氟对大鼠血浆中蛋白质氧化损伤作用的研究

目的观察大鼠血浆中氧化应激水平、糖基化终产物(AGEs)和晚期氧化蛋白产物(AOPP)含量,探讨氟对大鼠血浆中蛋白质氧化损伤的作用。方法80只SPF级雄性3周龄Wistar大鼠,体重为(82.34±10.60)g,按体重采用随机数字表法分为4组,每组20只,对照组饮用蒸馏水,染氟组分别饮用氟含量为25、50和100mg/L的蒸馏水。各组大鼠自由饮食,分别于饲养1个月和3个月时处死大鼠,取尿液、股骨、外周血等用于实验。尿氟和骨氟含量检测采用离子选择电极法,超氧化物歧化酶(SOD)活性检测采用羟胺法,丙二醛(MDA)含量检测采用硫代巴比妥酸(TBA)法,AGEs和AOPP含量检测采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)。结果饲养1个月和3个月时,对照组和25、50、100mg/L染氟组大鼠尿氟含量(mg/L:2.088±0.638、9.170±2.865、20.094±8.186、54.866±2.866,2.202±1.282、9.112±2.364、21.854±8.325、52.513±16.211)、骨氟含量(mg/kg:324.985±127.094、846.148±331.861、1886.601±250.140、2420.971±135.883,417.591±88.324、1582.243±347.975、2163.519±614.932、2755.434±265.370)组间比较差异有统计学意义(F=88.379、29.225,87.440、33.998,P均<0.05)。饲养1个月和3个月时,对照组和25、50、100mg/L染氟组大鼠血浆SOD活性(U/ml:32.469±5.674、35.931±2.262、36.746±3.994、38.042±4.632,31.027±4.147、30.777±4.791、34.148±1.755、36.585±2.860)、AGEs含量(μg/L:26.977±5.285、33.303±6.226、28.021±5.946、34.117±6.706,35.681±3.802、33.651±7.214、28.114±4.660、24.330±3.581)组间比较差异有统计学意义(F=2.896、5.780,3.565、10.195,P均<0.05)。经析因设计方差分析,氟暴露剂量和暴露时间与AGEs含量存在交互作用(F=8.957,P<0.01)。结论过量氟暴露可影响大鼠尿氟、骨氟含量,SOD活性和AGEs含量,提示过量氟有可能通过蛋白质直接和间接氧化损伤途径而调节蛋白质的表达,从而导致氟中毒的发生。

氟对大鼠血、肝、肾和脑中5-甲基胞嘧啶表达的影响

目的探讨氟暴露剂量和暴露时间对大鼠血、肝、肾和脑中5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5-mC)表达的影响,了解氟对不同组织DNA甲基化水平的影响是否存在差异。方法雄性SPF级3周龄Wistar大鼠80只,按体重[(82.34±10.60)g]采用随机数字表法分为4组,每组20只。对照组饮用蒸馏水,染氟组分别饮用含氟剂量为25、50和100mg/L的蒸馏水,自由饮食,分别于饲养1个月和3个月(n=10)时处死,采集外周血和组织样本。观察大鼠氟斑牙发生率;离子选择电极法检测骨氟和尿氟含量;酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血、肝、肾和脑中5-mC含量。采用析因设计方差分析方法,分析氟暴露剂量和暴露时间对大鼠外周血和不同组织中5-mC的单独作用和交互作用。结果在饲养1个月和3个月时,对照组大鼠无氟斑牙检出,25、50、100mg/L染氟组大鼠均有不同程度氟斑牙发生;氟暴露剂量和暴露时间均对大鼠骨氟含量[1个月:(324.985±127.094)、(846.148±331.861)、(1886.601±250.140)、(2420.971±135.883)mg/kg;3个月:(417.591±88.324)、(1582.243±347.975)、(2163.519±614.932)、(2755.434±265.370)mg/kg]存在单独效应(F=96.692、13.077,P均<0.01),但二者间不存在交互效应(F=2.013,P>0.05);氟暴露剂量对大鼠尿氟含量存在单独效应(F=62.358,P<0.01),暴露时间对其无单独效应(F=0.862,P>0.05),且二者间不存在交互效应(F=0.081,P>0.05)。氟暴露剂量对大鼠外周血中5-mC含量存在单独效应(F=8.446,P<0.01),暴露时间对其无单独效应(F=0.095,P>0.05),但二者间存在交互效应(F=4.676,P<0.01);氟暴露剂量和暴露时间对大鼠肝脏中5-mC含量均存在单独效应(F=4.737、7.064,P<0.01或<0.05),且二者间存在交互效应(F=8.302,P<0.01);氟暴露时间对大鼠肾中5-mC含量存在单独效应(F=6.340,P<0.05),暴露剂量对其无单独效应(F=0.140,P>0.05),且二者间不存在交互效应(F=1.269,P>0.05);氟暴露剂量和暴露时间对大鼠脑中5-mC含量均无单独效应(F=0.633、2.065,P均>0.05)。结论氟暴露剂量和暴露时间对大鼠血、肝、肾和脑中5-mC表达水平的影响有差异,提示氟对不同组织DNA甲基化水平的影响存在差异性。