医学免疫学汉英双语教学实践探析

在高校医学免疫学教学中开展汉英双语教学,目的在于提高医学生对专业英语的掌握,扩大专业词汇量,提高医学生查阅英文医学文献能力。在教学过程中,通过精选教材,适时调整中英文授课学时比例,加强师生教学互动,在教学实践中取得了较好效果。

TNF-α对人糖皮质激素受体表达的影响

目的:研究TNF-α对人糖皮质激素受体(GR)表达的影响,探讨炎性细胞因子与糖皮质激素抵抗的相关性.方法:分离人外周血单个核细胞(PBMCs),用TNF-α刺激培养后,采用RT-PCR方法分析其与未用TNF-α刺激培养的PBMCs在GRα和GRβmRNA表达方面的变化.结果:经TNF-α刺激培养24 h的PBMCs,与未加TNF-α刺激培养的PBMCs相比,GRαmRNA表达无显著变化(P>0.05),GRα/GAPDHmRNA分别为1.16±0.73,1.20±0.51,但GRβmRNA表达明显增加(P<0.05),GRβ/GAPDH mRNA分别为1.62±0.59,0.81±0.66.结论:TNF-α可以增加GRβ的表达,这可能是炎性细胞因子诱发糖皮质激素抵抗的内在机制之一.

JNK信号传导通路在砷剂治疗白血病中的作用

[目的]探讨在三氧化二砷(As2O3)抑制急性早幼粒白血病细胞(NB4)生长并诱导其凋亡过程中,c鄄junN端激酶(c鄄junN鄄terminalkinase,JNK)信号传导通路的作用。[方法]用3H鄄胸腺嘧啶掺入试验和DNA梯形电泳证明As2O3的抑制细胞生长和诱导细胞凋亡作用。加入或不加入各种信号通路抑制剂的细胞暴露于As2O3后,提取蛋白质与不同的抗体杂交。[结果]8μmol/LAs2O3作用于NB4细胞48h,3H鄄胸腺嘧啶掺入率下降60%,与2μmol/L相比,差异有显著性(P<0.01)。且可产生最大程度的DNA断裂。JNK的活化在As2O3作用后10min即可产生,2h后逐渐减少,Caspase的活化在As2O3作用后8h可产生。特异性的JNK通路抑制剂可阻断As2O3诱导的JNK、Caspase活化,而Caspase抑制剂只能抑制Caspase活化,不能抑制JNK的活化。[结论]As2O3可抑制NB4细胞生长并诱导其凋亡,其过程是由活化的JNK及其下游的Caspase介导。提示JNK途径的激活可能是肿瘤治疗的重要方向。

亚毒性剂量雷帕霉素增强低浓度奥沙利铂体外抑制结肠癌细胞增殖

目的观察亚毒性剂量雷帕霉素（RAPA）与低浓度奥沙利铂（L-OHP）联合用药对人结肠癌HCT116细胞的杀伤效果及凋亡的影响。方法应用MTr法检测L-OHP、RAPA单药或联合用药对细胞增殖的抑制作用；CalcuSyn2．0软件计算药物半数抑制浓度（IC50）及L-OHP和RAPA联合用药指数（cI）；流式细胞术和Western印迹法检测药物对细胞凋亡的影响。结果L-OHP和RAPA对HCT116细胞的增殖抑制作用均呈浓度依赖性，二者的48小时单药IC50分别为（8．35±0．78）μM（r=0．99）和（223．44±38．10）nM（r=0．94）。10nM（IC20）的RAPA与1μM（IC20）或2．5μM（IC30）的L-OHP联合应用后cI值分别为0．52和0．72。1μML—OHP与10nMRAPA联合用药组的细胞增殖抑制率为31％，约为同浓度单药组的2倍（P〈0．05）。10nMRAPA处理24小时的凋亡率与对照组无差别，联合用药的凋亡率高于L-OHP单药组。联合用药48小时后剪切型PARP（poly ADP-ribose polymerase）蛋白表达水平高于单药组。结论亚毒性剂量的RAPA和低浓度L-OHP组合协同抑制HCTl16细胞的增殖，其机制与增强诱导细胞凋亡相关。

基质金属蛋白酶MMP-26能有效促进人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3浸润能力

胚胎植入过程中,滋养层细胞浸润与肿瘤的迁移过程非常相似,但显著的区别在于前者是受严格调控的有节制的浸润,基质金属蛋白酶(MMPs)的许多成员在其中起重要的作用.MMP-26是近年来发现的MMPs家族的新成员,它在滋养层细胞中的作用所知甚少.利用国际常用的人滋养层细胞模型——人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)作为体外实验模型,探讨MMP-26在人滋养层细胞浸润调节中的作用.将含有MMP-26全长cDNA的pCR3.1质粒转染到JEG-3细胞中,获得过量表达MMP-26基因的稳定细胞系JEG-3/MMP-26;细胞浸润分析表明JEG/MMP-26细胞的浸润能力较母本细胞明显增强;RT-PCR和明胶酶谱分析显示JEG-3/MMP-26细胞中MMP-9的表达和分泌水平提高;双荧光免疫细胞化学进一步显示MMP-26和MMP-9蛋白在细胞中有共定位现象.上述结果表明MMP-26能有效促进人滋养层细胞浸润,其作用可能是通过与其他MMP分子(如MMP-9)的协调来实现的.

全人源抗TRAIL-R1／-R2单克隆抗体肿瘤治疗的研究进展

目前全人源TRAIL受体（TRAIL-Rs）的单克隆抗体（单抗）对肿瘤靶向治疗已进入临床Ⅰ～Ⅳ期研究。TRAIL-Rs单抗可分别与死亡受体TRAIL-R1和TRAIL-R2结合，形成死亡诱导信号复合体（DISC），诱导肿瘤细胞凋亡，成为抗肿瘤抗体药物研发的热点之一。全人源TRAIL-Rs单抗与放疗、化疗药物或其它制剂以及免疫治疗方法联合应用在肿瘤治疗中取得了显著的效果，为临床抗肿瘤治疗提供了新方案。

肿瘤干细胞潜在标志物 DCLK1 在消化道恶性肿瘤中的研究进展

肿瘤干细胞标志物的发现及应用对于肿瘤的预防和治疗有重要的意义. DCLK1是首次被发现只存在于肿瘤干细胞而不存在于正常干细胞的标志物. DCLK1在胃肠道癌、食道癌、胆管癌和神经胶质瘤等肿瘤细胞中均有表达,并且与肿瘤的发生发展和迁移复发都密切相关. 尽管DCLK1作为肿瘤干细胞标志物还存在很多未知,但是DCLK1为肿瘤的靶向特异性治疗提供了一个新的发展前景.

TLR7/8激动剂R848体外诱导记忆B细胞分化抗原特异性浆细胞的方法研究

目的为了从PBMCs获得病原体特异性浆细胞,我们建立了TLR7/8激动剂R848体外诱导记忆B淋巴细胞分化浆细胞的方法。方法使用TLR7/8激动剂R848联合细胞因子组合,诱导接种乙肝疫苗(3年及以上)的健康志愿者来源的PBMCs,进行体外活化和分化浆细胞。分别利用ELISA和ELISPOT检测培养液上清中总IgG、HBsAg特异性IgG以及总抗体分泌细胞(ASCs)和HBsAg抗原特异性ASCs。结果成功建立R848体外诱导PBMCs中记忆B淋巴细胞分化浆细胞的方法。R848(使用质量浓度在1~2.5μg/ml)仅与IL-2联合使用,最早在第5天即可检测到特异性ASCs。结论通过该方法可以从患者恢复期少量(仅需5~10 ml)的外周血中获得抗原特异性抗体分泌细胞用于分析和分选,为中和抗体的制备提供方法。

胸腺修饰诱导同种异体静脉移植的免疫耐受研究

目的观察大鼠胸腺内注射异基因抗原在同种异体异基因股静脉移植免疫耐受中的作用。方法将48只SD大鼠随机分为4组：自体股静脉移植组（A组）、异体股静脉移植组（B组）、异体股静脉移植免疫抑制剂组（C组）、胸腺内注射供体组织相容性（MHC）抗原后移植组（D组）。于2周后进行影像学、组织学、免疫学检测。结果组织学检测结果显示：D组、C组急性排斥反应损伤较轻，B组血管壁的各层结构破坏最重，可见大量炎性细胞浸润。B组受体大鼠血清干扰素（IFN）-γ浓度为（86．707±10．928）ng／L，显著高于A、C、D组[（29．328±4．170）、（69．076±8．059）、（63．355±4．895）ng／L，P〈0．05]；B组受体大鼠血清白细胞介素（IL）-4浓度为（23．656±3．369）ng／L，显著低于C、D组[（29．425±4．174）、（31．000±4．659）ng／L，P〈0．05]。结论胸腺内注射异基因NHC抗原可诱导大鼠对同种异体血管移植的特异性免疫耐受。

靶向肝细胞癌的T细胞免疫治疗研究现状

恶性肿瘤严重威胁人类的健康，肿瘤免疫治疗是继手术治疗和放化疗之后第四大治疗方法。目前对于肝细胞癌的免疫治疗尚无十分有效的方法。基因修饰T细胞免疫治疗在血液肿瘤中取得突破性进展，研究者尝试通过T细胞免疫治疗方法突破实体肿瘤的治疗效果。当前针对肝细胞癌免疫治疗的研究十分有限，现就靶向原发性肝癌T细胞免疫治疗的前沿研究现状做一综述。

嵌合抗原受体-T细胞免疫治疗的副作用及其机制的研究进展

嵌合抗原受体(chimeric antigqjn receptor,CAR)T细胞疗法治疗复发性或难治性B细胞淋巴肿瘤疗效显著,被认为是治疗血液肿瘤的理想技术。但是CAR-T细胞治疗经常伴随严重甚至致命的副作用,影响其临床治疗效果。因此有必要对CAR-T细胞应用于临床所产生的副作用及对副作用发生机制行综述。

CD47及其配体在肿瘤免疫治疗中的研究进展

CD47是一种广泛表达的免疫调节蛋白,通过与信号调节蛋白α(signal regulatory proteinα,SIRPα)、血小板反应素-1(thrombospondin-1,TSP1)和整合素等配体结合,调节细胞的迁移和吞噬活性,在维持免疫系统动态平衡中发挥重要作用。CD47在各类癌症中的过度表达往往与临床不良预后相关。封闭CD47可以抑制实体瘤及血液系统恶性肿瘤的生长,并提高常规化放疗及其他靶向治疗的疗效。文章就CD47在肿瘤增殖、侵袭及转移中的关键信号和相关靶向治疗进行综述,阐述了CD47与其配体在肿瘤进展中的作用及CD47相关药物的研究现状。

发作性睡病研究进展

本文综述了发作性睡病的临床特征,可能的病因、发病机制及其治疗。

系统性红斑狼疮与IL-12

ＩＬ１２即自然杀伤细胞刺激因子，有很强的免疫调节作用，已知它在Ｔｈ１细胞介导的自身免疫病尤其是器官特异的自身免疫病中发挥重大作用，而在系统性自身免疫病中的作用仍不清楚，本研究旨在探讨ＩＬ１２与ＳＬＥ的关系，以进一步揭示ＳＬＥ的发病机制，探索新的治...

自身抗体联合检测与狼疮肾炎严重度的相关性分析

目的分析抗双链DNA(anti-dsDNA)抗体、抗核小体(anti-nucleosome)抗体及抗组蛋白(anti-histone)抗体联合阳性与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)并发狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)严重度的相关性.方法收集2009年1月至2018年6月来自白求恩国际和平医院的SLE患者490例,其中LN组204例,非LN组286例.采用免疫渗滤法检测血清中的自身抗体,尿沉积法检测24 h尿蛋白定量,自动分析仪分析血清肌酐(serum creatinine,Scr)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平.结果 SLE患者LN组抗dsDNA抗体(64.7%比37.1%,P<0.05),抗核小体抗体(60.5%比30.0%,P<0.05)及抗组蛋白抗体(47.3%比21.7%,P<0.05)比率高于非LN组.LN组抗双链DNA、抗核小体、抗组蛋白同时阳性(三阳性)比率显著高于非LN组(38.24%比19.58%,P<0.05).三阳性LN患者与非三阳性LN患者肾功能比较结果显示,24 h尿蛋白(2.88比1.02,P<0.05),Scr(83.16比57.10,P<0.05),BUN(7.37比5.16,P<0.05)显著高于非三阳性组.结论抗双链DNA、抗核小体及抗组蛋白同时阳性预示着SLE患者更易患LN并且对肾脏损伤程度更严重.

类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞背景特异性microRNA-靶基因及microRNA-小分子互作网络分析

目的建立类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（rheumatoid arthritis fibroblast like synoviocytes ，RA-FLS）背景特异性的microRNA -靶基因和microRNA-小分子互作网络。方法利用microRNA PCR Array数据（GSE72564）筛选出RA-FLS和骨关节炎对照样本中差异表达的microRNAs，整合多个microRNA-靶基因互作数据库，构建RA-FLS差异表达microRNA与靶基因的功能调控网络；整合microRNA-小分子互作数据，构建RA-FLS差异表达microRNA-小分子调控网络，计算网络中心性，获得核心调控microRNA及小分子药物节点。结果获得RA-FLS差异表达microRNA 63个，建立RA-FLS背景特异性的microRNA -靶基因和microRNA -小分子互作网络，筛选出hsa-let-7b-5p、hsa-mir-15b-5p、hsa-mir-218-5p、hsa-mir-30a-5p、hsa-mir-520d-3p五个关键microRNA，5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil）、glucose、1，2，6-Tri-O-galloyl-beta-D-glucopyranose（TGGP）、糖皮质激素（glucocorticoid）四种与RA-FLS密切相关的活性小分子。结论RA-FLS背景特异性的microRNA-靶基因和microRNA-小分子互作网络的构建，尤其是中心性microRNA和小分子的筛选，有望成为RA-FLS研究的潜在靶点。

全人源抗人肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体单克隆抗体蛋白高效表达体系的建立及其功能性分析

目的建立高效表达全人源抗人肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体（TRAIL）-R1单克隆抗体（TR1-404）蛋白体系，并评价TR1-404抗体蛋白功能特性。方法构建pcDNA3．4载体抗体质粒，转染Expi293F^TM细胞，表达抗体蛋白。收集细胞培养上清，使用ProteinA／G纯化抗体蛋白。利用双抗体夹心和间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗体蛋白浓度及特异性。流式细胞分析检测TRl_404与Hela细胞和HCT116细胞表面TRAIL-R1的结合能力。MTT法检测在不同时间点TR1-404、TRAIL及二者联合作用对Hela细胞和HCT116细胞生存和增殖的影响。Annexin V／PI双染色检测Hela细胞和HCT116细胞凋亡。结果成功构建pcDNA3．4载体抗体质粒和建立Expi293F^TM细胞蛋白高效表达系统。精制的TR1-404抗体既与重组TRAIL-R1抗原特异性结合，也能与Hela和HCT116细胞表面的TRAIL-R1结合。发现TR1-404联合TRAIL作用于Hela细胞，肿瘤细胞凋亡效果显著提高。而在HCT116细胞中，TRAIL与TR1-404的联合作用未见显著提高。结论成功建立抗体蛋白高效表达系统。TR1-404抗体特异性与TRAIL-R1抗原结合。TR1-404抗体提高TRAIL诱导的Hela细胞凋亡作用。本研究为TRAIL—R1靶向的抗肿瘤治疗研究提供新方法。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在多种疾病中的生物学作用

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（Apo2L/TRAIL）是肿瘤坏死因子家族的一员,可以诱导表达特异性死亡受体TRAIL-R1 （DR4）或TRAIL-R2 （DR5）的细胞凋亡.TRAIL可诱导多种肿瘤细胞凋亡,对正常细胞无杀伤性,因此将其作为抗肿瘤靶向治疗候选药物之一,备受关注.近期研究发现,TRAIL既通过其受体介导细胞凋亡信号通路,又可传导非凋亡的信号通路,在自身免疫病和感染性疾病中发挥重要生物学作用.因而简单阐明TRAIL在人类多种疾病中生物学作用的研究进展,对今后TRAIL研究方向和治疗策略的选择具有指导意义.

体外诱导外周血B淋巴细胞分化浆细胞方法的建立及评价

目的建立体外活化外周血单个核细胞（PBMCs）中B淋巴细胞扩增和分化浆细胞的方法，为高亲和力治疗性人源单克隆抗体的研发提供研究基础。方法从3名接种过流感疫苗健康志愿者（〉10个月）的末梢血中分离PBMCs，加入TLR9激动剂CpGDNA2006和细胞因子等培养；流式细胞分析、酶联免疫吸附试验（ELISA）、酶联免疫斑点试验（ELISPOT）、细胞计数法评价B淋巴细胞体外活化效果。结果与对照组相比，刺激组中CD19阳性细胞和CD138阳性细胞的比率明显增高（t=2．625，3．571，P〈0．05）；培养上清中总IgG和抗原特异性IgG含量增加，且分泌IgG和抗原特异性IgG的浆细胞数量明显增加（t=2．942，3．196，P〈0．05），刺激组比未刺激组细胞生存率提高（t=2．182，P〈0．05）。通过体外活化方法，只需约10ml外周血即可检测到足量的抗原特异性抗体分泌细胞。结论本试验所建立的体外活化方法能够有效地诱导外周血B淋巴细胞扩增和分化!浆细胞。

自外周血记忆B细胞体外活化和分化抗原特异性浆细胞的方法研究

目的建立自人外周血淋巴细胞（PBMCs）中的记忆B细胞活化和分化特异性抗体分泌细胞（如浆细胞）的体外活化方法，为抗体药物研发提供研究基础。方法采集两名接种过乙型肝炎疫苗3年和25年健康成年志愿者（z和L）外周血，分离PBMCs，通过白细胞介素（IL）-2、IL-4和Toll样受体诱导剂（CpG、R848）体外诱导活化记忆B细胞。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测培养上清中总抗体和HBsAg特异性抗体的含量；通过酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测培养细胞中总抗体分泌细胞（ASC）数量的变化和HBsAg特异性抗体细胞数量。结果活化第6天，对照组和两个活化组[CpGDNA2006联合IL-2（C组）和R848联合IL-2（R组）]细胞培养上清总免疫球蛋白（Ig）G浓度分别为37．06ng／mL、80．87ng／mL和85．97ng／mL，两个活化组（C组和R组）均明显高于对照组（t=23．318，60．639，P均〈0．05）。ELISPOT检测ASC数量，结果显示，C组和R组数量均多于对照组，并且R组明显多于C组。两种活化方法均能在体外诱导B细胞活化，但R组活化效果更佳，确立R组为最佳活化方法。用该方法活化两名乙型肝炎疫苗接种者PBMCs，ELISA检测活化组特异性抗体浓度，R组显著高于对照组（t=5．031，11．561，P均〈0．05）。不同细胞数量诱导的分组，ELISPOT检测HBsAg特异性抗体分泌细胞数量，R组均明显多于对照组。结论确立诱导剂R848和细胞因子IL-2联合能够有效地诱导外周血记忆B细胞体外活化和分化抗原特异性浆细胞，为今后抗体药物研发提供了研究基础。