大黄黄连泻心汤调控PI3K/Akt信号通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗的研究

研究大黄黄连泻心汤通过调控PI3K/Akt信号通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)的作用机制。方法 采用高浓度胰岛素诱导法建立IR-HepG2细胞模型,以CCK-8法确定最佳胰岛素浓度(10-7mg/ml)及最佳诱导时间(48h),模型建立后,设置不同浓度梯度的大黄黄连泻心汤,分别处理IR-HepG2细胞,计算IC50浓度为高剂量组给药剂量,中剂量组为其1/2浓度,低剂量组为其1/4浓度。分为空白组,模型组,大黄黄连泻心汤高、中、低剂量组,高、中、低剂量组给药剂量分别为1.2×10-5、6×10-6、3×10-6 mg/ml,空白组及模型组加入等量培养液,干预24h后,将各组细胞制成细胞悬液,用RT-PCR法和Western blot法检测PI3K、Akt、IRS-1 mRNA和蛋白表达量。结果 与空白组比较,模型组IR-HepG2细胞的PI3K、Akt、IRS-1 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05或P<0.01),与模型组比较,大黄黄连泻心汤高、中、低剂量组IR-HepG2细胞的PI3K、Akt、IRS-1 mRNA和蛋白表达量均升高(P<0.05或P<0.01)。结论 大黄黄连泻心汤能够增加IR-HepG2细胞IRS-1表达量,上调PI3K、Akt表达,通过调控PI3K/Akt信号通路,改善IR。