子宫骶、主韧带精细解剖与妇科微创手术

子宫骶韧带和主韧带是子宫重要的支持结构。近年人们对子宫骶主韧带的解剖结构,尤其是子宫动脉、深静脉、输尿管及盆底自主神经与骶主韧带的关系有了新的认识。随着微创技术的发展,传统剖腹手术方式,如子宫动脉阻断、盆底自主神经切除、保留盆腔自主神经的广泛子宫切除等得以在腹腔镜下完成。深入认识骶主韧带解剖结构,精细解剖骶主韧带对提高妇科微创手术质量,规避手术并发症具有重要指导意义。

TLR4信号介导内膜间质细胞侵袭增殖促子宫腺肌症发病的研究

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)信号活化内膜间质在腺肌症发生与发展中的调控作用。方法:Western blot法检测腺肌病在位子宫内膜及病灶内膜中TLR4表达情况;建立原代间质体系,lipopolysaccharide(LPS)刺激靶细胞,CCK-8技术观察细胞增殖活力;Western blot法检测TLR4核心信号表达;Western blot法和酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测和分析间质细胞炎性增殖及侵袭生长相关因子表达;采用TLR4拮抗剂VIPER处理细胞,验证TLR4信号对间质生物效应的影响。结果:TLR4表达于细胞质膜,在腺肌症病灶内膜中表达最高;LPS刺激使间质细胞活力增强、TLR4核心信号及增殖侵袭因子表达增加;VIPER可抑制上述因子表达。结论:LPS/TLR4信号活促进内膜间质细胞炎性增殖、侵袭生长,在子宫腺肌症发病中发挥重要作用,提示宫腔感染可能与腺肌病发病具有一定的相关性。

GPR30在子宫平滑肌瘤发病机制中的研究进展

子宫平滑肌瘤是女性生殖系统常见的良性肿瘤,其特征是平滑肌细胞的增殖,子宫多发肌瘤和特殊部位的肌瘤给女性的健康带来很大影响,严重影响其生活质量。尽管其病因和发病机制尚未明确,但一般认为它与雌激素的刺激密切相关,并涉及肌瘤细胞生理病理等机制。随着对雌激素作用的深入研究,一种新型雌激素受体—7次跨膜G蛋白偶联雌激素受体,其介导雌激素通过快速效应途径使靶细胞增殖,在子宫平滑肌瘤发生发展中发挥重要作用。

基质成纤维细胞活化促子宫肌瘤细胞增殖作用的研究

目的:观察基质成纤维细胞活化促进子宫肌瘤细胞的增殖作用,探讨基质成纤维细胞在子宫肌瘤发病机制中的作用。方法:采用免疫磁珠法分选子宫肌瘤组织和平滑肌组织的成纤维细胞。用免疫荧光及Western blot法检测成纤维细胞活化标记物(FAP)的表达;观察肌瘤基质成纤维细胞培养上清对平滑肌基质成纤维细胞(Fib)、平滑肌细胞(SMC)、肌瘤细胞(UFC)的活化作用及增殖活力的影响。采用RNAi技术沉默肌瘤基质成纤维细胞的FAP基因,观察细胞增殖活力及ECM、生长因子的表达变化,同时观察细胞增殖通路相关信号分子的改变。结果:肌瘤组织成纤维细胞中FAP表达高于Fib;肌瘤基质成纤维细胞培养上清能增加Fib的FAP表达强度,并促进细胞增殖活力;沉默FAP基因,可抑制肌瘤基质成纤维细胞ECM(collgen I、fibronectin、laminin)、生长因子(TGF-β、IGF-1)及细胞增殖通路相关信号分子(Akt、ERK、c-Fos、MEK)的表达。结论:子宫肌瘤基质成纤维细胞的活化程度高于子宫平滑肌组织基质成纤维细胞;活化的基质成纤维细胞具有促细胞增殖效应,提示活化的基质成纤维细胞在子宫肌瘤发生过程可能具有重要作用。

盆腔氧化压力损伤及其与子宫内膜异位症发病机制关系的研究进展

氧化压力参与了子宫内膜异位症形成过程中的炎症反应过程。经血逆流可将大量红细胞、巨噬细胞及子宫内膜细胞等带入盆腔中这些被带入盆腔内的物质是盆腔中氧化压力产生的重要刺激因素。盆腔腹膜液中氧化压力过程会产生大量的活性氧,进而激活涉及机体免疫与炎症反应的核因子κB通路,并调控许多细胞的增殖、凋亡、黏附、侵袭以及局灶血管的生成,从而在盆腔子宫内膜异位症的发生、发展过程中起到重要作用。

氧化/炎性压力诱导HMGB1的出胞及HMGB1与卵巢癌发病机制研究进展

高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是一种具有广泛功能的染色体相关核蛋白,参与细胞核内DNA的重组、修复及转录等生物学功能,维持染色体的稳定性。在氧化及炎性压力下,HMGB1会获得出胞的能力,细胞会将HMGB1主动或被动的释放到细胞外。作为一个配体分子,细胞外的HMGB1可以被相应的受体分子,主要为晚期糖基化终末产物及Toll样受体等识别,形成HMGB1-RAGE/TLRs复合物,激活下游信号通路,介导炎性细胞因子、趋化因子、粘附分子、血管生成因子等多种细胞因子的合成与分泌,参与慢性炎症反应及卵巢癌的生长、侵袭及转移等过程。

IL-8/CXCR1/2信号通路在卵巢癌发生发展中的研究进展

CXC趋化因子受体1/2(CXCR1/2)是一类G蛋白偶联受体,白细胞介素-8(IL-8)是肿瘤炎症微环境中的一种重要趋化因子。IL-8通过结合CXCR1/2激活下游信号通路,参与肿瘤细胞增殖、上皮-间充质转化(EMT)、侵袭转移、血管生成等过程。IL-8/CXCR1/2信号通路可促进多种肿瘤的增殖、侵袭、转移等过程,但IL-8/CXCR1/2信号通路在肿瘤发生、发展过程中的调控机制目前尚不明确,尤其是在卵巢癌细胞增殖、EMT、侵袭转移、血管生成中的调控机制。由于IL-8/CXCR1/2信号通路可拮抗卵巢癌的化疗效果,因此研究IL-8/CXCR1/2信号通路与卵巢癌发生、发展的关系至关重要。

CA125不同计算方法在卵巢癌筛查、评估及预后方面的作用

卵巢癌是威胁女性健康的"寂静杀手"。糖类抗原CA125是最常用的卵巢癌相关肿瘤标记物,绝大多数晚期卵巢癌患者的血清CA125升高。但CA125升高也常见于其他许多疾病,所以CA125单独用于卵巢癌的筛查效果并不理想。本文现回顾总结CA125单次偶测值法、贝叶斯统计原理追踪法、速率变化法和联合法的临床应用情况,认为CA125能更好地用于卵巢癌的早期筛查、诊断、治疗评估及预后判断。

子宫内膜-肌层结合带的结构、功能与子宫腺肌病的关系

尽管目前对于子宫腺肌病的诊疗有了很大的进步,但其发病机制尚未明确。在过去的50多年里,研究者们提出了许多理论,最被广泛接受的是子宫腺肌病是由内膜基底层向下浸润生长嵌入肌层导致的,但内膜是如何浸润生长的仍在研究中。而子宫内膜-肌层结合带的自我损伤与自我修复导致子宫内膜浸润、增殖,在子宫腺肌病发生、发展中也起着重要作用。

子宫动脉阻断后腺肌病在位及病灶内膜组织凋亡现象观察

目的:观察子宫动脉阻断后腺肌病病灶内膜及在位子宫内膜凋亡现象;揭示子宫动脉阻断术治疗子宫腺肌病的治疗机制。方法:选择同济大学附属杨浦医院收治的子宫腺肌病患者10例,均行腹腔镜下双侧子宫动脉阻断术,子宫动脉阻断前及阻断后30min分别取子宫腺肌病病灶及在位子宫内膜组织标本各10g,子宫动脉阻断前标本为对照组。运用日本电子电镜观察组织细胞线粒体等亚细胞器结构变化,并采用Real-time PCR、Western blot法检测比较子宫动脉阻断前后子宫内膜及腺肌病组织中凋亡相关分子(Bcl-2、Bax、cyt-c、AIF、caspase-3、caspase-4、caspase-8、caspase-9、Endo-G、apf-1、GRP78、CHOP和TRADD)的表达情况。结果:电镜显示,子宫动脉阻断后子宫腺肌病病灶及在位子宫内膜出现了线粒体内嵴模糊、消失,线粒体肿胀明显,空泡样改变。核染色质边移,细胞膜反折;胞质浓缩,形成凋亡小体等凋亡改变。与子宫动脉阻断前比较,阻断后腺肌病病灶和在位子宫内膜组织中线粒体及内质网途径相关凋亡因子均出现显著性变化,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:子宫动脉阻断后可诱导腺肌病病灶及在位子宫内膜发生凋亡。缺氧所致细胞凋亡主要为线粒体途径,内质网途径协同参与。缺氧诱导细胞凋亡可能是子宫动脉阻断治疗子宫腺肌病的主要机制。

沉默肌瘤基质成纤维细胞FAP基因可抑制雌激素的细胞增殖效应

目的观察成纤维细胞活化蛋白(FAP)表达在雌激素对子宫肌瘤基质成纤维细胞的活化和促增殖中的作用。方法采用免疫磁珠法分离成纤维细胞并检测雌激素受体(ER-α/ER-β)表达情况。以雌激素分别刺激子宫正常平滑肌基质成纤维细胞及子宫肌瘤基质成纤维细胞(TAF),并检测FAP、细胞外基质(ECM)、生长因子的分泌情况和细胞增殖活力的改变,以及检测细胞增殖通路相关信号分子的改变;使用RNAi技术沉默TAF的FAP基因,观察雌激素刺激对TAF上述指标表达水平的影响。结果 TAF的FAP、ER-α/ER-β的表达水平高于成纤维细胞(n=10,P<0.05)。经雌激素刺激,成纤维细胞和TAF的FAP、ECM(Fibronectin、Laminin、Collgen I)和生长因子(TGF-β、IGF-1)表达水平,细胞增殖活力、细胞增殖通路相关信号分子(AKT、ERK、c-Fos、MEK)的磷酸化水平均上调;RNAi沉默FAP基因可抑制雌激素介导的上述生物学作用。结论 FAP基因表达是E2活化及促进子宫肌瘤基质成纤维细胞增殖过程中的关键,其可能在子宫肌瘤发病机制中具有重要作用并且可能成为治疗子宫肌瘤的新靶点。

13年子宫肌瘤的手术方式变化(附4452例病例)

目的：分析子宫肌瘤的手术方式变化及其因素。方法：回顾分析1999年1月至2011年12月我院妇产科收治的4452例子宫肌瘤患者的手术病史资料,统计子宫肌瘤的手术方式,分析手术方式变化的相关影响因素。结果：4452例患者初次发现子宫肌瘤的平均年龄为（35±6.7）岁,平均手术年龄为（45.8±7.7）岁。患者中单个肌瘤2248例（50.5%）,多发肌瘤2204例（49.5%）;有明显临床症状者3330例（74.8%）,无明显临床症状者1122例（25.2%）。患者中行腹腔镜、宫腔镜、剖腹、阴道手术者分别占67.5%、7.2%、24.9%、0.4%;其中行子宫切除术2572例（57.8%）,行保留子宫肌瘤的切除术1880例（42.2%）。2006年~2011年收治的患者中行保留子宫的手术超过行子宫切除术者,保留子宫手术率平均为58.6%,最高达64.8%。子宫保留概率与患者年龄呈线性负相关（P=0.000）。结论：内窥镜手术已替代传统剖腹手术成为子宫肌瘤主流手术方式,保留子宫手术已成为子宫肌瘤术式发展的主要趋势,子宫动脉阻断技术的应用使更多患者的子宫获得完整保留。

肿瘤细胞能量代谢的特点及调控机制

与正常细胞相比,肿瘤细胞具有无限复制潜能、凋亡抵抗、屏蔽抗生长信号、持续血管生成、组织侵袭转移等能力。而支持以上肿瘤细胞特性所需的微环境需要、能量供给和代谢通路即是肿瘤特性研究的核心,肿瘤细胞能量代谢特征性表现为有氧糖酵解,即Warbuerg效应。在能量代谢调控中,需要限速酶或关键酶的参与,特别是在缺氧诱导因子参与的酸性环境情况下,各个酶的促瘤作用需要引起重视。当然,在肿瘤代谢调控中的癌基因同样扮演着重要角色。

坏死性凋亡调控机制及其在肿瘤病理机制中的作用

坏死性凋亡是非caspase依赖的程序性细胞死亡形式,由受体相互作用蛋白激酶1/3(receptor interacting protein kinase 1/3,RIPK1/3)和混合连接激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)介导,具有与坏死相同的形态学特征。坏死性凋亡在肿瘤病理机制中具有双重作用,可以补偿性清除和杀灭凋亡耐受的肿瘤细胞,发挥抑制肿瘤效应;也可以通过激发肿瘤微环境炎症反应,促进肿瘤发生发展、侵袭转移。本文综述了坏死性凋亡的调控机制及其在肿瘤发生进展的生物学效应和病理学意义。

肿瘤相关中性粒细胞蛋白酶在肿瘤增殖、侵袭及转移病机中的作用

炎性微环境与肿瘤发生、发展关系十分密切。近年研究发现,肿瘤微环境中存在大量中性粒细胞浸润现象,即肿瘤相关中性粒细胞(TANs),深入研究证实TANs不仅参与肿瘤炎性微环境的形成和维持,而且广泛涉及肿瘤病理过程。TANs合成分泌大量蛋白酶,与肿瘤细胞增殖、侵袭、转移和新生血管形成密切相关;其中弹性蛋白酶主要参与肿瘤的增殖过程;组织蛋白酶与肿瘤的转移、侵袭和血管组织重塑密切相关基质金属蛋白酶调控肿瘤血管生成和转移。对TANs及其蛋白酶的深入研究可为肿瘤病理机制提供新的认识,而以蛋白酶为靶点来调控、抑制肿瘤细胞生长,可能成为干预肿瘤发生、发展的重要方法。

中性粒细胞弹性蛋白酶、金属基质蛋白酶9对卵巢癌细胞膜E-cadherin、MUC16表达的影响

目的检测中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase, NE)、金属基质蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)对体外卵巢癌细胞膜蛋白E-cadherin、黏蛋白16(mucin16,MUC16)表达的影响。方法体外培养人卵巢癌OVCAR3细胞。温控4℃,MMP-9、NE、0.125%胰蛋白酶分别处理OVCAR3细胞,光镜下观察不同时间段细胞形态学变化;采用Western印迹法检测OVCAR3细胞中E-cadherin、MUC16总体表达;免疫荧光技术定位E-cadherin、MUC16。应用酶联吸附测定技术(ELISA)定量培养基中脱落的MUC16胞外段蛋白。结果 NE、MMP9处理细胞后,细胞形态由平铺鹅卵石样呈细长/纺锤状,细胞间逐渐分离、扩散。NE、MMP9处理24h后E-cadherin表达均显著下降,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),而0.125%胰酶组与对照组之间差异无统计学意义。免疫荧光检测结果检测E-cadherin、MUC16主要定位在细胞膜。ELISA结果显示,MMP-9处理细胞后,上清液中MUC16胞外段CA125的含量明显增高。结论中性粒细胞相关蛋白酶NE、MMP9诱导细胞形态由平铺鹅卵石样呈细长/纺锤状,细胞间逐渐分离、扩散。两者通过酶解卵巢癌细胞膜上E-cadherin,促进上皮间叶转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT),细胞间接触和极性的丧失,进一步脱落。此外,MMP-9可以降解细胞膜上MUC16蛋白,使MUC16胞外段脱落,揭示局部MMP-9酶浓度升高与血清学CA125水平有一定关联。

Ki-67、p53等免疫指标在上皮性卵巢癌预后判断及化疗敏感性预测中的价值

卵巢癌是一种常见的妇科恶性肿瘤,其中绝大多数为上皮性卵巢癌。大部分卵巢癌确诊时已处于疾病晚期,往往预后不良。铂类耐药是晚期或复发性卵巢癌预后不良的重要原因,而合理敏感的化疗方案可提高卵巢癌患者的术后生存率,延长患者生存期。临床上有效、便捷的预测卵巢癌患者预后及化疗敏感性的生物学指标包括Ki-67、p53、雌激素受体、孕激素受体等,其表达水平对判断上皮性卵巢癌患者化疗敏感性及其预后具有预测价值。

RhoA/ROCK信号在子宫腺肌病在位及异位内膜中的表达及其与临床特征的相关性

目的探讨Rho GTP酶激活蛋白26(ARHGAP26)及RhoA/Rock信号蛋白在子宫腺肌病中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR和Western-blotting方法分别检测ARHGAP26及RhoA、ROCK1、ROCK2信号蛋白在20例子宫腺肌病患者的在位内膜(EU)、异位内膜(EC)组织以及20例增生期放置宫内节育器女性的子宫内膜组织(对照组)中的表达情况。结果RT-PCR检测显示:RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA在各组中均有表达,在EC、EU组中表达均高于对照组(P<0.01),且EC组高于EU组(P<0.01);而ARHGAP26 mRNA在EC、EU组中表达低于对照组(P<0.01),但EC组与EU组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。蛋白质印迹检测显示:RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达在EC组、EU组中表达均高于对照组(P<0.01),且ROCK1在EC组中的表达高于EU组(P<0.05),但RhoA、ROCK2在EC组及EU组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);而ARHGAP26在EC、EU组中表达均低于对照组(P<0.01),但EC组与EU组之间差异无统计学意义(P>0.05)。按月经量分别将EU组和EC组分为月经量正常组及月经量过多组,月经量过多组RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA及蛋白表达高于月经量正常组(P<0.01);而ARHGAP26 mRNA表达则正好相反(P<0.01);再按痛经程度分别将EU组和EC组分为轻度、中度、重度痛经组,RhoA、ROCK1、ROCK2mRNA及蛋白表达在EU组和EC组的重度痛经组中较轻、中度痛经组明显升高(P<0.01);ARHGAP26表达则正好相反。结论子宫腺肌病EC/EU组RhoA/ROCK mRNA及蛋白均呈高表达,ARHGAP26呈低表达,并与子宫腺肌症的临床特征相关,ARHGAP26及RhoA/ROCK在子宫内膜中的表达可能与子宫腺肌病的发病机制存在一定相关性。