HPLC法比较河南8个产地葛根中5种成分

目的采用HPLC法比较河南8个产地（林州、焦作、嵩县、方城、信阳、禹州、西峡和淅川）葛根Pueraria lobata（Willd.）Ohwi中5种成分的含有量。方法分析采用Phenomenex Luna C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;以甲醇-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长250 nm;柱温25℃。结果 3＇-羟基葛根素、葛根素、3＇-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元分别在0.029～0.86μg（r=0.999 8）、0.050～1.5μg（r=0.999 4）、0.024～0.72μg（r=0.999 6）、0.021～0.62μg（r=0.999 9）、0.001 2～0.037μg（r=0.999 9）范围内线性关系良好,平均加样回收率（n=6）98.1%～100.1%,RSD值1.03%～1.95%。结论各成分含有量均具有一定差异,其中以嵩县和林州产者较高。

慢性阻塞性肺疾病测评工具的现状与思考

慢性阻塞性肺疾病(COPD)测评工具的研制及应用已成为国内外研究的热点,并出现了大量的量表和问卷。比较不同量表/问卷的特点,选择合适的测评工具是目前亟待解决的问题。本文对国内外常用的测评工具进行了评价,并提出了相关思考,为完善COPD的疗效评价指标体系提供依据。

响应面法优选泽兰多糖的大孔吸附树脂纯化工艺

目的:考察8种大孔吸附树脂D3520、H103、HPD-100、HPD-700、AB-8、HPD722、S-8、HPD-600对泽兰多糖的纯化效果,以Box-Behnken法优化最佳大孔吸附树脂的最优纯化工艺.方法:以多糖保留率、脱色率、脱蛋白率的加权综合评分为指标,考察大孔树脂、洗脱流速、上样浓度、洗脱剂用量对纯化结果的影响,通过Box-Behnken设计建立响应面模型来优选大孔树脂泽兰多糖的工艺参数.结果:优选的泽兰多糖的大孔树脂纯化工艺为:取HPD-100大孔吸附树脂,泽兰多糖的上样质量浓度为0.03 g/mL,洗脱流速为1.1 mL/min,洗脱体积为40 mL,以此优选工艺纯化后,多糖保留率69.21%,脱色率60.24%,蛋白脱除率75.67%.结论:泽兰多糖的纯化工艺稳定可靠,HPD-100大孔吸附树脂纯化工艺效果良好,适合工业化生产.

HPLC-ELSD法测定人参不同部位13种人参皂苷的含量

目的建立同时测定人参药材主根、侧根、须根、芦头中13种人参皂苷类成分含量的高效液相色谱-蒸发光散射检测器(high performance liquid chromatography-evaporative light scattering detector,HPLC-ELSD)法。方法采用Venusil XBP C_(18)(L)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水梯度洗脱,流速:1 mL·min^(-1),柱温:20℃,蒸发光散射检测器参数:载气流量为2.9 L·min^(-1),压力为5.5×10~5Pa,漂移管温度为107℃,增益为1。结果人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rh_1、Rg_2、Rb_1、Rc、Rb_2、Rb_3、Rd、F_2、Rh_4、Rg_3分别在0.90~18.04、0.93~18.50、0.77~15.40、0.30~6.02、0.30~6.05、1.80~36.00、1.31~26.26、1.37~27.40、0.30~6.05、0.52~10.33、0.30~6.12、0.30~6.02、0.30~6.02μg内呈良好的线性关系(r>0.999 0),平均加样回收率(n=6)为97.1%~101.8%,RSD≤3.0%。结论该方法可用于同时测定13种人参皂苷的含量。

白屈菜多糖果胶酶提取及脱色工艺的优化

目的优化白屈菜多糖的果胶酶提取及脱色工艺。方法以多糖得率和多糖含有量为指标,采用加权评分法(权重各占50%),以正交法优化果胶酶对白屈菜多糖的酶解提取效果;以脱色率和多糖保留率为指标,采用加权评分法(权重各占50%),利用正交试验分别确定活性炭和双氧水的最佳脱色工艺。结果白屈菜多糖最佳酶提条件为酶解温度40℃,酶用量5%,酶解pH 3.0,酶解时间2 h;活性炭最佳脱色工艺为白屈菜多糖溶液加入0.5%的活性炭,调pH至3.0,50℃条件下水浴搅拌40 min,多糖保留率为88.56%,多糖含有量为68.03%;双氧水最佳脱色工艺为白屈菜多糖溶液加入10%双氧水,调pH至10.0,50℃条件下水浴反应1 h,多糖保留率为79.17%,多糖含有量为71.34%。结论该方法稳定,重复性好,可用于提取白屈菜多糖果胶酶。

HPLC法同时测定不同产地金花葵中6个成分的含量

目的建立同时测定金花葵中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、杨梅素和槲皮素6个成分含量的高效液相色谱法。方法采用Venusil XBP C18色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),以体积分数0. 1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1. 0 mL·min^(-1),检测波长为355 nm,柱温为25℃。结果绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、杨梅素和槲皮素分别在质量浓度0. 19～12. 42 mg·L^(-1)、0. 42～26. 64 mg·L^(-1)、3. 94～252. 0 mg·L^(-1)、2. 32～148. 4 mg·L^(-1)、0. 52～33. 12 mg·L^(-1)、0. 188～12. 06 mg·L^(-1)内呈现良好的线性关系(r≥0. 999 5),平均加样回收率(n=6)分别为100. 5%、99. 72%、99. 77%、99. 10%、99. 97%和98. 89%,RSD分别为2. 86%、1. 65%、1. 96%、1. 70%、2. 74%和1. 51%;不同产地金花葵中上述6个成分含量分别为0. 007 3%～0. 0261%、0. 015 9%～0. 074 8%、0. 648 3%～1. 076 3%、0. 196%～0. 582 0%、0. 038 8%～0. 118 5%和0. 020 2%～0. 052 7%。结论建立的方法能满足金花葵中6个成分含量的准确测定,为金花葵的质量评价以及合理开发提供参考。

泽兰多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用

目的探讨泽兰多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用。方法以小鼠脑、肝组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含有量为指标,维生素C为对照药物,考察小鼠灌胃高、中、低剂量[100、200、300 mg/(kg·d)]多糖对腹腔注射D-半乳糖致衰老模型的影响。结果与模型组比较,多糖组T-SOD、GSH-PX、CAT活性均显著提高(P<0.05,P<0.01),MDA含有量均显著降低(P<0.01)。结论泽兰多糖对D-半乳糖致衰老小鼠有较强的抗氧化作用,值得进一步开发。

HPLC法同时测定清肺抑火片中5种游离蒽醌类和5种结合蒽醌类成分含量

目的建立同时测定清肺抑火片中5种游离蒽醌类和5种结合蒽醌类成分含量的HPLC-UV方法。方法采用Phenomenex Luna C18(250 mm×4. 6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-体积分数0. 1%磷酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1. 0 m L·min^(-1),检测波长为254 nm,柱温为25℃。结果芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷,以及芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在质量浓度2. 13～170. 40 mg·L^(-1)、1. 12～89. 60 mg·L^(-1)、0. 43～34. 12 mg·L^(-1)、0. 54～43. 60mg·L^(-1)、1. 50～120. 40 mg·L^(-1)、0. 94～74. 80 mg·L^(-1)、0. 67～53. 60 mg·L^(-1)、0. 36～28. 92 mg·L^(-1)、1. 29～103. 20 mg·L^(-1)和1. 09～87. 20 mg·L^(-1)内线性关系良好;精密度、重复性试验结果 RSD值均小于3%;样品在24 h内峰面积RSD均小于3%;各成分加样回收率均在95%～105%内,RSD均小于3%。结论该方法可为完善清肺抑火片的质量标准提供依据。

固相萃取-高效液相色谱法测定大鼠血浆中大黄素甲醚及其药动学研究

目的:建立血浆中大黄素甲醚的血药浓度测定方法,研究大黄素甲醚在大鼠体内的药代动力学.方法:大鼠分高(105.6 mg/kg)、中(52.8 mg/kg)、低(26.4 mg/kg)3个质量分数灌胃给予大黄素甲醚后,于0.083~24.000 h内12个不同时间点采集大鼠血浆,采用固相萃取法处理血浆样品,高效液相色谱-荧光检测法(HPLCFLD)内标法测定血药浓度.采用Venusil XBP C18(L)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为V_(甲醇)∶V_(0.1%磷酸水)=70∶30,柱温30℃,激发波长435 nm,发射波长515 nm,以DAS2.0软件拟合计算药动学参数.结果:大黄素甲醚的血药质量浓度在0.024 2~5.920 0μg/m L范围内线性关系良好(r=0.992 7),检测限为0.008 1μg/m L,定量限为0.024 2μg/m L,提取回收率均大于90%,日内、日间精密度RSD均小于6%,高(105.6 mg/kg)、中(52.8 mg/kg)、低(26.4 mg/kg)3个质量分数大黄素甲醚药代动力学参数t_(1/2)分别为(10.97±6.6)、(14.23±11)、(13.25±5.6)min;ρ_(max)质量浓度分别为(0.49±0.17)、(0.41±0.15)、(0.29±0.12)μg/m L,AUC_(0-t)每小时质量浓度分别为(3.28±1.3)、(1.98±1.4)、(1.91±1.5)μg/m L.结论:本实验所建立的SPE-HPLC适用于大黄素甲醚在大鼠体内的血药浓度测定及其药代动力学研究,操作简便、快速、灵敏.

泽兰多糖酶提工艺的优化

目的优化泽兰多糖的酶法提取工艺。方法以多糖提取率为评价指标,考察酶种类、pH值、温度、酶用量、时间、料液比对酶提的影响,再通过Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为混合酶(果胶酶与纤维素酶,比例1∶1)用量2.3%,酶解时间1 h、料液比1∶30,多糖提取率2.033%。结论该方法稳定可行,重复性好,可用于酶提泽兰多糖。

白屈菜多糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的:探索白屈菜多糖对免疫低下小鼠免疫功能的调节作用.方法:通过腹腔注射环磷酰胺建立免疫低下小鼠模型,以灌服生理盐水小鼠为空白对照组,灌服香菇多糖小鼠为阳性对照组,灌服不同剂量的纯化后白屈菜多糖小鼠为实验组,分别灌服等体积上述溶液,观察腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数以及溶血素和溶血空斑的形成情况,探讨白屈菜多糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响.结果:精制白屈菜多糖可显著提高免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数,促进溶血素和溶血空斑形成.结论:白屈菜多糖能显著提高免疫低下小鼠的免疫活性,有进一步研究的价值.

瓜子金酸性多糖的含量测定方法研究

目的:建立瓜子金酸性多糖的含量测定方法,并测定不同批次瓜子金药材中酸性多糖的含量。方法:采用水提醇沉酶法脱蛋白的方法提取瓜子金酸性多糖,以D-半乳糖醛酸标准液绘制标准曲线,用间羟基联苯法测定瓜子金酸性多糖的含量,并对该方法的精密度、重现性、稳定性、加样回收率进行等进行研究。结果:优化选出的最佳测定波长为525 nm,建立的间羟基联苯含量测定方法精密度、重现性、稳定性均较好,平均加样回收率为99.8%,RSD=0.96%,所绘制的标准曲线方程为:y=0.012x-0.053,r=0.999 7(n=6),D-半乳糖醛酸浓度在7.0~70.0μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系;该方法测得不同批次的瓜子金药材中酸性多糖的平均含量为5.41%,RSD=1.44%。结论:该含量测定方法操作简单、准确、科学可行,适用于瓜子金酸性多糖的含量测定。

白屈菜多糖提取工艺研究

目的:优选白屈菜粗多糖的水提醇沉工艺。方法:以白屈菜多糖得率和多糖含量为指标,以水为溶剂,选取料液比、提取时间、提取温度、提取次数、醇沉浓度为影响因素,进行单因素考察,在综合单因素实验的基础上,采用L9(3~4)正交试验,以加权评分法综合评估白屈菜多糖提取条件,对白屈菜多糖水提工艺进行优化,采用苯酚-硫酸法测定多糖的含量。结果:白屈菜多糖的最佳提取工艺为30倍量的水,100℃提取3次,每次3h,滤液浓缩至料液比1∶4,加入95%乙醇至含醇量达到80%,静置过夜,离心,沉淀,依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤,挥干乙醚即得。结论:此工艺操作简便、成本低廉、重现性好、适合大规模工业生产,可用于白屈菜药材及饮片中多糖的提取。

不同干燥条件对女贞子有效成分影响的初步研究

目的采用液质联用(liquid chromatograph mass spectrometer,LC-MS)方法,分析测定不同干燥条件下女贞子中红景天苷、木犀草苷、特女贞苷和橄榄苦苷4个成分的含量,为其干燥条件和质量控制提供理论依据。方法采用Hypersll GOLD C18(100 mm×2.1 mm,3μm)色谱柱,以甲醇(A)-体积分数0.1%的甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min-1,柱温为25℃。结果红景天苷、木犀草苷、特女贞苷和橄榄苦苷分别在质量浓度0.38~192.08、0.01~6.95、1.14~574.42、3.59~1 798.25 mg·L-1内呈现良好的线性关系(r≥0.999 4),平均加样回收率(n=6)分别为100.4%、99.91%、99.87%和100.7%,RSD分别为0.5%、1.1%、2.2%和1.0%。不同的干燥方法和不同的干燥温度对女贞子中红景天苷、木犀草苷、特女贞苷和橄榄苦苷4个成分具有一定的影响,不同干燥条件下女贞子中成分含量变化较为明显。结论建立女贞子中红景天苷、木犀草苷、特女贞苷、橄榄苦苷成分的含量测定方法,该方法可以为女贞子干燥条件和质量评价提供理论依据。

泽兰多糖超声提取工艺的优化

目的:运用正交试验设计优化泽兰多糖的超声提取工艺,为泽兰多糖的开发提供理论基础。方法:以泽兰多糖提取率、多糖含量为双重指标,考察温度、时间、料液比、功率对提取结果的影响,通过正交实验设计来优选超声提取泽兰多糖的工艺参数。结果:优选的泽兰多糖的超声提取工艺为:超声功率为560W,温度60℃,时间20 min,料液比为30倍,多糖提取率可以达到2.31%。结论:本研究得到的泽兰多糖超声提取工艺科学稳定,具有先进性,值得进一步推广应用。

泽兰多糖水提工艺的优化

目的优化泽兰多糖水提工艺。方法在单因素试验基础上,以多糖提取率为评价指标,提取温度、提取时间、料液比为影响因素,Box-Behnken响应面法优化水提工艺。结果最佳条件为提取温度70℃,提取时间2 h,料液比1∶30,提取2次,多糖提取率为2. 35%。结论该方法稳定可靠,成本低廉,经济效益高,具有较高的推广应用价值,可用于水提泽兰多糖。

HPLC法同时测定不同产地掌叶大黄中10个蒽醌类化合物

目的:建立高效液相色谱法同时测定不同产地掌叶大黄中10个蒽醌类成分(芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷和芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚)。方法:采用C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长254 nm,柱温25℃。结果:10个成分在测定范围内线性关系较好(r>0.999),芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷和芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚平均回收率(n=6)分别为99.0%、99.2%、99.0%、99.2%、99.0%、99.2%、98.8%、99.4%、98.7%、99.6%;不同产地大黄药材中上述10个蒽醌类成分含量差异明显,含量范围分别为0.044%~0.130%、0.348%~1.686%、0.028%~0.183%、0.164%~0.352%、0~0.116%、0.095%~0.161%、0.294%~0.411%、0.157%~0.265%、0.275%~0.321%、0.064%~0.150%。结论:本文建立的方法样品处理简便,分析灵敏,能为大黄药材的质量评价提供参考。

HPLC-UV-ELSD联用同时测定痰热清注射液中6种成分的含量

目的:建立HPLC-UV-ELSD联用法同时测定痰热清注射液中6种有效成分(原儿茶酸,绿原酸,咖啡酸,黄芩苷,熊去氧胆酸,鹅去氧胆酸)的含量。方法:在相同色谱条件下,采用不同检测器同时测定痰热清注射液中6种有效成分,HPLC-UV法测定原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、黄芩苷,HPLC-ELSD测定熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸。采用Venusil XBP-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-4%醋酸水(B)为流动相,线性梯度洗脱,流速为1 m L·min^(-1),紫外检测波长300 nm,ELSD漂移管温度70℃。结果:原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、黄芩苷、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸质量浓度分别在0.02~0.42μg·m L^(-1)(r=0.999 6)、0.31~6.12μg·m L^(-1)(r=0.999 3)、0.59~11.84μg·m L^(-1)(r=0.999 1)、33.24~664.75μg·m L^(-1)(r=0.999 6)、32.02~640.50μg·m L^(-1)(r=0.999 4)和5.58~111.60μg·m L^(-1)(r=0.999 8)范围内呈良好的线性关系;平均回收率在97.8%和101.5%之间。结论:该方法专属性强,耐用性好,可用于痰热清注射液中6种成分的含量测定和质量控制。

HPLC-MS法测定大鼠体内大黄素血药浓度及药动学研究

目的建立高效液相色谱/四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-HR/MS)方法,研究大黄素在正常与脑缺血大鼠体内的药动学规律。方法采用HPLC-Q-HR/MS内标法测定大黄素血药浓度,色谱柱为XBridge^(TM) C_(18)柱(150 mm×2.1mm,5μm),柱温30℃;流动相为3 mmol/L乙酸铵-甲醇,梯度洗脱,梯度洗脱程序为0～2 min,30%甲醇;2～10 min,30%～60%甲醇;10～13 min,60%～30%甲醇;体积流量为0.3 m L/min;进样体积为5μL;质谱条件:离子源为加热电喷雾离子化源(HESI),扫描方式为全扫模式,负离子模式检测。以DAS 3.0软件拟合计算药动学参数。结果大黄素在正常与脑缺血大鼠血浆中的主要药动学参数分别为AUC_(0-∞)(605.63±163.66)、(1 107.78±191.11)ng?h/m L,C_(max)(81.96±20.72)、(91.65±16.82)ng/m L,V_Z/F(851.03±97.30)、(1 051.87±119.88)L/kg,t_(1/2)(10.31±1.61)、(23.13±3.56)h,t_(max)(0.75±0.22)、(0.75±0.16)h。结论该法操作简便、分析速度快速、灵敏,适用于大黄素在大鼠体内的药动学研究。

大黄酸在小鼠体内的药代动力学及组织分布研究

目的:建立测定小鼠血浆和组织中大黄酸含量的方法,并对其在小鼠体内的药代动力学和组织分布进行研究。方法:小鼠灌胃给予不同剂量(17. 25、34. 50、69. 00 mg/kg)的大黄酸后,采用固相萃取法预处理血浆和组织样品,并用高效液相色谱-荧光检测器(HPLC-FLD)检测各时间点血浆和组织器官药物浓度。采用Venusil XBP C18(L)(250 mm×4. 6 mm,5μm)色谱柱,柱温:30℃;以甲醇-0. 1%磷酸水(70∶30)为流动相,体积流量:1 ml/min;荧光检测器的激发波长435 nm,发射波长515 nm。结果:大黄酸血浆及各组织样品在0. 0095~19. 52μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系;提取回收率在86. 4~96. 8%。大黄酸在小鼠组织中的分布情况为:肝>胃>肠>肺>脾>肾>心>脂肪>脑>肌肉。结论:本方法简便快捷,灵敏准确,可用于大黄酸体内过程的研究。