大鼠颌骨与胫骨骨髓基质细胞生物学特性和基因表达差异的比较

目的 :比较大鼠颌骨来源骨髓基质细胞(M-BMSCs)与胫骨来源骨髓基质细胞(T-BMSCs)生物学特性的差异。方法:体外通过全骨髓贴壁法,分离和培养SD大鼠M-BMSCs和T-BMSCs,取第3代细胞用于:1流式细胞检测鉴定表面标志;2MTT、细胞周期、克隆形成率检测细胞增殖能力差异;3成骨、成脂诱导及染色检测细胞多项分化潜能;4碱性磷酸酶(ALP)活性、染色、免疫荧光染色检测细胞成骨活性的差异;5荧光定量PCR检测Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、Col I的表达差异和成骨诱导后各基因的表达变化。结果:1 M-BMSCs和T-BMSCs阳性表达CD29、CD44,阴性表达CD45;2MTT、细胞周期检测、克隆形成率显示T-BMSCs细胞增殖能力较高;3M-BMSCs在成骨诱导后矿化能力更强;而T-BMSCs成脂诱导形成脂滴的能力更强;4M-BMSCs表达ALP的水平更高;5荧光定量PCR示2种细胞的Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、ColⅠ表达存在差异。结论:体外培养的M-BMSCs和TBMSCs有着不同的生物学特点,其相关基因Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、ColⅠ的表达上存在差异。

大鼠颌骨与胫骨骨髓基质细胞间接共培养后生物学差异的比较

目的 SD大鼠颌骨骨髓基质细胞(M-BMSCs)与胫骨骨髓基质细胞(T-BMSCs)体外间接共培养后,检测两者生物学特性和相关基因表达的变化。方法应用全骨髓贴壁法,分离和培养M-BMSCs和T-BMSCs。取第三代细胞用Transwell小室间接共培养后,做以下检测。1MTT检测细胞增殖能力差异;2ALP活性、ALP染色、免疫荧光染色检测细胞成骨活性的差异;3荧光定量PCR检测Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、Col I的表达差异和成骨诱导后的表达变化。结果 1全骨髓贴壁法能分离和培养M-BMSCs和T-BMSCs;2间接共培养后,M-BMSCs和T-BMSCs增殖活力减弱;3共培养条件提高了T-BMSCs和抑制M-BMSCs早期表达ALP的能力;4间接共培养后,M-BMSCs和TBMSCs中Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、Col I基因表达出现变化。结论 M-BMSCs和T-BMSCs间接共培养后,两者的生物学特点的改变和相关基因表达改变。