脑血管畸形相关癫痫研究进展

脑血管畸形(CVM)是指脑局部血管数量和结构的非肿瘤性发育异常所导致的疾病。癫痫发作是CVM常见的临床表现,主要存在于脑动静脉畸形和脑海绵状血管瘤两种CVM病理类型中。CVM相关癫痫为患者带来一系列的负担,是CVM临床诊疗中改善患者预后需要考虑的重要因素。现总结CVM相关癫痫的研究进展,对其发生率、发病机制、所导致的脑网络功能连接损伤、相关危险因素、个体化评估、治疗及预后等进行综述,旨在对CVM相关癫痫建立更加全面的认识,从而辅助CVM临床诊疗。

转录因子Tbx5a与Nkx2.5结合共激活nppa启动子的初步分析

心脏是脊椎动物发育过程中最早形成的重要器官之一,而先天性心脏病(先心病)是常见的先天性畸形类疾病。其中,转录因子Tbx5突变是导致先心病心手综合征的重要原因,Nkx2.5与瓣膜缺失性先心病密切相关。本研究通过启动子构建探究心脏发育重要因子tbx5a与nkx2.5对下游基因nppa的调控作用。本研究通过PCR分别克隆了斑马鱼tbx5a与nkx2.5基因的全长序列1491 bp和957 bp,成功构建了pMEV-2×HA-tbx5a和pcDNA3.1-myc-nkx2.5表达载体。同时合成了斑马鱼nppa基因2014 bp的启动子序列,并构建了荧光素酶报告基因表达载体pGL3-nppa-luc。双荧光素酶报告基因检测(Luciferase)实验结果显示,转染pGL3-nppa-luc载体的293T细胞具有较空载组6.3倍的荧光素酶活性(p<0.001),表明该2014 bp的nppa序列具备其启动子活性。本研究进一步通过与nppa启动子分别转染tbx5a、nkx2.5及两者共转染的Luciferase实验发现,斑马鱼Tbx5a和Nkx2.5可以协同作用并激活基因nppa的表达12倍(p<0.001),表明Tbx5a与Nkx2.5结合对下游nppa具备显著上调作用。本研究为进一步揭示转录因子Tbx5a与Nkx2.5对nppa的调控及其在心脏发育中的作用奠定了基础。同时,本研究成功构建具备活性的斑马鱼nppa启动子,对研究其心脏发育相关信号通路的调控机制具有重要意义。