SOD类似物阻断百草枯诱导的N27细胞凋亡的作用

目的探讨在离体培养的细胞中,SOD类似物[manganese(Ⅲ)meso-tetrakis(N,N′-diethylimidazolium-2-yl)porphyrin,MnTDM]阻断百草枯诱导的N27细胞凋亡的作用。方法以N27细胞为多巴胺能神经元的细胞模型,检测不同浓度的MnTDM对百草枯诱导的N27细胞凋亡的保护作用,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性及代谢状态;电镜观察凋亡形态;免疫细胞化学染色法观察凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果经百草枯作用后N27细胞活性下降,且其下降程度与百草枯浓度的升高呈线性关系,MnTDM明显阻断百草枯诱导的细胞活性下降(P<0.05),且该阻断作用与MnTDM的浓度成正相关;MnTDM预处理后,电镜观察到细胞凋亡形态好转,凋亡相关蛋白Bcl-2表达升高,Bax表达降低,Bcl-2/Bax值升高。结论MnTDM对百草枯介导的凋亡有一定的保护作用,提示其可能对帕金森病患者的临床防治有一定作用。

不同神经毒素对神经细胞Caspase-3影响的研究

目的探讨不同神经毒对N27细胞Caspase-3的影响。方法使用不同的神经毒素1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)和百草枯(Paraquat,PQ)处理N27细胞,四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazzol-2-y1)-2,5-diphenyl-tetrazdium Bromide,MTT]法检测细胞活性及代谢状态;RT-PCR检测凋亡相关基因Caspase-3的转录。结果经MPP+、百草枯作用后N27细胞活性下降,且其下降程度与MPP+、百草枯浓度的升高呈线性关系;MPP+、百草枯作用后N27细胞Caspase-3 mRNA表达水平升高。结论MPP+、百草枯引起N27细胞生长抑制,并可促进N27细胞中Caspase-3的表达和神经细胞凋亡的发生,神经细胞的凋亡可能是引发帕金森病的因素之一。

锰卟啉络合物对MPTP诱导的帕金森病小鼠的防治作用(英文)

目的:观察锰卟啉络合物[manganese(Ⅲ)meso—tetrakis(N,N’-diethylimidazolium-2-yl)porphyrin,MnTDM]对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的早期帕金森病模型小鼠的防治效果,探讨其可能的作用机制。方法:C57BL/6雄性小鼠随机分为MPTP模型组(连续3 d皮下注射25 mg/kg MPTP),MnT-DM+MPTP组(于MPTP注射前1 h皮下注射15 mg/kg MnTDM)以及MnTDM对照组、生理盐水对照组,每组10只。末次注射后第3日进行爬杆和游泳等行为学检测;HPLC—ECD法检测各组小鼠纹状体多巴胺(dopamine,DA)及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)水平;硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法测定各组小鼠纹状体丙二醛(malon-dialdehyde,MDA)水平。结果:急性注射MPTP可建立早期帕金森病小鼠模型;与对照组相比,MPTP组小鼠纹状体DA、DOPAC、HVA水平明显下降(P<0.01),MDA水平明显升高(P<0.05);但短期对小鼠行为学指标影响不大。MnTDM能部分抑制MPTP的上述作用;与MPTP组相比,MnTDM+MPTP组小鼠纹状体DA、DOPAC、HVA水平明显上升,MDA水平明显下降(P均<0.05)。各组小鼠间行为学指标无统计学差异。结论:MnTDM能抑制脂质过氧化,促进多巴胺类神经递质分泌,对MPTP诱导的帕金森病小鼠有一定防治作用。

MnTDM阻断百草枯诱导的N27细胞生长抑制的作用

目的探讨在离体培养的细胞中,SOD类似物[manganese(Ⅲ)meso-tetrakis(N,N′-diethylimidazolium-2-yl)porphyrin,MnTDM]阻断百草枯诱导的N27细胞生长抑制作用。方法以N27细胞为多巴胺能神经元的细胞模型,检测不同浓度的MnTDM对百草枯诱导的N27细胞损伤的阻断作用,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性及代谢状态,免疫细胞化学及Western blot检测酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达,丙二醛(malondialdehyde,MDA)由硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法测定。结果经百草枯作用后N27细胞活性下降,且其下降程度与百草枯浓度的升高呈线性关系。百草枯明显抑制N27细胞TH表达和明显升高MDA的浓度。MnTDM明显阻断百草枯诱导的细胞活性下降(P<0.05)、TH表达抑制和MDA含量升高(P<0.05),且该阻断作用与MnTDM的浓度有关。结论氧化应激在百草枯介导的多巴胺能神经元损伤中起了重要作用,MnTDM对百草枯介导的氧化应激损害有一定的防治作用。提示其可能对帕金森病患者的临床防治有一定作用。