加强医学生血液内科临床实习期间人文教育方法的探讨

分析医学生人文教育的迫切性,从临床课教师的角度,提出在临床教学阶段,根据临床实际情况,增加医患沟通、培养团队协作精神、规范医疗文书书写、加强医德医风、隐私保护性医疗是实习期间加强人文教育的措施。

慢病毒载体介导的自杀基因系统YCD/5-FC对人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞杀伤效应的研究

背景与目的:酵母菌胞嘧啶脱氨酶(yeast cytosine deaminase,YCD)可将无毒性的抗真菌药5-氟胞嘧啶(5-fluorocytosine,5-FC)转化为细胞毒性产物氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),进而阻抑DNA、RNA和蛋白质合成,引起细胞死亡。本研究中构建含YCD基因的慢病毒载体质粒,体内外观察YCD/5-FC自杀基因系统的杀伤效应。方法:应用亚克隆技术将YCD和绿色荧光蛋白基因(green fluorescence protein,GFP)连接至慢病毒空载体pFUW,构建获得pGC-FU-YCD-GFP。将3质粒系统(含包装质粒、包膜蛋白质粒和转移质粒)脂质体法共转染包装细胞293T,获得的慢病毒转染人Jurkat细胞,流式细胞仪(FACS)和Western blot检测Jurkat/YCD-GFP表达水平;加入前体药物5-FC,观察对靶细胞的杀伤情况和旁观者效应。转基因细胞接种至裸鼠前肢皮下,观察体内肿瘤杀伤情况。结果:慢病毒载体3质粒系统感染293T细胞后,获得的慢病毒滴度为1.2×108 TU/mL。该病毒可高效转染人Jurkat细胞,感染率达96.93%,Western blot显示转基因细胞可分泌YCD蛋白。100μmol/L 5-FC作用96 h可杀伤(89.37±6.57)%的Jurkat/YCD-GFP细胞。混合培养提示存在明显的旁观者效应。转基因细胞可在小鼠体内致瘤,5-FC可明显抑制肿瘤生长。结论:成功构建慢病毒载体pGC-FU-YCD-GFP,YCD/5-FC自杀基因系统在体内外均有显著的特异性杀伤效应。

遗传性凝血因子XIII缺陷症基因突变的检测

目的研究一例遗传性凝血因子XIII(FXIII)缺陷症家系的基因缺陷。方法采用PCR、核苷酸测序的方法对该家系先证者及其家属外周血白细胞基因组DNA的FXIIIA基因进行检测。结果先证者第72045位缺失两个核苷酸A,位于外显子5;先证者的父母及先证者的姐姐分别在DNA水平相同位点呈杂合缺失。结论这例遗传性凝血因子FXIII缺陷症是由于FXIIIA基因缺陷造成。

4-羟基水杨酰苯胺对T淋巴细胞白血病肿瘤增殖与凋亡的影响

目的:研究4-羟基水杨酰苯胺(4-hydroxysalicylaniline,HDS)对T淋巴细胞白血病细胞Jurkat和Hut-78的抑制效果及其机制。方法:体外实验中,梯度浓度的HDS处理Jurkat和Hut-78细胞后,以CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖状况;用细胞流式术检测细胞周期变化,通过Western blot检测周期相关蛋白的表达水平;用细胞流式术检测细胞凋亡水平,通过Western blot检测凋亡相关蛋白的表达水平;以γ-H2AX免疫荧光染色检测DNA损伤状况,并通过Western blot检测DNA损伤相关蛋白的表达水平。体内实验中,通过皮下注射Jurkat细胞构建小鼠肿瘤模型,处理组腹腔注射HDS,对照组给予等量溶剂,记录小鼠体重与肿瘤体积变化,13 d后,取肿瘤组织,通过HE染色观察组织形态,并通过Ki67和γ-H2AX的免疫组织化学染色,分析药物对肿瘤组织增殖与DNA损伤的影响。结果:在体内和体外,证明了HDS可通过诱导Jurkat和Hut-78细胞S期细胞周期阻滞与凋亡,并且通过CHK1/CHK2信号通路的磷酸化激活,加重DNA损伤,抑制T淋巴细胞白血病肿瘤,但HDS对小鼠无明显毒性。结论:HDS可作为潜在的抗T淋巴细胞白血病药物,可抑制细胞周期,诱导细胞凋亡,并通过CHK1/CHK2信号通路影响DNA损伤修复过程。

构建生殖中心辅助生育治疗患者护理质量评价指标体系

目的构建辅助生育治疗护理质量评价指标体系,为科学地评价生殖中心护理质量提供依据。 方法基于结构-过程-结果(SPO)质量模型为理论基础,应用文献查询、现场流程追踪、德尔菲专家函询和层次分析法,构建生殖中心辅助生育治疗护理质量评价指标体系。 结果专家函询两轮问卷有效回收率(RR)均为100%;专家权威系数Cr值分别为0.813、0.845;协调系数W值分别为0.331、0.372,均有统计学意义(P<0.01)。最终形成了三大维度、14个二级指标、47个条目的辅助生育治疗护理质量评价指标体系;运用Yaaph软件确定了一级和二级指标权重,并通过一致性检验(Cr<0.1),三级条目的变异系数均<0.20。 结论生殖中心辅助生育治疗护理质量指标体系权重分配合理,指标明确,具有系统性和客观性,值得临床推广。