miR-182调控线粒体凋亡通路对冠心病模型大鼠心肌组织细胞凋亡的影响

目的 探究微小RNA(miR)-182调控线粒体凋亡通路对冠心病模型大鼠心肌组织细胞凋亡的影响。方法 选取健康SD成年大鼠30只,8~10周龄,15只作为假手术组,15只建立冠心病模型,建模成功后获取建模大鼠心肌组织细胞,经培养、转染后分为上调miR-182a、下调miR-182组、对照组。采用RT-PCR技术检测miR-182、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)相关基因表达,观察3组细胞增殖、凋亡变化,免疫组化法检测心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,Western印迹检测Bcl-2、Bax表达水平。结果 在1、3、6 h与对照组比较,下调miR-182组GSH-PX、SOD、Bcl-2表达水平较高,足细胞凋亡率、细胞增殖密度值、miR-182、MDA、Bax表达水平较低,上调miR-182组GSH-PX、SOD、Bcl-2表达水平较低,足细胞凋亡率、细胞增殖密度值、miR-182、MDA、Bax表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05);与下调miR-182组相比,上调miR-182组GSH-PX、SOD、Bcl-2表达水平较低,足细胞凋亡率、细胞增殖密度值、miR-182、MDA、Bax表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-182通过下调表达水平调控线粒体凋亡通路Bcl-2、Bax水平低表达,从而抑制冠心病模型大鼠心肌组织细胞凋亡,对心肌细胞具有一定保护作用。

下调GIT1对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡能力及周期分布的影响

目的探究下调G蛋白偶联受体激酶结合蛋白1(GIT1)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡能力及周期分布的影响。方法选取乳腺癌MCF-7细胞,培养后分为空白组、上调GIT1组和下调GIT1组,检测3组细胞增殖、凋亡、侵袭迁移能力以及周期分布情况,Western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase-3、MMP-9、ICAM-1相对表达量。结果在第24、48、72小时,上调GIT1组细胞增殖率高于空白组,凋亡率低于空白组,且下调GIT1组细胞增殖率低于空白组、上调GIT1组,凋亡率高于空白组、上调GIT1组(P<0.05)。上调GIT1组处于G1期的细胞比例低于空白组,处于S、G2期的细胞比例高于空白组,且下调GIT1组处于G1期的细胞比例均高于空白组、上调GIT1组,处于S、G2期的细胞比例低于空白组、上调GIT1组(P<0.05)。上调GIT1组细胞侵袭细胞数、迁移细胞数均高于空白组,且下调GIT1组细胞侵袭细胞数、迁移细胞数均低于空白组、上调GIT1组(P<0.05)。上调GIT1组细胞Bcl-2相对表达量低于空白组,Bax、caspase-3、MMP-9、ICAM-1相对表达量高于空白组,且下调GIT1组细胞Bcl-2相对表达量高于空白组、上调GIT1组,Bax、caspase-3、MMP-9、ICAM-1相对表达量均低于空白组、上调GIT1组(P<0.05)。结论下调GIT1蛋白的表达能够抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移,调控细胞周期分布,促进乳腺癌MCF-7细胞凋亡,调控Bcl-2、Bax、caspase-3、MMP-9、ICAM-1蛋白相对表达量。

下调cyclinD1对心肌梗死模型大鼠干预效果及作用机制

目的探讨下调细胞周期蛋白(cyclin)D1对心肌梗死模型大鼠的干预效果及作用机制。方法做cyclinD1基因转染,构建上调、下调载体,选取45只SPF级SD健康大鼠,随机分为空白组、上调组、下调组各15只,构建心肌梗死模型,下调组局部siRNA-VEGF-B(下调)心肌细胞,上调组局部注射siRNA-对照序列(上调)心肌细胞,空白组不做任何处理。测定各组心功能、心肌酶、心肌细胞肥大情况及小G蛋白RhoA激酶(ROCK)/cyclinD1信号通路蛋白表达情况。结果下调组左室舒张压(LVDP)、左室收缩压(LVSP)水平均显著高于上调组,左室舒张末压(LVEDP)、心率、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、羟丁酸脱氢酶(HBDH)、乳酸脱氢酶(LDH)水平、左心室重量指数(LVW/BW)、心肌细胞横断面积、心肌组织中ROCK1、ROCK2、cyclinD1蛋白表达量均显著低于上调组(均P<0.05)。结论下调cyclinD1可抑制心肌梗死模型大鼠心肌细胞肥大,其作用机制可能与抑制ROCK/cyclinD1信号通路相关。