白细胞介素17家族

白介素17(Interleukin-17,以下也称IL-17A)是近年来发现的一种促炎症性细胞因子,主要由活化的记忆性CD4+T淋巴细胞分泌,是含有一个N-末端信号肽的155个氨基酸的糖蛋白.它与单纯疱疹病毒的开放阅读框架基因13(HSVS13)编码的蛋白质有57%的同源性,与小鼠的细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-8(CTLA-8)有63%的同源性.IL-17A通过与受体特异性结合,发挥着促进炎症发展、免疫应答、造血等多种功能[1].

黑曲霉菌pyrG缺陷株的建立

运用紫外线照射致突变方法建立了黑曲霉菌ATCC 12 0 49,134 96和N40 2等 3种菌株的乳清酸核苷 5′ 磷酸脱羧酶基因 (pyrG)缺陷株。其中ATCC 134 96是一种蛋白酶缺陷株。含黑曲霉菌pyrG基因的重组质粒 pY 1.2可使它们发生转化 ,成为Pyr+ ,转化效率约为 8～ 40转化子 / μgDNA。这些

黑曲霉菌为宿主菌的重组表达性质粒的构建

目的 建立以pyrG基因为选择标志 ,以黑曲霉菌为宿主菌的蛋白质表达系统。 方法 以PCR扩增获得的黑曲霉菌 pyrG基因的部分序列片段为探针作两次噬菌斑原位杂交 ,从黑曲霉菌ATCC 12 0 49基因文库中克隆获得长度为 9.8kb的DNA片段 ,将其中含 pyrG基因的 2 .3kb片段亚克隆至表达性载体PIGF中 ,获得重组质粒。对克隆基因进行了全基因测定和分析。以黑曲霉菌ATCC 12 0 49的 pyrG缺陷株M 5 4为受体菌 ,用聚乙二醇 /氯化钙方法作基因转化实验 ,将重组质粒导入该受体菌并在其中表达。结果 从黑曲霉菌ATCC 12 0 49基因文库中克隆获得了pyrG基因 ,构建了含该基因的重组表达性载体 pYG1.2。序列分析表明该基因与黑曲霉菌L112的 pyrG基因编码序列的同源性为 93 .9% ,两者经推导的氨基酸的同源性为 98.9%。重组质粒 pYG1.2可使黑曲霉菌ATCC 12 0 49的 pyrG缺陷株M5 4发生基因转化 ,成为Pyr+ 。结论 在克隆了 pyrG基因的基础上成功构建了以 pyrG基因为选择标志 。