乙醛脱氢酶2抑制剂大豆甙对缺氧心肌细胞的MAPK信号转导作用

目的检测乙醛脱氢酶2（ALDH2）对大鼠心肌细胞在缺氧状态下氧自由基（ROS）产生、凋亡发生和信号转导的影响。方法通过缺氧模型比较大鼠心肌细胞缺氧和经大豆甙（daidzin）24h预处理后缺氧的活性变化,用C400测定ROS,用TUNEL试剂盒检测凋亡,丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路酶磷酸化的改变用Western blotting的方法检测。每组实验（n）均重复3次以上。结果当心肌细胞ALDH2被特异大豆甙抑制后,更易在缺氧环境下诱导产生ROS和凋亡,且与MAPK有关的磷酸化酶活性均表达增强。结论当ALDH2被抑制后,心肌细胞对缺氧的耐受性下降,这与ROS的产生、凋亡和MAPK信号通路的激活有关,ALDH2对缺氧引起的细胞改变具有保护作用。

小脑幕静脉窦的形态学研究

目的 了解小脑幕静脉窦的分布及其引流区域。方法 解剖观察 5 0例成人小脑幕标本。结果 小脑幕外侧窦平均 (1.0 5± 0 .5 9)条 /侧 ,小脑幕中窦平均 (0 .92± 0 .6 2 )条 /侧 ,小脑幕边缘窦平均 (0 .19± 0 .39)条 /侧。结论 小脑幕静脉窦主要分布于小脑幕内侧份 。

表皮生长因子对角膜成纤维细胞生长的影响

目的 研究表皮生长因子 (EpidermalGrowthFactor,EGF)对角膜成纤维细胞生长的影响。方法 通过含不同浓度EGF的培养基培养角膜成纤维细胞 ,分别于 2 4、48和 72h用 0 .5 %台盼蓝法对每组进行细胞活力的测定。结果 0 .1、1.0mg/L的EGF在细胞培养 48、72h后对细胞生长有一定的促进作用 (P <0 .0 5 ) ,但在 2 4h时对细胞生长无明显影响 (P >0 .0 5 )。浓度为 0 .0 1mg/L的EGF对角膜成纤维细胞生长无明显影响 (P >0 .0 5 )。

几种酶在大鼠内吞体膜上的细胞化学定位

目的研究多种酶在不同器官内吞体膜上的活性。方法用细胞化学方法,以Ce3+或Pb2+作捕捉剂,分别检测碳酸酐酶,Mg2+-ATP酶,Na+-K+-ATP酶,5’-核苷酸酶,NADPH oxidase在大鼠肾近曲小管上皮细胞、肝细胞以及人体嗜中性白细胞内吞体膜上的酶活性。结果上述碳酸酐醇,Mg2+-ATP酶,Na+-K+-ATP酶,5’-核苷酸酶及NADPH oxidase分别在大鼠肾脏近曲小管,肝脏及人体白细胞的内吞体膜上都有酶活性存在。结论 内吞体功能复杂,它可能与细胞的pH值,水盐代谢,能量、蛋白质的代谢以及活性氧的产生等都有一定的关系。

阻断Notch信号通路降低1-甲基-4苯基-1,2,3,6-四氢吡啶诱导的多巴胺能神经元损伤

目的探讨Notch信号通路的缺失对1-甲基-4苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的中脑多巴胺能神经元损伤的影响。方法选用5月龄TH-Cre Rbpj基因敲除小鼠及野生型小鼠共48只,腹腔注射MPTP建立帕金森病(PD)模型,通过行为学、免疫组织化学和Western blotting等方法研究阻断Notch信号通路对MPTP诱导的中脑黑质多巴胺能神经元损伤的影响。结果 MPTP处理的Rbpj CKO小鼠运动能力强于MPTP处理的野生型小鼠;Rbpj CKO小鼠黑质致密部神经元数目较野生型小鼠减少;MPTP处理后,野生型小鼠多巴胺能神经元数目明显下降,而Rbpj CKO小鼠多巴胺能神经元数目无明显改变;Western blotting结果显示,MPTP处理后Rbpj CKO小鼠和野生型小鼠Notch-1胞内结构域(NICD-1)的表达均明显增加,且Rbpj CKO小鼠表达量增加更为显著。结论Notch信号通路缺失导致多巴胺能神经元数量减少,阻断Notch信号通路可以降低MPTP诱导的多巴胺能神经元损伤。

人嗜酸性粒细胞NADPH氧化酶的定位及gliotoxin的抑制作用

目的研究NADPH氧化酶在人体嗜酸性粒细胞中的细胞化学定位及gliotoxin对其活性的抑制作用。方法用蛋白激酶C的激活剂佛波豆蔻乙酯(phorbol myristate aceta,PMA)和gliotoxin对嗜酸性粒细胞预处理,然后用Ce3+为捕捉剂检测活性氧,作为电镜下NADPH氧化酶活化的标志。结果PMA组:在嗜酸性粒细胞内囊泡呈放射状排列,大小形态各异的囊泡腔面有很多显示NADPH氧化酶活性的致密颗粒存在。PMA+gliotoxin组:嗜酸性和中性粒细胞内显示该酶活性的颗粒都明显减少,但后者减少程度明显。结论嗜酸性粒细胞经刺激后,位于细胞内囊泡膜的腔面的NADPH氧化酶被激活,其活性强于中性粒细胞。gliotoxin对嗜酸性粒细胞产生过量.O2-有明显的抑制作用。