EfFect of manoalide on apoptosis induced by deprivation of growth factors in vascular endothelial celLs

研究ｍａｎｏａｌｉｄｅ对除去生长因子（ａＦＧＦ和血清）而诱导的血管内皮细胞凋亡的影响．方法：通过细胞形态观察，ＤＮＡ凝胶电泳及荧光显微术等方法确定ｍａｎｏａｌｉｄｅ对细胞凋亡的抑制或促进作用．结果：向去除ａＦＧＦ和血清的培养液中加低浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（１－４μｍｏｌ·Ｌ－１），培养细胞４８ｈ，细胞的脱壁和ＤＮＡ片断化受到抑制；ｍａｎｏａｌｉｄｅ浓度为７μｍｏｌ·Ｌ－１时，促进细胞脱壁和ＤＮＡ片断化．结论：低浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（２μｍｏｌ·Ｌ－１）抑制血管内皮细胞凋亡，而较高浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（７μｍｏｌ·Ｌ－１）促进该细胞凋亡．

bcl-2基因在蛇毒诱导的血管内皮细胞凋亡中表达增加

通过去除培养液中生长因子和向培养液中加入响尾蛇毒两种方法诱导人脐带静脉血管内皮细胞发生凋亡，用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法检测被处理细胞的 ｂｃｌ－２基因的表达．结果表明在正常培养的细胞和用去除生长因子诱导凋亡的细胞中均未检测到 ｂｃｌ－２基因的表达，而在 １０μｇ／ｍＬ的蛇毒诱导细胞凋亡６ｈ后ｂｃｌ－２基因表达增加，并且其ｍＲＮＡ被剪接为两条．首次发现ｂｃｌ－２基因在蛇毒诱导的血管内皮细胞凋亡中表达增加和剪接现象．此研究丰富了ｂｃｌ－２基因调控细胞凋亡的资料，为深入探讨ｂｃｌ－２基因的作用机制奠定了基础．

血管内皮细胞凋亡过程中几种癌基因表达的研究

为了研究细胞凋亡的分子调控机制 ,用光学显微技术、DNA凝胶电泳和Northernblot方法 ,研究了去除生长因子 (FGF和血清 )和蛇毒诱导的两个血管内皮细胞凋亡系统中 p53、c H ras、c myc和bcl 2基因的表达 .发现去除生长因子诱导的细胞凋亡过程中 ,p53基因表达显著增加 ,c H ras和c myc基因表达无变化 ;蛇毒诱导细胞凋亡过程中 ,p53基因表达显著增加 ,c H ras和c myc基因表达无变化 .在正常生长和凋亡细胞中均未检测到bcl 2基因的明显表达 .实验结果表明 :p53基因参与上述两种细胞凋亡诱导系统的分子调控 ;c H ras基因只参与去除生长因子诱导的细胞凋亡过程 ,而不参与蛇毒诱导的细胞凋亡过程 ;这两种细胞凋亡诱导系统均与c myc基因表达无关 ;未见bcl 2基因明显参与血管内皮细胞的凋亡过程 .