转化生长因子β1下调间充质干细胞表达CXCR4

目的在体外培养的情况下,采用转化生长因子β1(TGF-β1)与间充质干细胞(MSCs)共培养的方法,探索转化生长因子β1对间充质干细胞趋化受体CXCR4表达的影响。方法不同浓度的转化生长因子β1刺激间充质干细胞,然后在不同的作用时间点,用流式细胞术检测间充质干细胞胞内和胞外表达CXCR4的变化。结果 TGF-β1在不同的作用时间和不同的浓度情况下,对MSCs表达CXCR4有不同的影响。在短时间内(3h),不同浓度的TGF-β1都能明显地下调CXCR4的表达;延长刺激时间至24h,不同浓度的TGF-β1对CXCR4的表达影响甚小;如果再继续培养到48h和72h,不同浓度的TGF-β1对CXCR4的表达又出现不同的影响。结论 TGF-β1能快速下调CXCR4的表达,减弱了MSCs的趋化归巢能力,但是MSCs表达CXCR4又可能存在一个负反馈机制。

血管内皮生长因子通过CXCR4增强间充质干细胞的趋化能力

目的探索血管内皮生长因子能否通过促进间充质干细胞高表达CXCR4而增加其趋化能力。方法体外培养间充质干细胞铺满约90%时,给与血管内皮生长因子刺激,然后在不同的时间点,用流式细胞术检测间充质干细胞胞内表达CXCR4的变化。CM-DiI标记预先经过及未经过血管内皮生长因子处理的间充质干细胞,通过尾静脉注射到肝损伤小鼠体内,并通过CM-DiI的荧光强度比较来明确趋化到肝脏的间充质干细胞数量的差异。结果经过血管内皮生长因子刺激后,原来低表达CXCR4的间充质干细胞高表达CXCR4。而且在6小时的时间点,CXCR4表达量最高。经刺激后高表达CXCR4的间充质干细胞趋化能力得到提高。结论血管内皮生长因子上调CXCR4的表达,增强间充质干细胞的归巢及趋化能力。

脐带间充质干细胞移植治疗类风湿性关节炎患者Th1/Th2、Treg的变化

背景:类风湿性关节炎是自身免疫性疾病,传统治疗方法很难有效解决患者免疫耐受机制缺失的问题。随着干细胞再生医学的发展,应用干细胞治疗免疫性疾病成为热点。目前国内外对于细胞移植治疗类风湿性关节炎少有报道。目的:探讨脐带间充质干细胞对类风湿性关节炎患者Th1/Th2、Treg变化的影响,为类风湿性关节炎寻找新的治疗方法。方法:180例类风湿性关节炎患者,其中27例为对照组,给予非类固醇抗炎药和抗风湿药,153例为治疗组,静脉输注细胞数为4×107的脐带间充质干细胞40 m L,用药方案与对照组相同,76例患者在第1次细胞治疗的三四个月后接受了2次脐带间充质干细胞治疗。随访治疗后3,6个月进行临床有效性评估(DAS28、HAQ、ACR20)、类风湿因子、抗CCP抗体、T细胞亚群、Th细胞因子检测。部分2次细胞治疗患者随访至8个月检测Treg、T细胞亚群。结果与结论:1随访3个月时,细胞治疗组DAS28评分、HAQ评分、ACR20较对照组下降明显,差异有非常显著性意义(P<0.01)。2脐带间充质干细胞治疗3,6个月的DAS28评分、HAQ评分较治疗前明显下降(P<0.01),2次治疗较1次治疗继续下降(P<0.01)。3治疗后3,6个月γ-干扰素水平较治疗前变化不明显,治疗后6个月白细胞介素4水平较治疗前逐渐上升(P<0.05)。4治疗后3,6个月Treg较治疗前明显上升(P<0.01),同时治疗后Treg升高与ACR明显相关,尤其是ACR70百分率(P<0.05);治疗后3个月CD4+Treg比率明显升高(P<0.05),6,8个月时与治疗前相比也是升高趋势,但差异无显著性意义(P>0.05)。5治疗后6个月B细胞水平明显下降(P<0.05);治疗后3,6个月类风湿因子较治疗前均明显下降(P<0.05)。6治疗后3,6个月抗CCP抗体和白细胞介素17水平变化不大。结果表明类风湿性关节炎患者给予脐带间充质干细胞治疗后Th1/Th2趋于平衡、Treg升高与临床实验指标及症状的缓解直接相关。因此按风湿病指南用药的同时,协同使用脐带间充质干细胞可改善类风湿性关节炎患者免疫网络效应、调整免疫耐受、改善病情。

脐带间充质干细胞移植对类风湿性关节炎患者相关炎性因子影响的探讨

目的:探讨脐带间充质干细胞对类风湿性关节炎患者相关炎性因子的影响。方法:选自2011年4月至2012年12月在我科住院应用脐带间充质干细胞(UC-MSCs)治疗的94例RA患者,细胞治疗经院伦理委员会批准,患者知情同意并签字。94例患者均直接将细胞数为4×107的UC-MSCs40ml静脉输注,其中57例接受了2次UC-MSCs治疗,采用多功能流式点阵仪Luminex 200分析检测血清中TNFα,IFN-γ,IL-1β,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10等13种因子含量并检测CPR、ESR,评估DAS28、HAQ、ARA。随访治疗后1周、3个月、6个月(2次细胞治疗的60例患者)。结果:1DAS28、HAQ评分标准,3个月、6个月较治疗前逐渐下降(P<0.01),2次治疗较1次治疗继续下降(P<0.01);ESR、CRP在治疗后1周显著下降(P<0.01),3个月、6个月较治疗前也有下降(P<0.05)。2IL-6、TNF-α治疗后1 w、3个月、6个月进行检测,均呈下降水平(P<0.05)。结论:经过脐带间充质干细胞输注治疗后,RA患者部分与发病相关的炎症因子下调。94例患者其他炎性因子(IL-17、IL-4、IL-10等)也有一些变化,仍需进一步观察探讨。因此在按风湿病指南用药的同时,协同使用UC-MSCs可使RA患者改善局部及全身的炎性反应、阻止病情进展发挥着重要作用。

脐带间充质干细胞对裸鼠胸腺发育的作用及机制

背景:自身免疫性疾病的传统治疗方法很难有效解决患者免疫耐受机制缺失的问题。间充质干细胞具有再生修复实质组织器官和免疫调节的生物学特性。目的:探讨人脐带源间充质干细胞对裸鼠胸腺发育的影响及作用机制。方法:采用腹腔注射的方式向Foxn1-/-的BABL/c裸鼠体内注射人脐带源间充质干细胞,2×106/只,分析治疗后裸鼠胸腺残基的组织结构变化、胸腺上皮细胞的分布及成熟度,以及发育后的胸腺成熟淋巴细胞输出功能,并探讨人脐带源间充质干细胞发挥治疗作用的机制。结果与结论:胸腺残基出现了清晰的皮髓质结构,胸腺上皮细胞数量增加并且胸腺输出功能增强,外周血中调节性T细胞增多。其作用机制可能是由于人脐带源间充质干细胞能够定植在胸腺组织内并且表达多种促进胸腺发育的细胞因子,尤其是对胸腺发育非常重要的角质形成细胞生长因子。结果表明人脐带源间充质干细胞能够为裸鼠胸腺的结构发育和功能成熟提供合适的微环境,促进裸鼠胸腺残基的发育和功能成熟,为间充质干细胞治疗免疫性疾病的作用机制提出了新的理论观点。

间充质干细胞治疗肝纤维化:促进纤维化还是逆转纤维化?

间充质干细胞对肝纤维化的作用尚未有定论。有些数据显示间充质干细胞促进肝纤维化的发展;另一些数据显示间充质干细胞能逆转肝纤维化,促进肝脏机制中胶原纤维的降解。结合间充质干细胞的细胞生物学特性,我们尝试分析目前的文献,进一步阐述间充质干细胞对肝纤维化所起的作用。通过分析文献和总结我们的实验结果,大量数据支持间充质干细胞能逆转肝纤维化。另外,四氯化碳诱导的肝纤维化模型动物存在自愈的现象。因此,在间充质干细胞治疗肝纤维化实验中,必须优化实验设计和治疗方案,才能很好的评价实验结果。

间充质干细胞定向分化及其在肝脏疾病应用中的启示

间充质干细胞向肝细胞诱导分化成功后,分化后的肝细胞样细胞应用于肝病成为了研究热点。不仅未分化的间充质干细胞能治疗肝病,其来源的分化后的肝细胞样细胞亦能有效治疗肝病。因此,有必要对间充质干细胞分化前后的细胞治疗效果进行比较评价。本文从诱导分化培养方案、鉴定指标及相关细胞生物学功能进行述评。