抗乙肝新药拉米夫定的研究进展

拉米夫定是新一代核苷类抗乙肝药物 ,可通过降低乙型肝炎病毒 (HBV)依赖RNA的DNA多聚酶生物活性 ,明显抑制HBV DNA的合成 ,具有作用强、安全、不良反应少等特点 ,是治疗不同类型的乙型病毒性肝炎的新选择。本文就拉米夫定的化学性质、药代动力学特点、作用机制、临床应用。

肝炎平对急性肝损害时脂质过氧化作用的实验研究

采用D-氨基半乳糖(D-GaIN)诱导大鼠急性肝损害模型,实验分成正常组、模型组、肝炎平组及肝得健组。观察了血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、TGF-α、肝细胞及红细胞中过氧化物(LPO)和肝组织及红细胞超氧化物歧化酶(SOD)的变化。结果表明:肝炎平和肝得健组血清中ALT、TGF-α及LPO与模型组相比明显下降(P<0.01),而肝炎平和肝得健组SOD活性分别是(594.7±164.8)、(575.0±174.5)U/g,明显高于模型组(417.64±139.5)U/g(P<0.01)。提示肝炎平能抗肝损害时肝组织氧自由基(FR)的产生,降低血浆和组织中LPO的水平,并能提高细胞SOD的活性,从而减轻肝损伤。其对肝细胞的保护作用与肝得健一致。

硫普罗宁对急性肝损害保护作用的实验研究

为了研究硫普罗宁（Ｔｉｏｐｒｏｎｉｎ） 对急性肝损害是否有保护作用， 应用Ｄ－氨基半乳糖（Ｄ－ＧａｌＮ） 造成大鼠急性肝损伤模型。实验分成正常组（Ｎ）、模型组（Ｄ－ＧａｌＮ）、模型＋ 硫普罗宁组（Ｄ－ＧａｌＮ＋ Ｔ）、模型＋ 肝得健组（Ｄ－ＧａｌＮ＋ Ｅ）。观察血清中丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）、肝细胞及血浆中脂质过氧化物（ＬＰＯ） 和肝组织及红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ） 以及相关的病理变化。结果表明： 模型＋ 硫普罗宁组（Ｄ－ＧａｌＮ＋ Ｔ） 及模型＋ 肝得健组（Ｄ－ＧａｌＮ＋ Ｅ） 血清中ＡＬＴ、ＴＮＦ－α及ＬＰＯ与模型组相比明显下降（Ｐ＜ ０．０１）， 而Ｄ－ＧａｌＮ＋ Ｔ和Ｄ－ＧａｌＮ＋ Ｅ两组的ＳＯＤ活性明显高于模型组（Ｄ－ＧａｌＮ） （Ｐ＜ ０．０１）。提示： 硫普罗宁能降低血清中ＡＬＴ、ＴＮＦ－α的含量及肝组织中氧自由基的产生， 降低血浆和组织中ＬＰＯ水平， 并能提高细胞ＳＯＤ活性， 从而减轻肝损伤。其对肝细胞的保护作用与肝得健一致。

中药肝炎平对急性肝损害防治作用的实验研究

用D－氨基半乳糖（D－GalN）制备大鼠急性肝损伤模型。通过检测血清丙氨酸转氨酶活性（ALT）、肿瘤坏死因子－α（TNF－α）浓度，并观察光镜和电镜下肝组织的病理学改变，以探讨中药肝炎平对急性肝损害的保护作用。结果发现：肝损伤组ALT活性和TNF－α浓度分别为（2442．16±445．09）nmol·s（-1）／L见和（8．07±1．93）μg／L，而肝炎平组则为（1258．59±468．43）nmol·s（-1）／L和（0.63±0．27）μg／L。肝炎平可显著降低血清ALT和TNF－α的水平，减轻肝细胞的变性坏死，其对肝细胞的保护作用与肝得健一致。

实验性肝硬化酶组织化学变化的研究

实验选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠１５只，随机分为正常组５只，实验组（４０％ＣＣｌ４植物油皮下注射组）１０只，同时喂养９周。断头法快速处死动物，立即取肝，冰冻切片，用酶组织化学和图像分析法观察肝内主要代谢酶活性变化。结果显示：实验组肝内ＳＤＨ、ＣＣＯ活性降低，ＬＤＨ、ＮＯＳ活性升高。

硫普罗宁抗急性肝损伤的实验研究

目的：用Ｄ氨基半乳糖（ＤＧａｌＮ）制备大鼠急性肝损伤模型。方法：通过检测血清ＡＬＴ及各种细胞因子包括：肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、白细胞介素６（ＩＬ６）和白细胞介素８（ＩＬ８）浓度的变化，并观察光镜和电镜下肝组织的病理改变，以探讨硫普罗宁对急性肝损害的保护作用。结果：模型组ＡＬＴ、ＴＮＦα、ＩＬ６及ＩＬ８显著升高；而硫普罗宁组ＡＬＴ及以上各细胞因子的水平均较模型明显降低（Ｐ＜００１）。结论：硫普罗宁可能通过免疫机制的调节，降低ＴＮＦα、ＩＬ６及ＩＬ８等细胞因子的生成和释放。

细胞外信号调节激酶的过表达在胃癌发生机制中的作用研究

目的 :研究ERK1表达在胃癌发生中的作用。方法 :采用SABC免疫组织化学方法 ,检测 11例正常胃粘膜组织、2 3例胃癌组织、2 6例肠上皮化生及 2 1例不典型增生组织中ERK1的表达及分布。结果 :ERK1的表达在正常胃粘膜、肠上皮化生、不典型增生、胃癌组织中呈逐级递增的趋势 (P <0 0 1)。结论

慢性肝病患者血清Ⅲ型前胶原及透明质酸的变化

采用放射免疫法测定６８例慢性肝病患者血清Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ）、透明质酸（ＨＡ）水平及部分肝功能的变化．结果表明：慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）、肝硬化（ＬＣ）及肝癌（ＨＣＣ）患者血清ＰＣⅢ、ＨＡ均显著高于正常组（Ｐ＜０．０１），而慢性迁延性肝炎ＰＣⅢ、ＨＡ升高不显著．血清ＰＣⅢ与γ－球蛋白呈正相关．另外，ＨＡ水平与部分肝功能损伤程度趋于一致，与γ－球蛋白有相关性．提示：血清ＰＣⅢ、ＨＡ检测可作为肝纤维化、肝硬化的血清学指标，且可作为动态观察肝纤维化发展过程的临床指标．ＨＡ可反映慢性肝功能损伤程度．

肝细胞癌p53蛋白过表达的免疫组织化学研究

为探讨肿瘤抑制基因ｐ５３ 在肝癌细胞中的变化， 本实验对３８ 例人肝细胞癌组织ｐ５３ 蛋白的表达进行了免疫组织化学检测， 并与其临床和病理观察进行了比较研究。免疫组化检查显示， １５例肝癌组织ｐ５３蛋白免疫染色阳性， 其突变率为３９．５％ （１５／３８）。比较表明， 肝细胞癌ｐ５３ 蛋白的过度表达与病人的年龄、性别和肿瘤大小无关， 而与肝癌的转移和分化程度有关， 在高分化肝癌中其阳性率为９．１％ （１／１１）， 在中分化肝癌为２２．２％ （２／９）， 在低分化肝癌则高达６６．７％ （１２／１８）。因此， ｐ５３

刀豆蛋白A诱导鼠肝损伤的荧光组织化学和超微病理研究

观察了刀豆蛋白A（ConA）诱导小鼠急性肝损伤模型的荧光组织化学和超微病理改变。小鼠注射ConA后，经超微病理观察发现，肝损伤突出表现为肝细胞凋落；用生物素化的ConA注射于小鼠，切肝制成冰冻切片，再加入异硫氰荧光素（FITC）标记的亲合素可见大部分荧光分布于肝脏。结果表明，细胞凋落可能是ConA在体内造成肝细胞死亡的机制；ConA具有亲肝特性。

大部分肝切除后肝细胞生长因子和增殖细胞核抗原作用的研究

为了探讨肝切除后肝细胞生长因子 (HGF)及增殖细胞核抗原 (PCNA)在肝再生中的作用 ,制备大鼠肝切除后肝再生模型 ,应用免疫印迹法及免疫组织化学染色分别检测 HGF的分子形式及 PCNA的表达。结果发现 :HGF在肝切除后残存的肝组织中的含量在 12 h显著增加 ,是正常的 14倍。增加的水平维持到 2 4h。但 HGF的重链带低于检测水平。PCNA在肝切除后残存的肝组织中的表达明显升高 ,于术后 2 4h达高峰。阳性细胞高达 5 4%。提示 HGF在肝再生中的作用是微不足道的 ,而 PCNA可以作为一种肝细胞增生的指标。

狗肝硬化门脉高压症血浆5-羟色胺变化的研究

本文观察了结扎狗胆总管形成肝硬化门脉高压症前后门静脉、肝静脉、腹主动脉和下腔静脉血浆5-羟色胺浓度的变化。结果发现:实验后门静脉、肝静脉、腹主动脉和下腔静脉血浆5-羟色胺浓度较实验前均明显增加;实验前或实验后门静脉、肝静脉、腹主动脉和下腔静脉血中血浆5-羟色胺的相互比较,均以门静脉中最高。本实验为应用5-羟色胺二型受体阻滞剂治疗门脉高压症提供了依据。

一氧化氮和内皮素对肝硬化大鼠离体内脏血管条舒缩的影响

目的 :探讨一氧化氮 (NO)和内皮素 (ET)血管活性作用的动静脉差异在门脉高压形成机制中的意义。方法 :以四氯化碳皮下注射复制大鼠肝硬化门脉高压模型 ,取动物门静脉 (PV)和肠系膜动脉 (MA)制成螺旋血管条 ,观察NO和ET的最大舒缩反应 (Rmax ,Cmax) ,并计算得到EC5 0值。结果 :模型组 (n =8)大鼠PV和MA对NO的Rmax显著高于对照组 (n =7) ,EC5 0显著低于对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;而对ET的Cmax则显著低于对照组 ,EC5 0显著高于对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。两组大鼠对NO和ET的最大舒缩反应和EC5 0 ,在PV和MA之间均存在显著差异 ,但模型组相差的幅度显著大于对照组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :NO和ET在肝硬化大鼠内脏血管的舒缩作用存在动静脉差异 。

刀豆蛋白A诱导急性肝损伤的病理学观察

目的：探讨刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）诱导的小鼠急性肝损伤的病理机制。方法：应用ＣｏｎＡ诱导建立小鼠实验性急性肝损伤模型，并进行光镜和电镜观察。结果：小鼠早期肝损伤突出表现为肝细胞调亡。结论：凋亡可能为刀豆蛋白Ａ诱导的肝细胞死亡的主要机制。

原发性肝癌患者肝动脉栓塞化疗前后肝纤维化指标的变化

探讨重复肝动脉栓塞化疗（ＴＡＥ）是否加重肝癌患者肝硬化的形成。方法我们对４０例经三次．ＴＡＥ治疗的原发性肝癌（ＰＨＣ）患者，测定了治疗前后透明质酸（ＨＡ）、层粘蛋白（ＬＮ）、人ｉｌｌ型前胶原（ｈｐｅⅢ）和四型胶原（Ⅳ．Ｃ）的含量。结果首次ＴＡＥ治疗后与ＴＡＥ前相比，上述四项指标差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）；从第二次ＴＡＥ治疗后，可见四项肝纤维化指标均有升高（Ｐ＜０．０５），以第三次ＴＡＥ后升高最为明显（Ｐ＜０．０１）。结论重复ＴＡＥ治疗常可加重患者的肝损害，应引起足够的重视。

肝炎平对急性肝损伤大鼠细胞因子的影响

目的:探讨中药肝炎平对急性肝损害的防护作用。方法:用D-氮基半乳糖(D-GalN)制各大鼠急性肝损伤模型,检测血清丙氨酸转氮酶活性(ALT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)浓度的变化。结果:肝损伤组ALT活性为2442.2±445.1nmol/L,TNF-α浓度为8.07±1.93ng/L,IL-6浓度为2.56±0.87ng/ml,IL-8浓度为5.78±2.12ng/ml;肝炎平组分别为1258.6±468.4nmol/L、0.63±0.27ng/L、0.52±0.13ng/ml、1.28±0.72ng/ml,各细胞因子水平均较肝损伤组明显降低(P<<0.01)。结论:肝炎平可通过对免疫机制的调节,而降低TNF-α、IL-6和IL-8等细胞因子的生成和释放。

抗TNF-α单抗对刀豆蛋白A诱导急性肝损伤的保护作用

为探讨ＴＮＦ－α在刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）诱导的肝损伤中的作用，在ＣｏｎＡ诱导的小鼠急性肝损伤模型上，观察血浆ＴＮＦ－α含量、ＡＬＴ活性、光镜和电镜下肝组织病理变化及应用抗ＴＮＦ－α单抗的肝损伤阻断作用。结果发现，与正常对照组比较，模型组ＴＮＦ－α、ＡＬＴ明显增高［分别为（０．１９±０．０６）ｎｇ／ｍｌ，（１４１４±５６７）Ｕ／Ｌ，均为Ｐ＜０．０１］，肝损伤在光镜、电镜下表现为肝细胞凋亡和坏死；抗ＴＮＦ－α单抗组的ＴＮＦ－α、ＡＬＴ分别较模型组和无关单抗组明显降低，未见肝细胞凋亡和坏死。结果表明：肝细胞凋亡可能为ＣｏｎＡ诱导肝细胞死亡的机制；ＴＮＦ－α在ＣｏｎＡ性肝损伤模型中起重要的介导作用；抗ＴＮＦ－α单抗可以阻断ＣｏｎＡ性肝损伤的发生，即有肝细胞保护作用。

三磷酸肌醇在兔急性肾缺血及再灌流损伤中的作用

用新西兰大白兔制作急性肾缺血及再灌流损伤模型，观察肾组织细胞内三磷酸肌醇（ＩＰ３）、细胞内总钙及胞浆游离钙（［Ｃａ（２＋）］ｉ）浓度变化。结果显示，缺血组与对照组的ＩＰ３浓度（±ｓ）分别为（４３０．３±４６．８）、（２９７．９±５４．３）ｍｉｎ（－１），［ｃａ（２＋）］ｉ浓度分别为（２１２．５±４３．５）、（１０６．１±１５．５）ｎｍｏｌ／Ｌ，前者较后者均显著性升高（均为Ｐ＜０．０１），总钙浓度分别为（３９８．６±３２．３）、（３８５．０±３２．４）μｍｏｌ／Ｌ，两组无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。再灌流６０ｍｉｎ后ＩＰ３浓度为（７７６．０±６８．０）ｍｉｎ（－１）、［Ｃａ（２＋）］ｉ浓度为（４１２．１±４７．３）ｎｍｏｌ／Ｌ、总钙浓度为（４４７．１±４２．５）μｍｏｌ／Ｌ，较对照组和缺血组均显著性增加（Ｐ＜０．０１）。提示，细胞内ＩＰ３对急性肾缺血及再灌流损伤中肾组织细胞内钙超负荷的形成具有重要作用。

肿瘤坏死因子在刀豆蛋白A诱导的肝损伤中的作用

利用刀豆蛋白A（ConA）诱导小鼠建立肝损伤模型，通过检测血浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、观察光镜和电镜下肝组织病理学变化评价肝损伤，研究了抗鼠TNF－α单克隆抗体对该肝损伤模型的影响。结果发现，模型组血浆TNF－α含量（0．19±0．06ng／ml），明显高于正常对照组（0．00±0．00ng／ml，P＜0．01），且血浆TNF－α含量与肝损伤程度一致。肝损伤早期病理变化突出表现为肝细胞凋亡，抗鼠TNF－α单抗组血浆TNF－α含量（0．00±ml）明显低于模型组（P＜0．01），肝组织学检查无肝损伤表现，显示抗鼠TNF－α单抗对该模型具有保护作用，表明ConA可诱导小鼠发生肝损伤，TNF－α起重要的介导作用，细胞调亡可能为ConA造成肝细胞死亡的一种重要机制。

抗AFP-F(ab)_2-Adr联接物治疗肝癌病人的细胞免疫功能变化

单克隆抗体对肝癌患者T细胞亚群的变化已有文献论述。但是有关生物导向治疗前、后T细胞亚群,IL-2R以及TFR表达的研究甚少。为此,本文应用单克隆抗体探讨了抗AFP-F（ab）2-Adr联接物对肝癌患者治疗前,后的外周血T细胞亚群以及IL-2R和TFR的变化。 1