社区H型高血压患者药物基因作用靶点多态性分布及叶酸联合维生素D干预效果研究

背景H型高血压严重影响着人们的健康及生活质量,目前临床上治疗高血压主要根据患者症状和临床经验选择药物,降压效果不理想,急需探寻降压药物基因分布的多态性,为高血压患者进行个体化用药指导。目的探讨济南市社区H型高血压药物作用靶点基因多态性分布及叶酸联合维生素D的干预作用,为该地区开展高血压医防融合精准医疗提供参考依据。方法2020年6月—2022年6月随机抽取山东省济南市槐荫区20家街道办事处社区卫生服务中心200例血压控制不佳的高血压患者为研究对象,治疗前首先进行5类常用抗高血压药物[利尿剂、β受体阻滞剂、血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)、钙离子通道抑制剂(CCB)、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)]相关高血压个体化用药基因位点的基因多态性检测。将患者随机分为基因导向治疗组(基因组)与基因导向协同叶酸、维生素D治疗组(基因导向组),每组100例。基因组根据检测的高血压基因作用位点的特点调整用药;基因导向组在基因组治疗方案的基础上同时服用叶酸、维生素D。干预初始(M0)、干预3个月(M3)、干预6个月(M6)时采集患者晨间未服用降压药物情况下坐位收缩压和舒张压。记录患者患病情况、不良反应发生情况、脑卒中发生情况,进行基因测序,检测血清同型半胱氨酸(Hcy)浓度。采用Pearson相关性分析或Spearman秩相关分析探究性别、年龄、收缩压、舒张压与Hcy的相关性。结果研究对象性别(r_(s)=-0.463)、收缩压(r=0.181)、舒张压(r=0.188)与Hcy水平有相关性(P<0.05)。5类抗高血压药物基因作用靶点中,与药物代谢酶基因多态性位点相关的分别是CYP3A5(A6986G)、CYP2C9(c.1075A>C)、CYP2D6(c.100C>T),与药物作用靶点敏感性基因多态性位点相关的是ADRB1、ACEI(I/D)、AGTR1、NPPA。基因组A6986G:CYP3A5*1/*1(AA)、ACEI(I/D):D/D、c.100 C>T:CYP2D6*1/*1(CC)患者M3、M6舒张压低于M0,A6986G:CYP3A5a1/a3(AG)、ADRB1 c.1165 G>C:GG、c.1075 A>C:CYP2C9*1/*3(AC)、c.1075 A>C:CYP2C9*3/*3(CC)患者M6舒张压低于M0,A6986G:CYP3A5*3/*3(GG)、ADRB1 c.1165 G>C:CC、ACEI(I/D):I/I、c.1075 A>C:CYP2C9*1/*1(AA)、AGTR1 c.1166 A>C:AA、NPPA T2238C:TT、c.100 C>T:CYP2D6*10/*10(TT)患者M3、M6收缩压、舒张压低于M0,ADRB1 c.1165 G>C:GC、ACEI(I/D):I/D、c.100 C>T:CYP2D6*1/*10(CT)患者M6收缩压低于M0,M3、M6舒张压低于M0,差异有统计学意义(P<0.05)。Hcy水平组间比较结果显示,M3、M6基因导向组Hcy水平低于基因组,差异有统计学意义(P<0.05)。组内比较结果显示,基因组M6 Hcy水平低于M0,基因导向组M3、M6 Hcy水平低于M0,M6 Hcy水平低于M3,差异有统计学意义(P<0.05)。收缩压、舒张压组间比较结果显示,M3、M6基因导向组收缩压、舒张压低于基因组,差异有统计学意义(P<0.05)。组内比较结果显示,基因组、基因导向组M6收缩压、舒张压低于M0,M6收缩压低于M3,差异有统计学意义(P<0.05)。结论社区H型高血压患者中存在高血压药物相关基因多态性的表达差异,个体化用药效果显著;叶酸联合维生素D协同治疗更能显著降低H型高血压水平。

30例不同类型贫血患者血液检验结果的分析

目的 分析不同类型贫血患者的血液检验结果,并对相关情况进行总结研究.方法 选取2017年10月 ~2019年1月本院收治的30例贫血患者作为观察组,其中地中海贫血4例、急性失血性贫血3例、巨幼红细胞性贫血8例、缺铁性贫血8例、溶血性贫血3例、再生障碍性贫血4例.同期30例健康体检者作为对照组.检测并比较两组研究对象及观察组不同贫血类型患者的平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量、平均红细胞血红蛋白浓度水平.结果 观察组地中海贫血和缺铁性贫血患者的平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量、平均红细胞血红蛋白浓度分别为(61.32±6.27)fl、(21.24±3.74)pg、(258.94±33.41)g/L和(62.35±6.86)fl、(21.52±5.70)pg、(277.94±32.22)g/L,均低于对照组的(88.79±3.58)fl、(29.11±2.34)pg、(327.58±17.68)g/L,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组巨幼红细胞性贫血患者的平均红细胞体积和平均红细胞血红蛋白量水平分别为(114.92±7.77)fl和(40.86±6.79)pg,高于对照组的(88.79±3.58)fl和(29.11±2.34)pg,溶血性贫血患者的平均红细胞体积和平均红细胞血红蛋白浓度水平分别为(107.74±7.12)fl和(355.25±21.74)g/L,明显高于对照组的(88.79±3.58)fl和(327.58±17.68)g/L,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 对贫血患者血液中的平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量、平均红细胞血红蛋白浓度水平进行检验可以有效帮助患者确定贫血类型,是应用价值高的检验指标.

探讨维生素C对血液检验中部分检验项目的影响

目的研究维生素C对血液检验中部分检验项目的影响,以方便为临床的检验工作提供可行依据。方法选取82例行血液检验的患者作为研究对象,所有研究对象均行体内试验和体外试验,并分析比较两种试验方法用药前后的结果。结果体内试验结果:84例患者用药后30 min和用药后1 h尿酸(UA)、血糖(GLU)、甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)水平均低于用药前用药后2 h,用药后30 min UA、GLU、TG、TC水平均低于用药后1 h,差异均有统计学意义(P<0.05);用药前与用药后2 hUA、GLU、TG、TC水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。体外试验结果分析:84例患者用药前UA、GLU、TG、TC水平分别为(222.64±11.34)mmol/L、(5.78±0.64)mmol/L、(2.01±0.03)mmol/L、(5.78±0.21),用药后分别为(74.26±21.11)mmol/L、(4.26±0.24)mmol/L、(0.36±0.13)mmol/L、(1.33±0.16);用药后的UA、GLU、TG、TC水平均低于用药前,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论血液检验中应用维生素C能够使血液检验部分指标水平下降,而后在2 h左右恢复正常,所以,为确保检验的准确性,在血液检验前需告知患者忌服维生素C类药物,必要时可采用静脉滴注的方式给予维生素C,并在用药后2 h再进行血液检验。

瑶药刺瓜生药学研究

目的:对刺瓜进行生药学研究。方法:采用基源鉴别、药材性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱法对刺瓜特征进行鉴别研究。参照《中华人民共和国药典》2015版四部通则中的方法对13个批次的刺瓜样品进行水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物等项目进行检查。结果:对刺瓜原植物形态进行了详细描述,明确了刺瓜根、茎、叶的组织结构特征及粉末鉴别特征,初步建立了刺瓜薄层色谱鉴别方法。对刺瓜几个常见项目设定了检出限,水分不得超过10.0%,总灰分不得超过13.0%,酸不溶性灰分不得超过1.0%,浸出物不得少于19.0%。结论:刺瓜的性状、显微特征明显,薄层色谱分离效果好,重现性佳,可为刺瓜进一步开发利用和质量标准的建立提供参考。

神经酸口服给药后在大鼠体内药动学研究

目的 考察神经酸口服给药后在大鼠体内的药动学。方法 分析采用SUPELCO Ascentis Express F5色谱柱(10 cm×2.1 mm, 2.7μm);流动相水-甲醇(含0.1%甲酸);体积流量0.35 mL/min;柱温25℃;电喷雾离子源;正离子扫描;多反应监测模式。24只大鼠随机分为对照组(食用菜籽油)及神经酸低、中、高剂量组(30、60、120 mg/kg),灌胃给药,于0.5、1、1.5、2、4、6、8、10、12、14、24、36 h采血,LC-MS/MS法检测神经酸血药浓度,计算主要药动学参数。结果 神经酸在62.5~4 000.0 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.999 4),加样回收率95%~106%。口服给药后,AUC_(0~36 h)、AUC_(0~∞)、C_(max)均随神经酸剂量增加而升高(P<0.01);T_(max)、t_(1/2)、MRT分别为10.44、5.24、12.52 h,不同剂量组之间无显著性差异(P>0.05)。结论 在30~120 mg/kg口服剂量范围内,神经酸在大鼠体内的AUC、C_(max)呈现剂量依赖性,符合一室模型药动学特征。

不同妊娠时期孕妇血清中维生素A、D、E水平检测分析

妊娠为女性从受孕至分娩的自然生理过程,而维生素（Vitamin,Vit）为人体必须的微量营养素,对维护妊娠及保障母婴健康安全有重要作用,其中Vit D是人体必需的脂溶性维生素,因具有抗佝偻病作用而被广泛认识,有研究显示妊娠中晚期Vit D含量缺乏或不足可增加不良妊娠结局及妊娠合并症风险，导致胎儿发育受限。

妊娠晚期贫血孕妇维生素A营养状况及网织红细胞参数分析

目的:探讨妊娠晚期贫血与维生素A缺乏的相关性,研究维生素A缺乏对红细胞及网织红细胞参数的影响。方法:回顾性分析2017年3月2018年3月于东莞市莞城医院产检的妊娠晚期孕妇1204例,其中贫血孕妇299例为贫血组,非贫血且无其他妊娠合并症的孕妇905例为对照组,比较2组孕妇维生素A浓度及网织红细胞参数的差异。另外,根据维生素A浓度,以0.3 mg/L为界值,将入选孕妇分为维生素A缺乏组及维生素A正常组,比较2组孕妇贫血发生率、红细胞参数及网织红细胞参数的差异。结果:妊娠晚期贫血和维生素A缺乏的比例分别为24.83%(299/1204)和16.45%(198/1204)。维生素A缺乏组孕妇贫血的发生率明显高于维生素A正常组(34.85%vs.22.86%,χ^2=12.732,P=0.000)。维生素A与妊娠晚期贫血的受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.604(95%CI:0.568~0.640),维生素A的临界值为0.36 mg/L。与正常组相比,维生素A缺乏可导致红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)降低([332.91±14.50)g/Lvs.(337.95±14.19)g/L],红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV,14.61±2.08vs.13.93±1.79)、网织红细胞百分比[RET%,(1.77±0.76)%vs.(1.60±0.66)%]和未成熟网织红细胞指数[IRF,(11.19±6.05)%vs.(9.36±5.82)%]均升高(P<0.05),而2组平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)和网织红细胞绝对值(RET#)的差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:维生素A缺乏与妊娠期贫血可能存在相关性,并可出现相应的红细胞及网织红细胞参数改变。临床上需要监测孕妇血浆维生素A浓度,并通过膳食或药物补充,使其维持偏高于正常值下限的水平,以减少妊娠期贫血的发生率,保证母婴健康。

妊娠晚期孕妇血清维生素A、E水平分析

目的分析2 005例妊娠晚期血清维生素A、E水平,掌握本地区妊娠晚期维生素营养状况,为指导孕妇妊娠期合理补充维生素提供依据。方法收集陕西中医药大学第二附属医院妊娠晚期血清样本2 005例,采用高效液相色谱法测定血清维生素A、E浓度,并与正常人群血清维生素A、E水平作比较。结果妊娠晚期血清维生素A正常率82.19%,平均值(0.440 8±0.089 4)mg/L,且多集中在0.3~0.49 mg/L;总体异常率17.81%,缺乏率17.06%,平均值(0.244 4±0.044 6)mg/L;过量率0.748 1%,平均值(0.763 3±0.042 4)mg/L。血清维生素E正常率76.11%,平均值(14.750 4±2.993)mg/L;异常率23.89%,均表现为过量,平均值(24.308 8±5.760)mg/L,且多集中在20~29.9 mg/L。结论妊娠晚期血清维生素A、E水平不同,维生素A以缺乏为主,维生素E以过量为主,因此重视孕期维生素A、E水平监测,合理正确补充,对保障母婴安全有重要意义。

常规保健下西安地区妊娠早期及晚期孕妇血清维生素A、E水平调查研究

维生素A、E是人类必需的脂溶性维生素,人体自身不能合成,需要从外界摄取获得,在维持正常妊娠及胎儿发育过程具有重要作用。孕妇维生素A、E缺乏会导致胎儿畸形、流产、早产、感染、贫血等[1],维生素的过量摄入会导致中毒,亦可能带来严重后果。

国内外交联聚维酮在直压工艺中的一致性研究

目的研究国内外不同厂家交联聚维酮(PVPP)在直压工艺中的应用性能,为仿制药一致性评价或新药研发中辅料的选择提供参考。方法选取进口和国产PVPP,对其物理化学性质、粉体学性质和制剂功能性质进行对比研究。结果不同厂家PVPP物理化学性质基本一致,但过氧化物指标略有差异;粉体学性质、制剂功能性质存在差异,尤其是流动性、溶胀性能差异明显,进而导致制备的片剂崩解溶出性能存在差异。结论完善和提高PVPP产品生产工艺是促使其应用性能一致的根本途径。

维生素A、E与儿童呼吸道感染疾病相关性研究

目的:探讨总结维生素A、E与儿童反复呼吸道感染的相关性。方法:选择2015年3月至2017年3月于新疆克拉玛依市中心医院儿科确诊的符合反复呼吸道感染诊断标准的500例患儿为观察组,另选取同期在同一医院体检及就诊的非反复呼吸道感染儿童500例作为对照组。对于纳入研究课题内的受试者,采用高效液相色谱-串联质谱法定量检测血清维生素A、E水平,观察感染指标(CRP、WBC、Hb),观察组患儿进行膳食和补充剂摄入,进行电话随访和复查。结果:两组儿童血清维生素A、E以及CRP、WBC、Hb等感染指标水平均存在明显差异(P<0.01);给予膳食和补充剂摄入维生素A、E干预6个月,观察组血清维生素A、E以及CRP、WBC、Hb等感染指标水平均明显改善,呼吸道感染次数明显减少(P<0.01)。结论:维生素A、E缺乏与儿童反复呼吸道感染密切相关,对患儿给予合理补充维生素A、E,科学膳食干预,可显著提高其血清维生素A、E水平,增强体质,降低呼吸道感染几率。

咸阳市妇产医院2005例妊娠晚期孕妇血清维生素A、E水平分析

目的分析陕西中医药大学第二附属医院(咸阳市妇产医院)2 005例妊娠晚期孕妇血清维生素A、E水平,掌握本地区妊娠晚期孕妇维生素营养状况,为指导孕妇妊娠期合理补充维生素提供依据。方法收集2016年2月至2017年12月咸阳市妇产医院妊娠晚期血清样本2 005份,采用高效液相色谱法测定血清维生素A、E水平。结果 2 005例妊娠晚期孕妇的血清维生素A正常率82.19%,平均值(0.4405±0.0894)mg/L。总体异常率17.81%,其中缺乏率17.06%,平均值(0.2444±0.0446)mg/L;过量率0.75%,平均值(0.7633±0.0424)mg/L。血清维生素E正常率76.11%,平均值(14.7504±2.9927)mg/L;异常率23.89%,均表现为过量,平均值(24.3088±5.7600)mg/L。结论妊娠晚期孕妇血清维生素A以缺乏为主,维生素E以过量为主,因此重视孕期维生素A、E水平监测,合理正确补充,对保障母婴安全有重要意义。

血清抑制素B、卵泡刺激素和精浆中性α-葡萄糖苷酶在无精子症中的诊断意义

目的:测定血清抑制素B(INHB)、卵泡刺激素(FSH)和精浆中性α-葡萄糖苷酶(α-Glu),评价其在诊断梗阻性和非梗阻性无精子症中的意义。方法:测定30例正常生育者(正常对照组),37例梗阻性无精子症以及33例非梗阻性无精子症患者的血清INHB、FSH和精浆中性α-Glu,采用受试者工作特征曲线(ROC),分析评价检测指标的敏感性和特异性。结果:血清INHB,血清FSH,精浆中性α-Glu在梗阻性无精症组与非梗阻性无精症组间差异均有显著性(P<0.01),其中,血清INHB的曲线下面积最大(0.962),诊断价值最高,敏感性为95.5%,特异性为94.1%。结论:血清INHB可用于无精症的诊断,比血清FSH、精浆中性α-Glu在鉴别梗阻性无精症和非梗阻性无精症有更好的敏感性和特异性。

HPLC法同时测定延胡索不同部位中11种核苷类成分

目的:测定并评价不同产地延胡索药材不同部位中11种核苷类成分的含量。方法:采用高效液相色谱法测定核苷类成分的含量,并对测定结果进行聚类分析。结果:不同产地延胡索中核苷类物质含量由高到低为鸟苷>尿苷>腺苷>肌苷>胞苷>尿嘧啶>2’-脱氧肌苷>2’-脱氧胸苷>腺嘌呤>胸腺嘧啶>2’-脱氧腺苷,11种核苷总含量整体表现为叶>茎>块茎,不同产地延胡索核苷类总含量由高到低为浙江磐安>浙江东阳>陕西汉中>重庆万州>重庆开州,块茎中的11种核苷成分含量比无显著性差异,但茎和叶差异较大。结论:此方法可用于延胡索不同部位中核苷类成分的测定,为其综合利用提供思路。

土壤有效元素含量与延胡索(Corydalis yanhusuo)品质的相关性研究

延胡索乙素是相关延胡索(Corydalis yanhusuo)品质的重要化学成分,在中国药典中作为延胡索质量控制指标,分析不同产地延胡索中延胡索乙素含量与根际土壤有效性元素含量的相关性,对指导延胡索合理化种植栽培有重要科学意义。采用土壤农化法对不同产地延胡索根际土壤中10种元素(大量元素N、P、K、Ca、Mg;微量元素Zn、Mn、Fe、Cu、B)有效性含量进行了测定,同时采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定不同产地延胡索中延胡索乙素含量。结果表明:不同产地延胡索根际土壤中有效性元素含量存在显著性差异(P<0.05)。大量元素中,重庆市开县(S2)产地根际土壤有效磷、有效钙含量最高,浙江省东阳市(S4)产地根际土壤有效钾、有效镁含量最高;微量元素中,陕西省汉中市(S3)、浙江省磐安县(S5)产地根际土壤有效铁、有效铜含量显著高于其他产地。不同产地延胡索块茎中的延胡索乙素含量均达0.07%以上,高于药典中的限定标准。相关分析结果表明,延胡索乙素含量与有效钙含量存在极显著正相关(r=0.97,P<0.01),与有效铁存在显著负相关(r=-0.87,P<0.05),延胡索乙素含量主要受根际土壤有效钙含量影响。

妊娠糖尿病患者HbA1c与细胞抗氧化水平、脂质过氧化状态的相关性分析

目的分析妊娠糖尿病患者HbA1c与细胞抗氧化水平、脂质过氧化状态的相关性。方法选取2018年7月至2020年3月东莞市中医院收治的妊娠糖尿病患者75例作为研究组,分为HbA1c<7.0%组,7.0%≤HbA1c≤9.0%组,HbA1c>9.0%组,每组各25例。同时选择同时期的健康体检人员25名作为对照组。所有人员均进行HbA1c、细胞抗氧化水平、脂质过氧化状态的检测。对四组LPO含量、GSH-Px活性、SOD、血糖情况进行分析HbA1c与LPO含量、GSH-Px活性、SOD、血糖的相关性。结果四组人员的LPO含量、GSH-Px活性、SOD、血糖比较,差异有统计学意义(P<0.05),任两组血糖比较,差异有统计学意义(P<0.05);对照组、HbA1c<7.0%组、7.0%≤HbA1c≤9.0%组、HbA1c>9.0%组的LPO含量、GSH-Px活性、SOD比较,差异有统计学意义(P<0.05);HbA1c<7.0%组、7.0%≤HbA1c≤9.0%组LPO含量、GSH-Px活性、SOD比较,差异有统计学意义(P<0.05);HbA1c和GSH-Px活性、SOD呈正相关(r=0.661,0.943,P<0.05),与LPO含量、血糖呈负相关(r=-0.753,-0.638,P<0.05)。结论HbA1c可以及时地反应出妊娠糖尿病患者抗氧化状态、细胞内外的氧化状态,帮助医生更加全面的了解患者的病情,临床上应当进一步推广应用。

北京市孕妇常规保健下血清维生素A、E水平现状

目的分析妊娠早、中、晚期血清维生素A、E水平,评价妊娠期维生素的营养状况,指导孕妇妊娠期合理补充维生素。方法收集2013年1月-2014年6月北京地区孕妇妊娠早、中、晚期血清样本共28 023份,采用高效液相色谱法定量测定血清维生素A、E的浓度,并与正常人群血清维生素A、E的浓度作比较。结果孕妇妊娠早、中、晚期血清维生素A检测值分别为(0.33±0.08)mg/L、(0.37±0.09)mg/L、(0.33±0.15)mg/L,总体异常率25.31%,以缺乏为主要表现(24.98%),缺乏率在妊娠早期(38.23%)大于妊娠晚期(35.1%);孕妇妊娠早、中、晚期血清维生素E检测值分别为(9.10±2.47)mg/L、(14.24±3.66)mg/L、(15.80±5.01)mg/L,总体异常率5.60%,以过量为主要表现(5.37%),妊娠早期异常率最低(1.26%),缺乏率(0.76%)与过量率(0.5%)相当,随着孕周增加,维生素E异常率也逐渐增加,妊娠晚期达到最高(15.32%),均为维生素E过量。结论妊娠各期血清维生素A、E水平不同,维生素A以缺乏为主,维生素E以过量为主,因此重视孕期维生素A、E水平监测,合理正确补充,对保障母婴安全有重要意义。

高效液相色谱-串联质谱法检测婴幼儿血清中4种双酚类环境激素残留

目前,双酚类化合物是重要的工业原料,常用来制造塑料(奶)瓶、幼儿用吸口杯、食品和饮料(奶粉)罐内侧涂层,其具有类似雌激素的作用,摄入低剂量的双酚类物质便会引起机体尤其婴幼儿体内激素水平的调节。建立了一种同时测定婴幼儿血清中双酚A(BPA)、双酚B(BPB)、双酚F(BPF)、双酚S(BPS)4种双酚类环境激素的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)。以甲基叔丁基醚(MTBE)为提取溶剂,采用液液萃取的方法进行样品处理,同时对影响4种双酚类环境激素提取效率的提取溶剂、提取时间、提取溶剂体积等影响因素进行了优化。100μL血清样本在40℃下经400μL MTBE提取15 min后,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)进行分离,以超纯水和含0.5 mmol/L乙酸铵的甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2 mL/min,采用电喷雾电离、负离子模式扫描,在多反应监测(MRM)模式下测定。BPA、BPB、BPS在0.25~100μg/L范围内线性关系良好,BPF在1~00μg/L范围内线性关系良好,相关系数为0.9929~0.9959;方法的检出限分别为0.05、0.05、0.05、0.5μg/L;在3个添加水平(5、20、100μg/L)下,4种目标化合物的回收率为84.56%~104.43%,相对标准偏差小于10%。应用该方法对150例婴幼儿血清样品进行检测,结果表明:BPA、BPF、BPS在男童和女童血清中的检出率分别为90.67%和89.33%、6.67%和1.33%、5.33%和16.00%,BPB未被检出。该方法操作简单,回收率好,精密度高,适用于婴幼儿血清中4种双酚类环境激素的同时测定。

QuEChERS/高效液相色谱-串联质谱法测定柑橘中7种酚类环境激素

建立了QuEChERS/高效液相色谱-串联质谱(QuEChERS/HPLC-MS/MS)同时检测柑橘中7种酚类环境激素的分析方法。柑橘样品均质粉碎后采用乙腈(含0.1%甲酸)超声提取,氯化钠盐析,经N-丙基乙二胺(PSA)+C_(18)粉末吸附剂净化,目标化合物经Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以水(含0.5 mmol/L乙酸铵)和甲醇为流动相进行梯度洗脱。考察了不同提取溶剂、提取时间、提取溶剂体积、吸附剂种类和用量对目标化合物回收率的影响。结果表明:在最佳条件下,双酚A(BPA)、壬基酚(NP)、双酚F(BPF)在0.5~100μg/L范围内线性关系良好,双酚B(BPB)、双酚S(BPS)、4-n-壬基酚(4-n-NP)、4-n-辛基酚(4-n-OP)在0.2~100μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r^(2))均不小于0.9941,检出限(LOD)为0.2~0.5μg/L,定量下限(LOQ)为0.5~1.5μg/L。在10、250、500μg/kg 3个加标水平下,目标化合物的回收率为88.5%~109%,相对标准偏差(RSD)为1.2%~9.0%。应用该方法对市售的8种柑橘样品进行检测,BPA在7种柑橘中均检出,4-n-OP在5种柑橘中检出,NP和4-n-NP在3种柑橘中检出,BPB在1种柑橘中检出,BPF、BPS在所有样品中均未检出。该方法操作简单、快速灵敏、定量准确、精密度高,适用于柑橘中7种酚类环境激素的测定。

实时荧光PCR技术快速检测食品中的蜡样芽孢杆菌

以蜡样芽孢杆菌gyrB基因作为目标基因并设计特异性引物,用95℃预变性5 min、95℃变性15 s、50℃复性30 s、72℃延伸30 s,反应45个循环为反应程序,以蜡样芽孢杆菌DNA为模板进行荧光定量聚合酶链式反应(PCR),提出了食品中蜡样芽孢杆菌快速检测的方法,并对该方法特异性、蜡样芽孢杆菌DNA灵敏度以及活菌检出限进行验证。结果表明,该引物在分段扩增中可以实现对蜡样芽孢杆菌的快速检测,而且重复性好;以3种非蜡样芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌进行特异性试验,非蜡样芽孢杆菌均没有扩增出曲线,仅蜡样芽孢杆菌扩增出特异性曲线;蜡样芽孢杆菌DNA按10倍稀释法进行灵敏度检测,可达0.01 mg·L^(-1),活菌检出限为8.9×10^(2)CFU·mL^(-1)。