核黄素诱导番茄幼苗抗白粉菌机理研究

研究了2mmol/L核黄素诱导感病番茄品种Moneymaker对白粉菌(Oidium neolycopersici)的抗性及相关生理反应:叶片H2O2积累、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量、超氧阴离子(O2-)产生速率和苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonialyase,PAL)、过氧化物酶(peroxidase,POD)活性的变化.核黄素诱导后番茄MM对O.ne-olycopersici的抗性增强,诱发了过敏反应(hypersensitive response,HR),番茄叶片内MDA的含量、O2-产生速率、PAL,POD活性均高于核黄素未处理,其变化趋势与抗病番茄品种G1.1560与白粉菌组成的非亲和组合相似.结果表明,H2O2的积累、膜脂过氧化、O2-,PAL和POD在核黄素诱导感病番茄对白粉菌的抗性反应中发挥重要作用.

番茄茎枯病病原菌鉴定

番茄茎枯病主要危害番茄的茎和果实,严重影响番茄的产量和品质,为此,采用组织分离法对河南商丘地区番茄茎枯病病原菌进行分离、纯化,测定其致病性,并进行形态学和分子生物学鉴定。结果表明,番茄茎枯病病原菌为链格孢菌(Alternaria alternate),其rDNA ITS序列与Gen-Bank中苹果链格孢菌(A.alternate)的ITS序列同源性为100%,与链格孢属的其他小孢子种聚在一个大的分支上。番茄茎枯病病原菌的鉴定为该病害的防治奠定了基础。

药用植物麦冬土壤中拮抗放线菌的分离和筛选

采用平板稀释分离法从麦冬植被土壤中分离得到放线菌52株,以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌为指示细菌,采用平板涂抹法筛选出17株有拮抗作用的放线菌,其中抑菌效果较好的放线菌是F13、F25、F50号菌株,其抑菌圈直径在15~20 mm之间,占分离得到放线菌总数的5.77%,F13号菌株的抑菌作用最强,抑菌圈直径达20 mm;采用平板对峙法进一步测定了F13、F25和F50菌株对棉花黄萎菌、番茄早疫菌和玉米串珠镰刀菌的菌丝生长抑制率,F13对黄萎菌的抑菌效果较强,抑菌率为56.7%,F25对串珠镰刀菌的抑菌效果较强,抑菌率为41.2%。

番茄抗白粉病必需基因ShGSTU1原核表达条件优化

采用RT-PCR技术从番茄中扩增谷光甘肽转移酶基因ShGSTU1,构建该基因的原核表达载体pET28aShGSTU1和pET32a-ShGSTU1,并对重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达条件进行优化,主要对诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度进行分析.结果表明:重组蛋白在表达载体pET28a中的最佳表达条件为1mmol/L IPTG,37℃诱导4h;在表达载体pET32a中的最佳表达条件为1mmol/L IPTG,30℃诱导5h.

低磷胁迫下辣椒幼苗过氧化物酶活性及其同工酶谱的分析

以4个辣椒品种"牛角椒"、"南纬金峰二号"、"茄门椒"和"8819线椒"为试材,采用水培方法,研究了常磷(1mmol/L)和低磷(0.01mmol/L)2个磷水平处理对不同辣椒品种叶片中过氧化物酶(POD)活性及其同工酶酶谱的影响。结果表明:低磷胁迫下,"牛角椒"、"茄门椒"和"8819线椒"的POD活性随着胁迫时间的延长出现先升高再下降随后又升高的趋势,"南纬金峰二号"的POD活性在整个胁迫过程一直升高;过氧化物同工酶谱的变化与酶活性变化相一致,低磷组酶活性均显著高于同期常磷组,且酶谱染色深度和谱带条数均高于同期常磷组,说明POD活性与植物的耐低磷性有关。

银杏内生真菌的分离纯化及抑菌性的鉴定

采用组织分离法从银杏(Ginkgo biloba)健康组织中分离得到25株内生真菌,根据菌株在PDA培养基上的培养特征,5株被鉴定为链孢霉菌属、4株为酵母属、4株为曲霉属,3株为毛霉属、3株为青霉属,2株为根霉属,1株为简梗孢霉属,3株分离菌株不产孢子。测定25株内生真菌对3种受试指示菌的抑制作用,共筛选得到11株至少对一种指示菌的生长有抑制作用的菌株,对抑菌活性较强的菌株进行形态学和显微分析鉴定。

氮源和磷源对金铁锁毛状根悬浮培养的影响

以生物量和总皂苷两个参数为指标,研究了氮源(NH+4,NO-3)与磷源(PO3-4)浓度对金铁锁毛状根悬浮培养过程中的影响。培养基中NH+4与NO-3的浓度比为1∶2时,毛状根生物量和总皂苷的收获量都达到最高值,PO3-4的浓度在6.25mmol/L时具有同样的效果;毛状根对培养液中NO-3和PO3-4吸收利用与其生长周期基本一致,它们的含量在20d左右下降到最低;综合考虑,氮源和磷源的最佳组合为NH+410mmol/L,NO-320mmol/L,PO3-46.25mmol/L。

干旱胁迫对番茄幼苗叶片SOD、POD和PAL活性的影响

以4个番茄品种为材料,研究了聚乙二醇模拟干旱胁迫处理后,番茄幼苗叶片中SOD、POD和PAL活性的变化。结果表明,4个番茄品种干旱胁迫处理后表现出相同的变化趋势,SOD活性显著增加,于48 h达到最大值,而后下降,整个过程中处理组活性均显著高于对照组;POD活性迅速增加,于24 h达到最大,其中雅致的增幅最大,处理组为对照组的4.13倍,随后活性快速下降,于48 h达到一个低值后,活性又有所回升,整个过程中处理组活性均高于对照组;雅致、Moneymaker处理组PAL活性先升后降,而菜都五号和超级908处理组PAL活性呈缓慢上升,活性均高于对照组。由SOD、POD和PAL活性分别得到的4个番茄品种的胁迫系数高低顺序一致,由高到低依次是雅致、Moneymaker、菜都五号、超级908,说明雅致响应积极,具有相对较强的清除活性氧和修复损伤、适应胁迫环境的能力。