氧耗剂致乳鼠心肌缺氧/复氧模型的建立

目的探讨利用氧耗剂建立乳鼠心肌缺氧/复氧损伤模型的一种新方法。方法取SD乳鼠原代心肌细胞培养,观察氧耗剂连二亚硫酸钠不同浓度(1,2,3,4,5,6mmol/L)分别缺糖缺氧1h复氧24h及在4mmol/L浓度下缺糖缺氧不同时间(5min,15min,30min,1h,2h,4h,6h)后复氧24h对心肌细胞存活率及培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的影响,并进行细胞形态学观察。结果乳鼠心肌细胞经过缺氧/复氧处理后,与正常对照组相比,连二亚硫酸钠可呈浓度依赖性降低心肌细胞存活率,尤其Na2S2O4浓度大于3mmol/L时细胞MTT的OD值与正常对照组有显著性差异,同时上清液中LDH含量升高,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。而当连二亚硫酸钠4mmol/L浓度下随着缺氧时间延长,细胞的存活率显著降低,而心肌细胞上清液中LDH的释放量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),呈现时间依赖性。结论应用连二亚硫酸钠可建立心肌细胞缺氧再灌注损伤模型。

黄芪多糖对大鼠心肌缺血保护作用及其机制研究

目的探讨黄芪多糖对大鼠实验性心肌缺血的保护作用及其作用机制。方法黄芪多糖(100,200,400 mg.kg-1)腹腔注射给药7 d,采用异丙肾上腺素(10 mg.kg-1,1次/d,共2 d)sc制作大鼠心肌缺血模型,观察黄芪多糖对大鼠心电图的变化、血浆乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸肌酶(CK)活力及心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力和脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量的影响,并观察心肌组织形态学的改变。结果与模型组相比,黄芪多糖均能有效对抗异丙肾上腺素所致心肌缺血大鼠的心电图S-T段的异常变化,降低血浆LDH、CK活力(P<0.01或P<0.05),增加心肌组织CAT和SOD的活力(P<0.01或P<0.05),并可减少MDA生成(P<0.01或P<0.05),减轻心肌细胞的形态变化。结论黄芪多糖对大鼠心肌缺血有明显的保护作用,作用机制可能与其抗氧化作用有关。

二苯乙烯苷对糖尿病大鼠血脂和炎症因子的调节作用

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对糖尿病大鼠血脂和炎症因子的影响。方法将Wistar大鼠分为正常对照组(A组,10只),糖尿病高脂饮食组(B组,10只),糖尿病高脂饮食+TSG低剂量[10mg/(kg.d)]干预组(C组,10只),糖尿病高脂饮食+TSG高剂量[20mg/(kg.d)]干预组(D组,10只)。16周后,颈动脉取血,检测血脂、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和一氧化氮(NO)水平,肝组织中总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)以及肝脏指数,血清中炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及C反应蛋白(CRP)水平。结果 TSG能显著降低血浆TG、TC、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、IL-6、TNF-α、CRP水平以及肝脏指数,并升高高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平,呈剂量依赖性。TSG干预后明显升高血清SOD活性和NO水平,降低肝脏MDA含量。结论 TSG对糖尿病大鼠具有保护作用,其机制可能与其调节血脂、抗氧化和抗炎作用有关。

白藜芦醇对非酒精性脂肪肝小鼠肝组织脂质过氧化的影响

目的观察白藜芦醇对非酒精性脂肪性肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠形态学及肝内脂质和脂质过氧化的影响。方法高脂饮食同时皮下注射小剂量四氯化碳复制小鼠非酒精性脂肪肝病模型,干预组分别灌胃给予白藜芦醇408,0 mg/(kg.d)。6周后处死动物,测定各组小鼠体质量,肝指数,血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)含量和丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,同时测定肝组织中TG、TC、FFA、MDA、SOD、谷胱甘肽过氧化物(GSH)的含量,并行肝脏病理学检查。结果白藜芦醇两个剂量组可以明显降低肝指数、血脂、肝脂、FFA和MDA含量,增加SOD和GSH含量,改善小鼠肝脏病理形态学改变。结论白藜芦醇能明显改善非酒精性脂肪肝小鼠脂肪肝形态学变化,对抗脂质过氧化反应,减少自由基的损伤,因而对非酒精性脂肪性肝病有防治作用。

二苯乙烯苷对大鼠血栓形成及血液流变学的影响

目的观察二苯乙烯苷对大鼠血栓形成及血液流变学的影响。方法用动静脉旁路方法建立大鼠体外血栓模型,用冰水冷刺激加肾上腺素应激法建立大鼠血栓模型,观察二苯乙烯苷静脉给药5,10,20 mg/kg对大鼠血栓和血液流变学影响。结果二苯乙烯苷明显降低大鼠血液粘度,抑制血栓形成。结论二苯乙烯苷可有效用于抗血栓,改善血液流变学指标。

人参水溶性蛋白的提取及SOD活性测定

目的提取人参水溶性蛋白,测定其蛋白含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力。方法采用缓冲溶液抽提及硫酸铵分级沉淀法制备人参水溶性总蛋白,采用Bradford蛋白含量试剂盒测定蛋白质含量、SDS-PAGE法进行蛋白鉴定、邻苯三酚自氧化法进行SOD活力测定,并采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行活力显示。结果通过Bradford蛋白含量试剂盒测定蛋白质含量达80%,蛋白收率达1%,SDS-PAGE电泳检测显示人参中主要含有8种蛋白亚基。邻苯三酚自氧化法测得SOD活力达16.048 U/mg蛋白,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示一条活性谱带。结论人参中具有较丰富的水溶性蛋白,且这些水溶性蛋白具有较高的SOD活性。

大蒜多糖对人体肝癌BEL-7402的体外抑制作用

目的探讨大蒜多糖(Garlic Polysaccharide,GP)对人肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制效果和诱导凋亡的作用。方法以10,30,100,300μg/ml的GP作用于体外培养的BEL-7402细胞,并作用不同时间,通过MTT法检测GP对细胞生长的抑制作用,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果MTT实验显示GP可抑制BEL-7402细胞的生长,呈时间及浓度依赖性,显微镜下可观察到细胞肿胀、破裂、呈坏死状,流式细胞仪可检测到BEL-7402细胞凋亡率明显增加。结论GP能通过诱导细胞凋亡的方式有效地抑制人肝癌BEL-7402细胞的生长。