上海市部分地区居民牙齿缺失及修复情况调查分析

目的调查上海市普陀区、闸北区部分中老年居民牙齿缺失及修复的情况。方法通过问卷调查方式和口腔检查对上海部分地区不同年龄的居民进行抽样调查。结果共调查人数为853人,其中男性394人,女性459人。不同年龄、不同性别、不同经济收入、不同文化程度居民的牙齿缺失和修复率均有显著差异,其中牙列缺损占91.8%,牙列缺失为8.2%,失牙原因中龋齿占80.6%,牙周病占14.7%。结论应加强龋齿、牙周病的防治,有效地开展口腔健康教育,强化人们牙齿保健意识,建立良好的口腔卫生习惯,同时应提高口腔治疗及修复水平并宣传修复的及时性和有效性。

不同浓度bFGF对犬骨髓基质细胞增殖、分化影响的实验研究

目的:研究不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对体外培养的beagle犬骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)增殖和分化的影响。方法:体外培养第2代BMSCs的培养液中分别加入不同浓度(25、50、100、200 ng/mL)的bFGF,连续6 d倒置显微镜下动态观察BMSCs的形态和生长情况,行MTT比色、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性定量检测、ALP和Von Kossa染色。结果:浓度为50 ng/mL的bFGF可明显促进犬的BMSCs增殖(P<0.05),但无显著促进犬BMSCs分化的作用(P>0.05)。结论:bFGF能有效促进犬BMSCs的增殖,且与bFGF剂量有关。

不同浓度重组人骨形成蛋白2和碱性成纤维生长因子对犬骨髓基质细胞的生物学作用

目的:骨形成过程由骨形成蛋白诱导开始,并受到多种生长因子的综合调控。为建立良好的细胞培养体系和配制含有多种生长因子的活性材料,观察不同浓度的重组人骨形成蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子对犬骨髓基质细胞增殖、成骨分化的影响。方法:实验于2007-05/07在上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔生物工程实验室完成。①实验材料:1岁beagle犬3只。重组骨形成蛋白2,碱性成纤维细胞生长因子(Peprotech)。②实验方法:犬肌注麻醉后,穿刺抽取2mL骨髓,离心制备骨髓基质细胞,进行原代培养。待细胞80%汇合时,胰酶+乙二胺四乙酸消化传代。③实验评估:取传至第3代的细胞,接种后分别加入重组骨形成蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子,各自分为0,25,50,100,200μg/L组。于第1,2,3,4,5,6天倒置显微镜下动态观察细胞形态;MTT比色法测定细胞增殖水平;碱性磷酸酶活性定量检测细胞成骨分化情况;于第6天行VonKossa及碱性磷酸酶染色。结果:①细胞形态观察:第3代骨髓基质细胞诱导培养3d后,多角形细胞增多,细胞逐渐向梭形或多边形转化,胞体膨大,存在大小形态不一的胞浆突起,胞核较大,位于细胞体一侧,偶见2个核仁;约6d细胞融合,仍以长梭形或线形为主,集落生长趋势明显。②细胞增殖测定:与空白对照组比较,100,200μg/L重组骨形成蛋白2能显著促进骨髓基质细胞生长,且浓度为100μg/L时随作用时间的延长细胞生长速度增加尤为明显(P<0.01);50μg/L碱性成纤维细胞生长因子能显著促进骨髓基质细胞生长(P<0.05)。③细胞成骨分化测定:与空白对照组比较,25μg/L重组骨形成蛋白2能显著促进犬骨髓基质细胞分化,且随作用时间的延长细胞分化尤为明显(P<0.01)。碱性成纤维细胞生长因子无显著促进犬骨髓基质细胞分化作用。④VonKossa染色结果:各组均有明显钙结节形成。⑤碱性磷酸酶染色结果:各组胞质内均可见紫色颗粒,呈阳性表达。结论:100μg/L重组人骨形成蛋白2与50μg/L碱性成纤维细胞生长因子均能有效地促进犬骨髓基质细胞增殖,25μg/L重组人骨形成蛋白2可明显促进犬骨髓基质细胞成骨分化,为构建活性骨替代材料提供良好的实验平台。

热休克蛋白47在糖尿病大鼠皮肤创口愈合过程中的表达

目的:使用糖尿病大鼠模型探讨热休克蛋白47(47kDa heat shock protein,HSP47)在糖尿病大鼠皮肤创口愈合过程中的表达水平。方法:在距正常大鼠和糖尿病大鼠头部1cm的背部做一直径1cm的圆形全层皮肤创口,糖尿病大鼠分为不注射组、注射空质粒组和注射重组质粒组,在创口愈合的第3、5、7天分别取对照组和实验组大鼠的创周皮肤,应用免疫组织化学和Western免疫印记法(Western blotting)检测HSP47在各组大鼠皮肤创口愈合过程中的表达水平。结果:正常大鼠皮肤创周组织中HSP47的表达,在愈合过程中呈明显增高的趋势。同正常大鼠相比,糖尿病大鼠皮肤创口愈合缓慢,皮肤创口组织中HSP47的表达明显减少。注射重组质粒pTracer-CMV-HSP47的糖尿病大鼠皮肤创周组织中HSP47的表达增强。结论:HSP47在糖尿病大鼠皮肤创口组织中的低表达与糖尿病大鼠皮肤创口愈合缓慢密切相关。通过体外构建HSP47的重组质粒再注入糖尿病大鼠皮肤创周组织中的方法,可以增强HSP47在体内的表达。