胶质源性神经营养因子与白细胞介素1β体外诱导中脑神经干细胞的分化

背景：在神经干细胞移植治疗帕金森病中,移植细胞的数量及多巴胺能神经元的分化比率是必须解决的问题,而有效的神经干细胞体外增殖与多巴胺能神经元的大量定向诱导分化是解决问题的关键所在。目的：探讨胶质源性神经营养因子与白细胞介素1β体外诱导中脑神经干细胞向多巴胺能神经元的分化。方法：分离妊娠12d小鼠胚胎腹侧中脑,经胰酶消化和机械吹打制成单细胞悬液,离心过滤后机械方法传代培养5~7d的神经球,分组进行诱导分化10~12d,待80%细胞从神经球迁移出来,分化为单细胞时,进行免疫细胞化学鉴定及流式细胞术检测酪氨酸羟化酶阳性细胞率。结果与结论：神经球细胞表达巢蛋白抗原,能分化为神经元特异性烯醇化酶和胶原纤维酸性蛋白阳性细胞。胶质源性神经营养因子与白细胞介素1β在体外能明显提高中脑神经干细胞分化为酪氨酸羟化酶阳性神经元的比例,胶质源性神经营养因子诱导组、白细胞介素1β诱导组和两者联合应用均较空白对照组比例高,尤其是两者联合应用作用更显著,说明胶质源性神经营养因子、白细胞介素1β可明显促进中脑神经干细胞分化为数量足够、形态及功能成熟的多巴胺能神经元。

辣椒素对大鼠三叉神经降钙素基因相关肽免疫反应性神经元的影响

目的:研究辣椒素对大鼠三叉神经节降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP)免疫反应性神经元的影响,探讨辣椒素治疗三叉神经的镇痛机制。方法:把辣椒素配成浓度为30mmoL/L溶液备用,20只Wister大鼠按辣椒素用量分成4组(A组20μL,B组30μL,C组50μL和D组100μL),大鼠左侧面区为对照侧,右侧面为实验侧,分别皮下注射处理大鼠三叉神经眶下支,24h取材,切片,免疫组化染色,镜检,计算机图像分析。结果:经方差分析,对照侧,A,B,C,D组实验侧CGRP平均吸光度均值分别为2.526,2.499,2.199,1.812,1.549,组间比较差异有显著性意义(F=170.645,P<0.01)。并且随着用药量的增加其差值也更大。结论:辣椒素对大鼠三叉神经节CGRP免疫反应性神经元有明显的影响,CGRP参与口面部的痛与镇痛。

白细胞介素-1β体外诱导小鼠中脑神经干细胞向酪氨酸羟化酶阳性神经元分化

目的:探讨白细胞介素-1β(IL-1β)体外诱导中脑神经干细胞(M-NSCs)向酪氨酸羟化酶阳性神经元分化情况,为帕金森病的转基因移植治疗在体外获得足够的多巴胺能神经元提供实验依据。方法:在有血清条件下体外培养鼠胚M-NSCs,予以IL-1β作诱导分化。酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学鉴定,流式细胞术检测TH阳性神经元的百分率。结果:实验组促进M-NSCs分化为TH阳性神经元的比例为9.54%,而对照组仅3.46%,差异有统计学意义。结论:IL-1β可明显促进中脑神经干细胞分化成多巴胺能神经元。