牙囊在牙萌出骨重塑的调控作用及机制研究进展

牙萌出是一个复杂的生理过程,涉及牙槽骨的吸收和形成。研究表明,牙囊通过调节牙齿周围骨组织重塑,在牙萌出中发挥关键作用。牙囊分泌多种趋化因子招募单核细胞,并通过RANKL/RANK/OPG轴促进破骨细胞分化成熟,导致冠方骨质吸收形成萌出道;同时牙囊内富含具有成骨分化潜能的牙囊细胞,在TGF-β/BMP和Wnt等信号通路以及表观遗传的调控下诱导根方牙槽骨形成,为萌出提供动力。近年来,有关牙萌出骨重塑机制研究取得了新进展,本文就牙萌出过程中牙囊参与调控骨重塑的细胞及分子机制作一综述。

沉默Versican V0/V1对小鼠牙乳头细胞生物学行为的影响

目的探究多功能蛋白聚糖(Versican)V0/V1对小鼠牙乳头细胞(mouse dental papilla cells,mDPCs)生物学行为的影响。方法体外培养E16.5d胎鼠mDPCs,使用小干扰RNA(siRNA)沉默mDPCs的Versican V0/V1基因,通过qRT-PCR和免疫荧光染色验证沉默效率;通过EdU实验检测细胞增殖率,划痕实验及Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移能力;碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色分别评估mDPCs的矿化情况,并利用qRT-PCR检测其成牙和矿化相关基因表达水平。结果siRNA转染后,与si-NC组相比,si-Versican V0/V1组mDPCs的增殖能力及迁移能力减弱(P<0.01),si-Versican V0/V1组碱性磷酸酶染色更深且矿化结节数量增加,si-Versican V0/V1组成牙和矿化相关的基因表达量增加(P<0.05)。结论沉默Versican V0/V1抑制mDPCs增殖和迁移,但促进mDPCs成牙分化和矿化。

可注射型富血小板纤维蛋白对人根尖牙乳头干细胞生物学行为的影响

目的探讨可注射型富血小板纤维蛋白(injectable platelet rich fibrin,iPRF)对人根尖牙乳头干细胞(human stem cells from apical papilla,hSCAPs)生物学行为的影响。方法酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定可注射型富血小板纤维蛋白提取液(injectable platelet rich fibrin extract,iPRFe)生长因子的含量;CCK-8、Transwell实验、茜素红染色分别检测iPRFe对hSCAPs增殖、迁移、矿化诱导的影响;荧光实时定量PCR检测与成骨/成牙向分化相关基因的mRNA表达水平。结果iPRFe中可检测到血小板衍生生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF1)和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1);iPRFe能促进hSCAPs的增殖,且在1/4×浓度时hSCAPs增殖效果最佳;1/4×浓度的iPRFe对hSCAPs的迁移和矿化也有明显的促进效果;iPRFe还可明显促进碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA的表达(P<0.05)。结论iPRF能够促进hSCAPs的增殖、迁移和矿化,有望为牙髓再生提供可能。

仿生矿化纳米磷酸钙对牙本质小管封闭性能的评价

目的 制备仿生矿化的纳米磷酸钙,并探讨其对牙本质小管的封闭性能。方法 采用DMEM仿生矿化策略制备无定形磷酸钙材料(DMEM based amorphous calcium phosphate, DACP),运用透射电子显微镜(TEM)、傅里叶变换红外光谱扫描(FTIR)等检测观察其理化表征。选择口腔上皮角质形成细胞(HOK)和牙髓细胞(DPC)分别与材料共培养24 h后,CCK-8法评估材料的生物相容性。收集完整无龋的牙齿制备牙本质片,用DACP材料悬液均匀涂抹牙本质片,设置阳性对照NovaMin组和空白对照组,分别处理1、7 d后扫描电子显微镜(SEM)评估牙本质片的表面和截面封闭效果。结果 TEM显示DACP为均匀球形无定形纳米颗粒,随矿化时间的延长粒径有所增加。CCK-8结果显示HOK和DPC在25、50、100、200μg/mL DACP下细胞活力均较好,提示材料有较好的生物相容性。牙本质片被处理1 d后DACP组牙本质小管大部分封闭;被处理7 d后DACP组牙本质小管表面呈现完全封闭的状态,且牙本质片截面可见DACP可渗入小管内。结论 运用DMEM仿生矿化策略制备的纳米磷酸钙具有较好的生物相容性和牙本质小管封闭作用,有望成为一种新的脱敏材料。

转录因子激活蛋白2C对小鼠磨牙胚发育的影响

目的探究转录因子激活蛋白2家族的成员转录因子激活蛋白2C(TFAP2C)在小鼠磨牙胚发育过程中的表达及其影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析胚胎14.5(E14.5)天小鼠胚胎各器官及E12.5~E18.5天和出生后0~7(P0~P7)天的小鼠磨牙胚内Tfap2c的相对表达水平,冰冻切片免疫荧光染色显示Tfap2c在小鼠磨牙胚内的表达位置。采用牙胚体外培养的方法,探究敲降Tfap2c对小鼠磨牙胚发育的影响,RT-qPCR检测成牙本质细胞表达相关基因的相对表达水平。分离并提取小鼠牙胚间充质细胞进行培养,探究敲降Tfap2c对小鼠牙胚间充质细胞的影响,划痕愈合实验检测细胞迁移,细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖。结果Tfap2c基因在小鼠磨牙胚发育早期相对表达水平较高。E13.5天,Tfap2c在小鼠磨牙胚上皮组织与间充质组织内均有表达,二者的相对表达水平差异无统计学意义(t=1.06,P=0.472)。E14.5天,Tfap2c在小鼠磨牙胚初级釉结附近的间充质组织内表达,小鼠磨牙胚间充质组织内Tfap2c的相对表达水平(1.000±0.036)显著高于上皮组织(0.199±0.008)(t=37.29,P<0.001)。体外培养小鼠磨牙胚并敲降Tfap2c后,小鼠磨牙胚牙尖相对高度(0.708±0.171)及牙尖高度与牙冠高度的比值(0.321±0.068)均显著低于对照组(分别为1.000±0.287和0.483±0.166)(t=2.79,P=0.012;t=2.85,P=0.015);对照组的牙冠相对高度(1.078±0.206)及相对宽度(1.000±0.116)与敲降组的差异均无统计学意义(分别为0.993±0.254和0.999±0.122)(t=0.83,P=0.419;t=0.01,P=0.992)。体外培养小鼠磨牙胚内敲降Tfap2c,成牙本质细胞表达相关基因Dspp和Dmp1相对表达水平均显著降低(t=15.33,P<0.001;t=13.81,P<0.001)。在小鼠牙胚间充质细胞内敲降Tfap2c,划痕愈合实验显示,对照组细胞48 h划痕宽度显著小于敲降组(t=29.86,P=0.001);CCK-8法检测显示两组细胞间各时间点吸光度值的差异均无统计学意义(P>0.05);Tfap2c敲降组牙胚间充质细胞内成牙本质细胞表达相关基因Dspp和Dmp1相对表达水平显著低于对照组(t=3.86,P=0.031;t=4.36,P=0.022)。结论Tfap2c在小鼠磨牙胚发育早期表达,主要表达于小鼠磨牙胚间充质组织内,敲降Tfap2c影响小鼠磨牙胚牙尖形成,影响牙胚间充质细胞迁移。

103例孤独症谱系障碍儿童患龋情况及全身麻醉下牙齿治疗项目分析

目的了解进行全身麻醉下牙齿治疗的孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)儿童的患龋情况及牙齿治疗内容特点。方法选择2016年4至11月参与中央财政支持的中华口腔医学会“关爱孤独症儿童口腔健康”项目,全身麻醉下进行牙齿治疗的103例ASD患者作为ASD组,病例来源于我国13家口腔专科医院,依据年龄、性别,应用分层倾向评分配比法选择2015年1月至2018年11月在相同13家口腔专科医院接受全身麻醉下牙齿治疗的97名无全身疾病的儿童作为对照(对照组),对两组儿童的龋失补牙数(decay missing filling tooth,DMFT/dmft,DMFT表示恒牙,dmft表示乳牙)和全身麻醉下牙齿治疗的内容进行统计分析。结果ASD组与对照组儿童人均DMFT/dmft[M(Q25,Q75)]分别为0(0,3)/11(8,14)和0(0,3)/9(7,13),两组差异均无统计学意义(P>0.05)。全身麻醉下人均牙齿治疗数量ASD组[13(11,15)颗]显著高于对照组[12(9,14)颗](P<0.01);ASD组儿童人均牙髓治疗数量[3(2,6)颗]显著高于对照组[2(1,4)颗](P<0.05)。结论进行全身麻醉下牙齿治疗的ASD与对照组儿童相比,DMFT/dmft差异无统计学意义,但ASD组儿童全身麻醉下牙齿治疗数量相对更多,龋坏程度相对较重。