DADLE预处理对体外循环心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的通过建立猪体外循环（cardiopulmonary bypass，CPB）心肌缺血再灌注模型，探讨δ-阿片受体激动剂脑腓肽（[D-Ala2，D-Leu5]Enkephalin，[D-Ala2，D-Leu5]，DADLE）的心肌保护作用。方法将12只成年猪（30～35kg）随机分为对照组（常规CPB）（n=6）和DADLE组（CPB前1h静脉应用DADLE，1mg／kg）（n=6）。常规建立体外循环模型，主动脉阻断同时灌注改良st.Thomas停搏液。每组于CPB前、主动脉开放时、CPB结束时、主动脉开放后1h、主动脉开放后2h检测冠状静脉窦血肌钙蛋白（TnT）和肌酸激酶同功酶（CK-MB）含量，相应时间点监测左室收缩压（LVSP），左室舒张末期压（LVEDP）、左室内压最大变化速率（±dp／±dtmax），主动脉开放后2h取左心室心肌，测定心肌ATP含量。结果（1）和预处理组相比，对照组心功能指标明显下降；（2）对照组的TnT和CK-MB较预处理组明显升高，相反，其ATP含量明显降低。结论在猪心肌缺血再灌注中，非选择性δ-阿片受体激动剂DADLE具有明显的心肌保护作用。

人真核表达的质粒载体pLenti6/V5-DEST-Cx43的构建及鉴定

目的构建人真核表达的质粒载体pLenti6/V5-DEST-Cx43,为研究连接蛋白Cx43在心肌细胞间通讯、心脏胚胎发育及心肌细胞分化中的作用机制提供物质基础。方法从质粒p18-T上用限制性内切酶BamH1、Xho1切下Cx43cDNA片断,进行琼脂糖电泳,割胶回收纯化;限制性内切酶BamH1、Xho1酶切质粒pENTR11,将线形化的载体与回收的Cx43cDNA片断用T4DNA连接酶连接,测序后通过LR反应克隆到慢病毒载体pLenti6/V5-DEST中。结果凝胶电泳和测序结果均证明已将人类Cx43cDNA克隆到慢病毒载体pLenti6/V5-DEST中。结论成功构建了人真核表达的质粒载体pLenti6/V5-DEST-Cx43。