素对大鼠心肌损伤的分子机制研究

目的 :初步研究盐酸阿霉素(adriamycin,ADR)对大鼠心肌损伤的分子机制及机体急性修复的机理。方法 :将雄性SD大鼠 40只随机分成 4组 (每组 1 0只) :正常对照组 ,ADR低剂量组 (1 0mg·kg-1) ,ADR中剂量组 (2 0mg·kg-1) ,ADR高剂量组 (4 0mg·kg-1) ,对后 3组分别一次性腹腔注射不同剂量的ADR ,制备大鼠心肌损伤模型。采用硫代巴比妥酸 (TBA)荧光分光光度法测大鼠血清丙二醛 (malondialdehyde,MDA)含量 ;采用黄嘌呤氧化酶法测定铜锌超氧化物歧化酶 (Cu Zn SOD)活性 ;采用二硫代二硝基苯甲酸直接显色法测定谷胱苷肽过氧化物酶GSH Px活性 ;运用RT PCR方法分析相关基因的表达。结果 :ADR中、高剂量组大鼠血清中MDA含量高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 ) ;实验组Cu Zn SOD和GSH Px的酶活性均较对照组降低 ,并与其基因表达的减弱呈密切的相关性 ;FN、P1 0 5mRNA在不同剂量模型组呈不同程度的高表达。结论 :抗氧化酶基因表达的改变可能是ADR导致心肌损伤的分子机制之一 ,而纤连蛋白和核转录因子可能通过一系列的信号转导参与了机体损伤后急性期的修复。

姜黄素诱导人卵巢癌细胞株A2780凋亡及其分子机制的研究

背景与目的:姜黄素(curcumin)是传统中药姜黄的主要有效成分,其选择性抑制肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡作用日益成为研究的焦点,但其中所涉及的机制仍然不十分明确。本研究旨在探讨姜黄素对人卵巢癌细胞株A2780的诱导凋亡效应及其分子机制。方法:10～50μmol/L姜黄素分别处理A2780细胞6～24h后,MTT法检测癌细胞的生长活性;流式细胞仪(FCM)和吖啶橙-溴化乙啶荧光染色法检测细胞凋亡;SP免疫组化法检测细胞内NF-κB蛋白(P65)、caspase-3蛋白表达水平。结果:各浓度姜黄素对癌细胞生长抑制率为62.05%～89.24%,DNA直方图上可见亚“G1”峰;荧光显微镜下部分细胞发生凋亡形态学改变,凋亡率为21.5%～33.5%。NF-κB(P65)表达减弱、caspase-3表达增强,并呈时间依赖性。结论:姜黄素能显著抑制卵巢癌细胞的体外生长;上调caspase-3、下调NF-κB蛋白表达、诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。

Pin1和Cyclin D1在人类5种常见肿瘤中的表达及其意义

目的研究人类的肽基脯氨酰异构酶(Pin1)在人类几种重要的肿瘤(肺癌、前列腺癌、乳腺癌、宫颈癌和胃癌)中的表达及与细胞周期蛋白CyclinD1的关系,并探讨它们在肿瘤的发病机制、诊断和治疗中的意义。方法随机收集33例正常组织和171例癌组织(包括37例肺癌、35例前列腺癌、31例乳腺癌、36例宫颈癌和32例胃癌)。采取免疫组织化学Envision法显示Pin1和CyclinD1的表达。结果Pin1和CyclinD1在正常组织中不表达或者低表达,而在各种癌组织中有普遍性的高表达,在肺癌组织、前列腺癌组织、乳腺癌组织、胃癌组织和宫颈癌组织中,Pin1的表达率分别为48·7%、65·7%、48·4%、15·6%和69·4%,CyclinD1的表达率分别为56·8%、60·0%、54·8%、40·6%和58·3%。Pin1和CyclinD1在癌组织中的表达明显高于正常组织中的表达(P<0·05)。Pin1和CyclinD1蛋白在肺癌、前列腺癌、乳腺癌和宫颈癌中表达呈显著正相关(P<0·05)。而Pin1和CyclinD1蛋白在胃癌中的表达相关性不显著(P>0·05)。结论Pin1和CyclinD1在多种肿瘤的发生、发展过程中具有重要作用,如肺癌、前列腺癌、乳腺癌、宫颈癌和胃癌,Pin1与细胞周期代谢或调控有关。Pin1在某些肿瘤(如肺癌、前列腺癌等)中可作为肿瘤标记的参考指标。

NF-κB的活性和iNOS基因表达在低氧性肺动脉高压中的变化

目的 :探讨NF -κB的活性及iNOS基因表达在低氧性肺动脉高压 (HPH)发病过程中的变化。方法 :复制低氧性肺动脉高压大鼠模型 ,用免疫组化、原位杂交、半定量逆转录 -聚合酶链式反应 (RT -PCR)和Westernblot等方法进行检测。结果 :iNOSmRNA在腺泡内肺动脉 (IAPA)的表达 ,低氧 2 8d(H2 8d)组染色强于正常 (N)组、低氧 5d(H5d)组和低氧 1 4d(H1 4d)组。半定量RT -PCR证实低氧肺组织iNOSmRNA含量在H2 8d组分别是N组、H5d组和H1 4d组的 2 1倍、1 9倍和 1 8倍。H2 8d组肺组织NF -κB的核染色增多 ,I-κBa的含量在N组、H5d组和H1 4d组分别是H2 8d组的 2 7倍、2 8倍和 2 5倍。结论 :在HPH中NF -κB的激活可能与低氧肺血管构建及iNOSmRNA的表达有关。

局灶性脑缺血耐受和星形胶质细胞反应

目的 研究短暂性局灶性脑缺血预处理对永久性局灶性脑缺血的保护作用 ,及最佳预处理时间剂量 ,并探讨星形胶质细胞在脑缺血耐受中的反应。方法 采用开颅方法阻断大鼠大脑中动脉 ,通过观察大鼠脑梗死后神经功能损伤状况、脑梗死体积分析及病理形态学变化 ,评价不同的缺血预处理时间剂量 (10分钟、2 0分钟、30分钟 )对永久性局灶性脑缺血的保护作用。采用胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化法观察星形胶质细胞在脑缺血耐受中的反应。结果 与对照组相比 ,缺血预处理 2 0分钟未引起明显的神经元损伤 ,但使永久性局灶性脑缺血后神经功能损伤减轻 ,梗死体积明显减小 (P <0 .0 1)。免疫组化显示 ,2 0分钟缺血预处理组及重复缺血组星形胶质细胞在损伤预处理侧广泛激活。结论 2 0分钟局灶性脑缺血预处理能够有效诱导脑缺血耐受。星形胶质细胞的激活可能与脑缺血耐受中神经元的存活相关。

青心酮对活化RAW264.7细胞株血红素氧合酶-1mRNA/一氧化碳及TNF-α表达的影响

目的观察青心酮对活化 RAW264.7细胞株血红素氧合酶-1mRNA/一氧化碳(Hemeoxygenase-1/carbon monoxide,HO-1mRNA/CO)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法用 LPS 做刺激剂,建立活化细胞模型。分别用 RT-PCR 法检测 HO-1mRNA 的表达,血红蛋白结合法检测 CO 的相对含量,Western-blot 方法检测 TNF-α蛋白质的表达。结果 10^(-5)mol/L 青心酮使活化巨噬细胞 HO-1mRNA 表达增加,CO 增加,TNF-α蛋白表达下降。结论青心酮上调活化 RAW264.7细胞株 HO-1mRNA/CO 的表达,抑制 TNF-α蛋白的产生,这可能是 DHAP 抗炎作用机制之一。

载脂蛋白E与阿尔茨海默病的关系

阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是最常见的一种老年性痴呆症,临床上以进行性记忆丧失和认知功能障碍为特征。流行病学资料表明,载脂蛋白E(apolipoproteinE,ApoE)的基因多态性与AD密切相关。ApoE不但影响了AD的发生年龄与危险性,还与AD特征性病理改变神经原纤维缠结(neurofibrillarytangle,NFT)和老年斑(se nileplaque,SP)共定位。研究发现,ApoE可促进β-淀粉样肽(β-amyloidpeptide,Aβ)的沉积和SP的形成,C末端切除的ApoE片段则促使Tau蛋白的过度磷酸化及NFT的形成,并进一步引起神经变性和行为缺陷。同时,ApoE还与炎症因子的表达相关。上述证据均提示了ApoE及其基因多态性在AD发病机制中的重要作用。

苦参碱对前列腺癌细胞增殖及雄激素受体功能的抑制作用

目的:探讨苦参碱(matrine)对雄激素依赖性前列腺癌细胞株(LNCaP)的增殖及雄激素受体(androgen re-ceptor,AR)表达的抑制作用。方法:分别用0.5、1.0、1.5、2.0、3.0g/L浓度的苦参碱作用于LNCaP细胞12、24、36h后MTT法检测细胞生长活性;台盼蓝拒染法测定细胞生长曲线;24h后流式细胞仪测定细胞周期变化;24h后Western印迹法检测细胞内AR的表达。结果:苦参碱能抑制LNCaP细胞的生长,呈剂量与时间依赖性,不同浓度苦参碱组之间与不同作用时间组之间的差异均有显著性意义(P<0.01)。苦参碱诱导LNCaP细胞出现剂量依赖性G2/M期阻滞(P<0.01);细胞内AR的表达随苦参碱剂量依赖性减少(P<0.01)。结论:苦参碱通过下调细胞内AR表达和阻滞细胞周期进展来抑制LNCaP细胞的体外生长。

Caspase-3对磷酸化tau蛋白截断作用的研究

磷酸化tau是阿尔茨海默病(Alzheimer蒺s disease,AD) 的特征性病理改变——神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs) 的主要组成部分. 最近的研究显示:NFT存在Glu391和Asp421位点被截断的tau片段,然而,tau蛋白的磷酸化是否会影响caspase-3的切割作用尚不清楚. 首先纯化重组tau 蛋白,然后利用蛋白激酶A (PKA)、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和乳鼠海马组织抽提液对其磷酸化,并用caspase-3对不同磷酸化的tau 蛋白进行切割,比较caspase-3对非磷酸化和不同蛋白激酶磷酸化的tau 蛋白的切割特性. 结果显示:除切割非磷酸化tau蛋白外,caspase-3在体外可分别切割被PKA、CaMKⅡ和乳鼠海马组织抽提液磷酸化的tau蛋白. 这一结果提示:磷酸化修饰的tau蛋白仍然是caspase-3的底物.

乳腺癌MVD、MCD检测及其意义

目的 探讨乳腺癌微血管密度 (MVD)与肥大细胞密度 (MCD)的关系及预后意义。方法 用俾士麦棕法显示 15 0例乳腺癌肥大细胞 (MC) ,单克隆抗体 CD34标记血管内皮。结果 (1) 15 0例乳腺癌 MVD与 MCD存在直线回归关系 :y=4.791+0 .838x,r=0 .5 5 7;(2 ) MVD(≤ 2 1)低计组病例的 MVD与 MCD(>2 1)高计组病例MVD比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ;(3) 5 9例乳腺癌中 ,MCD+MVD≤ 44的病例与 MCD+MVD>44的病例比较 ,前者 5年生存率较高 ,后者 5年生存率较低 ,差异有显著性 (P<0 .0 1)。结论 MCD、MVD可能影响乳腺癌的发展与转归 ,是反映乳腺癌预后的有用指标。

大鼠肾细胞核DNA含量与死亡时间关系的研究

目的 研究 DNA含量与死亡时间关系。方法 应用计算机图像分析技术，测定了 15只大鼠在死后 48h内不同时间点大鼠肾细胞核 DNA含量的面积（ Area）、等效直径（ Mean－ Dia， MD）、异形指数（ Index of density， ID）、平均光度（ Average optical density， AOD）、积分光度（ Integral optical density， IOD）、密度变化数（ L－ Den－ Coe， LDC）和平均灰度（ Average gray， AG）等七项参数的变化值。结果 在大鼠死亡的相对早期（ 48h内），其细胞核 DNA降解速率与 PMI具有一定相关性。本实验并将每个参数的测量值进行了多项式运算，获得了更能体现 DNA降解趋势的二项式回归方程。结论 应用计算机图像分析技术，测量机体死后 DNA含量变化，将会成为推断死亡时间精确、客观的新方法。

生长相关蛋白-43磷酸化及神经生长因子在膀胱过度活动症发病机制中的作用

目的研究生长相关蛋白-43(GAP-43)在膀胱过度活动症患者膀胱的表达及其磷酸化和神经生长因子(NGF)在膀胱过度活动症发病机制中的作用。方法应用Western blot方法检测32例膀胱过度活动症患者膀胱组织及10例正常膀胱组织和10例其他原因所致尿频患者膀胱组织中GAP-43的表达及其蛋白质磷酸化,32例OAB患者中,13例为特发性逼尿肌不稳定(IDI),19例为特发性感觉急迫(SU)。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测量正常和特发性逼尿肌不稳定膀胱标本中NGF的含量。结果 Western blotting结果显示,在NC膜上43kD处均有阳性的反应条带,正常膀胱和其他原因尿频膀胱反应带微弱;而OAB组反应条带明显加深,OAB组与对照组间的差异有显著性(P<0.05)。同样,磷酸化的结果也表明OAB组表达高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。不稳定膀胱组,平均NGF含量为(1.06±0.11)pg/μg蛋白,而正常膀胱组为(0.58±0.07)pg/μg蛋白,两者相比,差异有显著性(P<0.05)。结论 GAP-43在OAB膀胱中的表达量较正常膀胱显著增多,提示神经的发芽生长和再建重塑与膀胱过度活动症有关,而磷酸化的GAP-43对这些过程有重要调节作用。NGF在人膀胱生理学和病理学方面起重要作用,可能参与不稳定膀胱的发病机制。

青心酮防治动脉粥样硬化与内脂素的关系

目的:观察青心酮对ApoE(-/-)小鼠主动脉粥样硬化病变的影响与内脂素的关系。方法:取8只8周龄C57BL/6小鼠为正常对照组;取24只8周龄雄性ApoE(-/-)小鼠,随机分成3组:动脉硬化组(n=8,im,等量生理盐水);青心酮治疗组(n=8,im,10mg·kg-1·d-1);辛伐他汀治疗组(n=8,im,10mg·kg-1·d-1)。所有实验小鼠均饲以"西方类型膳食"饲料至12周。取血检测内脂素、血脂;剪取主动脉根部行冰冻切片,油红O染色观察主动脉粥样硬化病变情况;剪取主动脉根部斑块组织,观察斑块中内脂素的分布情况;行电镜切片,观察青心酮对斑块中平滑肌细胞、内皮细胞的结构影响。结果:青心酮治疗组血清内脂素减少,血脂降低,主动脉粥样硬化病灶形成减少,平滑肌细胞、内皮细胞损伤减轻,斑块中内脂素含量减少。结论:青心酮能减少ApoE(-/-)小鼠主动脉粥样斑块的形成,可能通过抑制内脂素生成而降低血脂发挥其作用。

穿心莲成分API 0134对高脂血症患者血小板膜糖蛋白表达的影响

目的 观察中药穿心莲成分API 0134(API)对高脂血症患者血小板膜糖蛋白的影响,探讨API抗血小板聚集的机制。方法 随机选择30例高脂血症患者,应用免疫荧光标记和流式细胞仪测定静息血小板、活化血小板和不同浓度API作用后的活化血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa、GPIb、P选择素(GMP-140)和血小板假性血友病因子(vWF)免疫荧光强度值。结果 与活化血小板组比较,不同浓度API(25mg/L、50mg/L、100mg/L)均能够显著抑制GPⅡb/Ⅲa的平均荧光强度,抑制作用强度与用药剂量成正比;API 50mg/L和API 100mg/L亦能显著减低活化血小板的GMP-140,API 100mg/L可降低vWF的平均荧光强度(P<0.05,P<0.01)。不同浓度API对活化血小板膜糖蛋白GPIb表达影响不显著(P>0.05)。结论 API具有显著的抗血板GPⅡb/Ⅲa的药理作用,中、大剂量API对血小板GMP-140和vWF的表达亦有抑制作用。