黄芪刺五加合剂对小鼠免疫功能的调节作用

选用自然杀伤(NK)活性测定、肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素2(IL-2)诱生水平检测3项免疫指标研究黄芪(A)和刺五加(AS)合剂(简称A-AS合剂)对小鼠免疫功能的影响。并比较A-AS合剂及A或AS单剂的作用。结果显示:环磷酰胺(Cy)组所有免疫指标均显著低于正常对照组(P<0.001);Cy+A-AS组与Cy+A或AS组所有免疫指标均高于Cy组,但Cy+A-AS组又明显高于Cy+A或AS组。结果表明A-AS的作用明显强于A或AS,A-AS合剂对小鼠免疫功能有上调作用,而且A与AS具有一定的协同作用。

雷公藤甲素对正常人细胞免疫功能的抑制效应

雷公藤甲素(Triptalide)系从雷公藤中提取到的一种二萜类单体成份。

免疫磁性微珠的研制及其在免疫检测中的应用

应用材料科学和免疫学的新技术，我们在国内首次研制成功免疫磁性微珠（IMB）。在对一些临床常用血清指标以及两种激素标准品的免疫学定量检测中，自制IMB与瑞士Serono公司同类产品所获的结果十分接近（P＜0.01）,而且与放射免疫法的结果也有可比性(P＜O.01）。自制IMB在用于免疫学检测时的特异性、精密度、重复性、准确性均符合质量控制要求。

人肿瘤坏死因子-α的免疫PCR检测方法

将ＰＣＲ技术的极高灵敏度与ＥＬＩＳＡ技术检测肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）抗原的特异性相结合，利用生物素标记的腺病毒六邻体基因重组质粒（ＡｄＡＴ）作为ＰＣＲ的模板ＤＮＡ，以链亲和素作连接分子，与生物标记的兔抗鼠ＩｇＧ抗体相连接，后者再与ＴＮＦ－α的单克隆抗体结合。设计一对扩增六邻体基因的引物进行ＰＣＲ，通过对ＤＮＡ扩增片段浓度的定量分析。

T细胞受体γ基因和免疫球蛋白重链基因在急性淋巴细胞白血病细胞的重排及其在分型中的意义

用PCR扩增检测27例急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)和1例T细胞淋巴瘤(T lymphocytic lymphoma,T-LL)的T细胞受体(Tcell receptor,TCR)γ基因和免疫球蛋白重链(immunoglobulin heavy chain,IgH)基因重排。TCRγ基因在9例T-ALL及2例未分型白血病病例中全部重排;在6例B-ALL中有1例重排;在10例C-ALL中有1例重排,而IgH基因在24例ALL病例中重排,其中7例为T-ALL,1例为未分型白血病。TCRγ和IgH基因在1例T-LL中均无重排,在T-ALL、B-ALL和C-ALL中均有交叉重排现象。我们探讨了这些结果在分型中的意义,同时还注意到,在28例中的10例病人存在IgH和TCRγ基因双重重排,如作为特异的双标记检测其微小残留白血病细胞,无疑会提高准确率。

性激素对人免疫功能影响的体外试验

以生理浓度的雌二醇（Ｅ_２）和睾丸酮（Ｔｅ）体外作用于人外周血淋巴细胞，观察对ＰＨＡ刺激的淋巴细胞增殖反应、白细胞介素－２（ＩＬ－２）诱生水平及淋巴细胞对ＩＬ－２的反应性．取肝素抗凝血１０份，男女各５份，设Ｅ_２、Ｔｅ及Ｅ_２＋Ｔｅ实验组和无激素对照组．结果表明：Ｅ_２可明显抑制ＰＨＡ刺激的淋巴细胞增殖反应、ＩＬ－２诱生水平及静止淋巴细胞对ＩＬ－２的反应性，对ＰＨＡ活化的淋巴细胞反应性无影响，Ｔｅ的作用在各例间不一致．

比较跨膜型与分泌型TNF-α在体内的杀瘤效应

目的:比较分泌型和跨膜型TNF-α在体内抗瘤作用的异同.方法:在肿瘤局部直接注射3种TNF-α(野生型TNF-α重组体、跨膜型及分泌型TNF-α突变体)基因,观察其抗瘤效应 结果:3种TNF-α均能有效表达。并具明显抑瘤效应,跨膜型TNF-α突变体对早期肿瘤的仰制效应明显高于其它2种TNF-α(P<0.01),而野生型TNF-α对中肿瘤的抗瘤效应则最佳.此外,注射3种TNF-α裸DNA均未观察到明显副作用,结论:分泌型和跨膜型TNF-α抑瘤机制可能下同,裸DNA直接用于细胞因子基因治疗较安全。

癫痫患者脑组织TNF-αmRNA、IL-6mRNA以及HLA-Ⅱ抗原表达的改变

为探讨肿瘤坏死因子 (TNF-α)、白细胞介素 6 (1L - 6 )以及 HL A- 抗原表达在癫痫免疫学发病机制中的作用 ,采用地高辛标记 c DNA探针技术组织原位杂交方法研究癫痫患者 TNF- α m RNA和 IL- 6 m RNA在脑组织中的表达与分布 ;同时借助免疫组织化学技术检测癫痫患者脑组织中 HL A- 抗原的表达水平。结果发现 :癫痫患者脑组织中星形胶质细胞异常高表达 TNF- α m RNA和 IL- 6 m RNA;星形胶质细胞和小胶质细胞异常高表达 HL A- 类抗原。结果提示 :脑组织局部自分泌或旁分泌的细胞因子 (TNF-α和 IL - 6 )水平以及胶质细胞表面 HL A-

简单可行的EB病毒转化B淋巴细胞方法的探讨

介绍两种简便可行的EB病毒转化B淋巴细胞的方法，即微量全血法和冻存全血法。与环孢霉素A法相比较，这两种方法具有操作简单，所需血样少，无需环孢霉素A等优点。这些特点尤其是在进行大量样本转化时显得更为突出。用微量全血法和冻存全血法共进行79例转化试验，转化成功率分别为46％与85％。对于影响这两种EB病毒转化结果的因素也进行了讨论。

氢化可的松诱导特发性血小板减少性紫癜淋巴细胞凋亡和增殖抑制

探讨氢化可的松对儿童急性特发性血小板减少性紫癜 (AITP)外周血淋巴细胞增殖和凋亡的影响。对 12例确诊的儿童 AITP外周血淋巴细胞进行体外培养 ,用流式细胞术观察糖皮质激素处理后外周血淋巴细胞凋亡数量的变化 ,并用Wst- 1(四氮唑盐 )测定代表增殖的活细胞数。结果显示 ,激素处理组淋巴细胞凋亡率明显高于对照组 ,而活细胞数则明显低于对照组 ;激素处理后的外周血淋巴细胞凋亡率也明显高于处理前和正常对照组 ,均具有显著性差异。结果表明 ,氢化可的松具有明显的诱导淋巴细胞凋亡和增殖抑制作用 ,说明糖皮质激素可通过诱导 AITP外周血淋巴细胞凋亡和增殖抑制发挥治疗作用。

淋巴细胞经TCR－CD3活化增殖作用的分析

本文探讨了抗ＣＤ３单抗诱导的淋巴细胞活化增殖及有关影响因素。实验结果表明：①淋巴细胞内钙升高是淋巴细胞活化增殖的重要条件，ＣＤ３ＭｃＡｂ引起的早期胞浆游离钙迅速升高主要由内质网释放钙离子所致，而淋巴细胞增殖不仅需要细胞内钙释放，还需要细胞外钙内流；②ＧＴＰ结合蛋白是淋巴细胞激活过程的一重要环节，经Ｇ蛋白作用物霍乱毒素作用后，淋巴细胞ＤＮＡ合成显著降低；③新霉素和ＰＳＳ可抑制ＰＬＣ和ＰｋＣ的活性，对淋巴细胞ＮＤＡ合成造成剂量依赖性抑制作用。此外，抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞ＤＮＡ合成需要辅佐细胞的存在，高度纯化的Ｔ细胞对ＣＤ３ＭｃＡｂ的刺激不发生增殖反应。

AC－cAMP－PKA途径对淋巴细胞DNA合成的调节作用

以ＣＤ３ＭｃＡｂ为激动剂，以淋巴细胞体外ＤＮＡ合成为研究手段，探讨了ＡＣ－ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号途径在ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞活化中的意义。研究结果表明ＡＣ、ｃＡＭＰ和ＰＫＡ在决定细胞对外界刺激的反应中起着重要作用。在淋巴细胞活化早期细胞内ｃＡＭＰ出现一过性升高，随着细胞活化增殖，ｃＡＭＰ降至正常水平以下。活化ＡＣ、升高细胞内ｃＡＭＰ水平可显著降低ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞ＤＮＡ合成，而ＰＫＩ却能在一定程度上促进淋巴细胞活化增殖。

癫痫患者PBMC分泌TNF-α、IL-6及HLA-Ⅱ类抗原表达的改变

采用ELISA方法检测了30例癫痫患者外周血单个核细胞（PBMC）经脂多糖（LPS）诱生后培养上清中的细胞因子水平。结果发现，癫痫患者PBMC分泌肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）的水平分别为（5．705±0．702）μg／L和（177．60±54．50）ng／L，较正常对照组［分别为（3．118±0．373）μg／L和（78．67±6．47）ng／L］明显升高（均为P＜0．01），并且TNF－α与IL-6的升高存在明显的正相关（r＝0．705，P＜0．05）。应用Dot－ELISA及图像分析技术证实，癫痫患者PBMC表面人白细胞Ⅱ类抗原（HLA－Ⅱ抗原）的表达密度也显著高于正常对照组（P＜0．01）。结果提示，IL－6、TNF－α的分泌紊乱及HLA－Ⅱ类抗原的表达异常可能与癫痫的发病有关。

癫痫患者抗脑抗体及脑组织中HLA—Ⅱ类抗原的表达

目的:为获得癫痫患者免疫学异常的证据,本实验检测了患者血清中抗脑抗体(Anti-encephalic antibodies,AEAb)及脑组织人类白细胞抗原Ⅱ类抗原(Human leukocyte antigen class Ⅱantigen,HLA class Ⅱ antigen,HLA-Ⅱ类抗原),并与正常对照组比较。对象及方法:1.用ELISA方法测定37例癫痫患者血清抗脑自身抗体;2.借助免疫组织化学方法观察了HLA—Ⅱ类抗原在脑组织中表达与分布。结果:1.癫痫患者血清抗脑抗体高于正常对照;2.癫痫患者脑组织中星形胶质细胞和小胶质细胞异常表达HLA—Ⅱ类抗原。讨论:本实验证实癫痫患者存在一定程度的自身免疫应答异常。脑组织胶质细胞表面HLA—Ⅱ类抗原表达异常可能通过多种机制参与癫痫发病。

二味康口服液对动物体内部分球蛋白的影响

肿瘤及免疫抑制剂均可导致免疫力低下 ,表现为免疫球蛋白 Ig G、 Ig M等水平降低。二味康口服液用于治疗由肺瘤及环磷酰胺引起的免疫球蛋白减少的小鼠 ,结果表明 ,治疗 15 d后 ,低下的 Ig G及 Ig M水平明显升高 (P<0 .0 5 ,0 .0 1)。正常大鼠大剂量服用该药后 ,亦可见球蛋白水平升高。实验结果提示 ,二味康口服液能增强免疫功能且通过该作用达到治疗肿瘤及免疫力低下引起的其他疾病 。

EB病毒受体的放射配基结合分析

用３Ｈ－ＴｄＲ标记爱波斯坦－巴尔病毒（ＥＢＶ）进行结合饱和实验和竞争性抑制实验检测３种类型细胞的ＥＢＶ受体。结果表明，Ｂ淋巴细胞性白血病细胞系Ｒａｊｉ细胞存在高低两种亲和性ＥＢＶ结合位点，其Ｋｄ１＝１．２５×１０（－１３）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）１＝９．８９病毒粒子／细胞；Ｋｄ２＝２．８０×１０（－１２）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）２＝１７０．３５病毒粒子／细胞，而ＥＢＶ不与红白血病细胞系Ｋ５６２细胞结合。上皮细胞性低分化鼻咽癌细胞系ＣＮＥ－２Ｚ细胞也表达ＥＢＶ受体，其Ｋｄ＝６．１７×１０（－１３）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）＝１０．２４病毒粒子／细胞。ＥＢＶ及α干扰素均能阻止３Ｈ－ＥＢＶ与Ｒａｊｉ细胞或ＣＮＥ－２Ｚ细胞的特异性结合。

逆转录病毒转染的小鼠IL－3基因在NIH／3T3细胞中的表达

将小鼠白细胞介素３（ＩＬ－３）ｃＤＮＡ重组到逆转录病毒载体ｐＮ２Ａ质粒上，用电穿孔法将此重组子转染包装细胞系（ＰＡ３１７），经用Ｇ４１８（ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ）选择培养基筛选，得到产病毒效价为每ｍｌ５×１０４～２×１０５ＣＦＵ（ｃｏｌｏｎｙ－ｆｏｒｍｉｎｇｕｎｉｔ）的Ｇ４１８抗性细胞克隆。然后取其培养上清液转染ＮＩＨ／３Ｔ３细胞。通过检测被病毒转染的ＮＩＨ／３Ｔ３细胞培养上清液对小鼠骨髓细胞的增殖反应（ＭＴＴ法）和促分化作用（ＣＦＵ培养法），表明转染的ＮＩＨ／３Ｔ３细胞克隆能分泌ＩＬ－３。此结果为进行ＩＬ－３转基因治疗研究奠定了实验基础。

人补体C4短基因分布频率在我国南北人群中存在的差异

采用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）方法对北京（６０例）和湖北（５８例）地区随机人群的补体Ｃ４基因的长度进行检测。结果：湖北人群Ｃ４短基因的分布频率较北京人群高，其表型频率分别为 ７９． ３１％、６１．４４％，基因频率分别为５１．７２％、３７．５０％，差异均有显著意义（均为Ｐ＜０．０５），而且Ｃ４短基因在上述二个人群中的分布均符合Ｈａｒｄｇ－Ｗｅｎｂｅｒｇ平衡。结果表明，湖北人群Ｃ４短基因的频率高于北京人群。这种由于逆转录病毒序列的插入所致的Ｃ４基因长度的变化为研究某些疾病的遗传易感性提供了线索。

前列腺素E_2对跨膜型和分泌型肿瘤坏死因子胞毒作用的影响

研究比较前列腺素Ｅ_２（ＰＧＥ_２）对两型肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－ａ）胞毒效应。结果：跨膜型ＴＮＦａ（ＴＭ－ＴＮＦａ）和分泌型ＴＮＦａ（Ｓ－ＴＮＦａ）在杀伤靶细胞的同时，可引起靶细胞释放大量ＰＧＥ_２（Ｐ＜０．０１）。用环氧化酶抑制剂消炎痛可部分或大部分阻断ＴＭ－ＴＮＦａ诱导靶细胞产生的ＰＧＥ_２（Ｐ＜０．０１），并且也可抑制ＴＭ－ＴＮＦａ的胞毒效应（Ｐ＜．０１），其抑制程度与 ＰＧＥ_２阻断程度一致。但消炎痛却不能阻断 Ｓ－ＴＮＦａ诱导其敏感靶细胞产生 ＰＧＥ_２，也不能抑制 Ｓ－ＴＮＦａ对其敏感靶细胞的杀伤作用。结果提示，ＰＧＥ_２可能参与二型ＴＮＦａ胞毒效应的信号传导，但是二型ＴＮＦａ引起靶细胞ＰＧＥ_２水平升高的作用环节可能存在差异。