耳后进路大鼠耳蜗中阶侧壁显微注射携带EGFP慢病毒的实验研究

目的探讨经大鼠耳后进路耳蜗中阶侧壁导入携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)慢病毒的实验可行性,为后续携带目的基因慢病毒治疗大鼠感音神经性聋的实验打下基础。方法大鼠经耳后进路,耳蜗中阶侧壁开孔,显微注射携带EGFP慢病毒液或人工内淋巴液。术后3周,处死动物取耳蜗,行耳蜗冰冻切片,荧光显微镜下观察携带EGFP慢病毒的表达情况。术前和术后3周动物处死前,行听性脑干反应(ABR)检测其听功能改变。结果术中、术后动物一般情况好。EGFP可见在耳蜗中阶血管纹边缘细胞、Corti器、螺旋神经和螺旋神经节细胞内表达。术后实验组大鼠手术耳ABR阈值提高(55.8±4.9)dBSPL。结论大鼠经耳后进路,耳蜗中阶侧壁开窗,可将慢病毒携带的EGFP基因导入,并在耳蜗中阶Corti器表达。

鼻尖顶泌汗腺乳头状囊腺瘤1例

1病例分析 患者,女,58岁。5年前发现鼻尖黄豆大小结节,并逐渐长大,伴鼻尖肿胀感,抗炎治疗无效,并于2010年7月入住我院。入院检查：鼻尖隆起,触之囊性感,无压痛。前鼻孔较小,鼻腔和鼻咽无充血和新生物。颈部淋巴结无肿大。结节穿刺抽出淡黄色液体。入院后在局麻下手术摘除结节,

糖皮质激素对鼻息肉组织中IL-5、IL-13表达的影响

目的探讨糖皮质激素(地塞米松)治疗对鼻息肉组织中IL-5、IL-13表达的影响。方法采用免疫组织化学SP法检测IL-5和IL-13在鼻息肉组织中的表达,HPIAL-2000型彩色全自动图像分析仪进行阳性细胞吸收度测定,对激素治疗前后的差异进行分析。结果 IL-5、IL-13在鼻息肉黏膜上皮细胞、血管内皮细胞、腺上皮细胞、黏膜下浸润炎性细胞均有阳性表达。激素治疗后,IL-5、IL-13表达均显著降低。治疗前后差异有统计学意义(P<0.05)。结论全身应用糖皮质激素治疗能够抑制鼻息肉组织中Th2类细胞因子IL-5、IL-13的表达从而有效减轻鼻息肉的嗜酸性粒细胞炎症反应症状。

灯盏花素对顺铂所致豚鼠耳蜗损伤的拮抗作用

目的探讨灯盏花素对顺铂致豚鼠耳毒性的拮抗作用。方法将30只豚鼠分为三组:正常对照组(A组)、实验对照组(B组)、实验组(C组),每组10只。B组和C组一次性腹腔注顺铂10 mg/kg,同时C组连续10天腹腔注射灯盏花素15 mg.kg-1.d-1,B组等时程腹腔注等量生理盐水。每组豚鼠在实验前后均行听性脑干反应(ABR)检测。在豚鼠顺铂致耳毒性模型完成并检测ABR反应阈后,用免疫组织化学方法检测4-羟基-2-壬烯醛(4-HNE)在各组动物耳蜗的表达,同时用扫描电镜观察各组豚鼠耳蜗形态。结果实验前三组豚鼠ABR反应阈差异无统计学意义(P>0.05),实验后B组和C组豚鼠ABR反应阈分别为50.12±18.45、36.32±15.63 dB SPL,均明显高于实验前,且B组显著高于C组(P<0.05),B组豚鼠听功能损伤明显重于C组。4-HNE在A组表达呈阴性,在B组和C组耳蜗表达呈阳性,且在B组的表达明显强于C组。B组耳蜗外毛细胞的损伤明显较C组重。结论 4-HNE在顺铂所致豚鼠耳蜗损伤中呈阳性表达。灯盏花素对4-HNE的形成有明显抑制作用,且能拮抗顺铂对豚鼠的耳蜗毒性,表明活性氧(ROS)在顺铂所致豚鼠耳蜗损伤中起重要作用。

MMP-9和CC10在小鼠变应性鼻炎中的表达和相关性研究

目的研究MMP-9和CC10在小鼠变应性鼻炎中的表达和两者之间是否有相关性。方法用卵清蛋白来建立野生型小鼠和CC10基因敲除小鼠变应性鼻炎动物模型。分别用免疫组织化学、过碘酸-希夫染色、苏木素-伊红染色,检测小鼠鼻黏膜组织CC10和MPP9表达、杯状细胞、浸润的嗜酸性粒细胞。结果和对照组相比,MMP-9、嗜酸性粒细胞、杯状细胞,在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中表达明显升高,并且在CC10基因敲除小鼠中升高更加显著,均P<0.01。相反,而和对照小鼠相比,CC10在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中表达明显下降,P<0.01。MMP-9和CC10表达呈显著负相关,相关系数为-0.57,P<0.01。结论 MMP-9和CC10参与了小鼠变应性鼻炎的发病过程,而且CC10直接或者间接抑制了MMP-9的表达。

L-精氨酸在过量水杨酸钠致豚鼠内耳损伤中的保护作用

目的观察L -精氨酸在过量水杨酸钠致豚鼠内耳损伤中的作用。方法①将 48只健康且耳廓反射正常的花色豚鼠随机分为四组 :A组 :对照组 (给等量生理盐水 ) 1 2只 ;B组 :水杨酸钠 [45 0mg/(kg·d)组 ;C组 :水杨酸钠 [45 0mg/(kg·d) ]+L -精氨酸 [2 0 0mg/(kg·d) ]组 ;D组 :水杨酸钠 [45 0mg/(kg·d) ]+L -精氨酸 [2 0 0mg/(kg·d) ]组 +亚硝基左旋精氨酸甲酯 [L -NAME 3mg/(kg·d) ]。②测试ABR听反应阈和Ⅰ波潜伏期。③以磷酸二酯酶测定法检测耳蜗组织CaM活性。④用比色测量血浆中的NO含量。结果①各给药组给药后的第 2、4和第 6天ABR阈值均有明显提高 ,对照组ABR阈值没有明显改变。B组给药后阈值抬高最明显 ,于给药后的第 6天达最高。同期各给药组组间比较发现C组用药后第 4、6、8、1 0天ABR阈值明显低于B组和D组 (P <0 .0 5 )。②A组在各时间段所测ABRⅠ波潜伏期无显著波动。B组、D组在给药后的第 4、6、8、1 0天ABRⅠ波潜伏期与同期对照组比较有显著延长 (P <0 .0 5 ) ,这种变化在水杨酸钠给药组尤为明显 (P <0 .0 1 )。③L -Arg治疗组豚鼠耳蜗组织CaM活性明显低于水杨酸钠组 (P <0 .0 1 )及水杨酸钠 +L -Arg +L -NAME组 (P <0 .0 1 )。而血浆NO含量水杨酸钠组明显低于对照组 (P <0 .0 1 )

水杨酸钠对肾性高血压大鼠耳蜗Hsf1 mRNA表达的影响

目的观察水杨酸钠对肾性高血压大鼠耳蜗Hsf1表达的影响 ,并分析其可能的机制。方法将造模 4周后模型成功大鼠 36只 ,另设正常对照组 (假手术组 ) 12只 ,分为 4组 ,每组 12只 ,A组 :正常对照组 (假手术组 ,Sham组 ) ;B组 :模型对照组 (2K1C组 ) ;C组 :2K1C +水杨酸钠组 ;D组 :2K1C +水杨酸钠 (45 0mg·kg-1·d 1) +L 精氨酸(L Arg ,2 0 0mg·kg-1·d 1)组。采用RT PCR方法检测耳蜗组织Hsf1mRNA表达情况 ,并做半定量法分析。结果① 2K1C +水杨酸钠 +L Arg尾SBP较模型对照组和 2K1C +水杨酸钠组明显降低 (P <0 .0 5 ) ;②正常对照组Hsf1mRNA有微弱表达 ,模型对照组Hsf1mRNA表达较高 ,2K1C +水杨酸钠组表达最高 ,2K1C +水杨酸钠 +L Arg治疗组表达较弱 ;OD值比较分析发现 ,模型对照组Hsf1mRNA表达较正常对照组Hsf1mRNA表达有显著增高(P <0 .0 1) ,2K1C +水杨酸钠组与模型对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,2K1C +水杨酸钠 +L Arg治疗组OD值明显低于模型对照组 (P <0 .0 5 )以及 2K1C +水杨酸钠组 (P <0 .0 1) ,2K1C +水杨酸钠 +L Arg治疗组OD值与正常对照组比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论水杨酸钠可提高耳蜗组织Hsf1mRNA表达 ,L Arg可使水杨酸钠所致的耳蜗组织Hsf1mRNA表达下调。

水杨酸钠对肾性高血压大鼠畸变产物耳声发射的影响

目的研究水杨酸钠对肾性高血压大鼠畸变产物耳声发射的影响。方法将造模4周后模型成功大鼠48只(包括假手术组12只)随机分成A、B、C、D4组(每组12只)进行实验。动物处死前检测DPOAE,并进行耳蜗组织SOD活性及MDA的含量和血浆ET含量的测定。结果①血浆ET含量D组与B组比较有明显降低(P<0.01),C组与B组比较无明显差异;②A组、D组、C组SOD活性明显高于B组(P<0.01);③A组、D组、C组耳蜗组织MDA平均含量明显低于B组(P<0.05);④在70dBSPL的高刺激强度下A、B、C、D四组各频率的DROAE检出率均为100％。在低刺激强度(49dBSPL)下,假手术组检出率为100％,而B、C、D组检出率则明显降低,与A组相比较在各频率DPOAE检出率有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)性差异。⑤B组(2K1C组)和C组较A组在各频率DROAE幅值均有所下降,但二者间无显著性差异(P>0.05)。而C组(水杨酸钠给药组)与A组比较在各频率DPOAE检出率的幅值均有极明显下降(P<0.01),尤其以高频为显著。③A、B、C、D4组对各频率DPOAE的潜伏期均无显著性差异(P>0.05)。结论①水杨酸钠可能通过改变内耳微循环而影响肾性高血压大鼠畸变产物耳声发射②水杨酸钠可以影响耳蜗组织自由基的代谢,并有利于氧自由基的清除,水杨酸钠对耳蜗组织氧自由基的清除并不改变其对DPOAE的影响。