多巴胺受体2减轻离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的观察多巴胺受体2(DR2)对离体大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的影响及其可能机制。方法将大鼠40只,每组n=10,随机分成对照组(control)、I/R组、10μmol/L Bromocriptine(DR2激动剂)组(Bro),10μmol/L Haloperidol(DR2抑制剂)组(Hal)。用Langendorff离体灌流装置,复制大鼠心肌I/R损伤模型。Powerlab生理记录仪记录心功能;比色法测定冠脉流出液LDH、CK活性和心肌组织匀浆SOD活性以及MDA含量;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;Western blot检测DR2、Bcl-2、caspase-3和caspase-9蛋白的表达。结果与对照组比较,I/R组DR2、Bcl-2、caspase-3和caspase-9蛋白表达、LDH和CK活性、MDA含量和细胞凋亡率均增加(P<0.01),唯有SOD活性降低,心功能减弱(P<0.01)。与I/R组比较,Bro降低LDH和CK活性、MDA含量、细胞凋亡率、caspase-3和caspase-9的表达,升高SOD活性,改善心功能和进一步增加Bcl-2的表达(P<0.01);Hal对上述指标影响不显著。结论 DR2可减轻心肌I/R损伤,其机制与抗氧化、清除自由基、上调Bcl-2表达以及下调caspase-3和caspase-9的表达有关。

2类多巴胺受体通过促进PKC-ε转位参与心肌缺血后适应抑制细胞凋亡

目的以蛋白激酶C-ε(PKC-ε)转位为切入点,探讨2类多巴胺受体(DR2)在心肌缺血后适应抑制细胞凋亡中的作用及可能机制。方法复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧和缺血后适应模型。MTT检测心肌细胞的存活率;Hoechst 33342染色观察细胞凋亡;Western blotting检测Bcl-2、caspase-3、caspase-9、PKC-ε蛋白的表达和细胞色素C(Cyt c)的释放;免疫共沉淀检测PKC-ε和DR2的相互作用。结果与正常组比较,缺氧/复氧组细胞存活率降低,细胞凋亡增加,促凋亡因子(Cyt c、caspase-3、caspase-9)表达增加,抑凋亡因子(Bcl-2)表达亦增加,PKC-ε没有转位到细胞膜,PKC-ε和DR2不存在相互作用。与缺氧/复氧组比较,缺血后适应明显升高细胞存活率,降低细胞凋亡,抑制促凋亡因子(Cyt c、caspase-3、caspase-9)表达,促进抑凋亡因子(Bcl-2)表达,PKC-ε转位到细胞膜,PKC-ε和DR2存在相互作用。与缺血后适应组比较,DR2激动剂进一步增加缺血后适应的保护作用,而DR2抑制剂则取消了DR2激动剂的作用。结论DR2参与心肌缺血后适应抑制细胞凋亡,其机制与DR2促进PKC-ε转位及DR2和PKC-ε存在相互作用有关。

我国北方汉族女性乳腺癌中PELP1／MNAR表达特征及其与Ki-67标记指数相关性研究

目的观察我国北方汉族女性乳腺癌患者肿瘤组织中PELP1／MNAR表达特征及其与临床病理参数及Ki-67表达的相关性。方法采用免疫组化法检测98例北方汉族女性乳腺癌患者及22例乳腺良性纤维腺瘤患者肿瘤组织中PELP1／MNAR、Ki-67表达水平，比较PELP1／MNAR在乳腺良恶性肿瘤中的表达差别，就乳腺癌组织中PELP1／MNAR表达水平与临床参数及Ki-67表达水平进行相关性分析。结果乳腺癌组织中PELP1／MNAR表达阳性率显著高于良性乳腺纤维腺瘤组织（100％VS72．7％，P〈0．01）；乳腺癌组织中PELP1／MNAR表达强度与患者年龄、是否绝经、肿瘤病理分型未见相关性（P〉0．05），与临床等级呈显著正相关（r=0．442，P〈0．01）；有淋巴结转移组PELP1／MNAR表达强度显著高于无淋巴结转移组（56．35V843．19，P=0．015）；PELP1／MNAR与Ki-67表达水平呈显著正相关（r=0．247，P=0．014）。结论PELP1／MNAR高表达是我国北方汉族女性原发性乳腺癌的一个特征并且可能成为判断乳腺癌预后的一个重要病理学指标。

2类多巴胺受体对心肌缺血后处理保护作用的影响及机制

目的:观察2类多巴胺受体(DR2)在心肌缺血后处理保护中的作用,并探讨其机制。方法:复制原代培养乳鼠心肌细胞缺血后处理模型,细胞随机分为正常组(Control)、缺血/再灌注组(I/R)、缺血后处理组(PC)、缺血后处理+DR2激动剂组(PC+Bro)、缺血后处理+DR2抑制剂组(PC+Hal)、缺血后处理+DR2抑制剂+激动剂组(PC+Hal+Bro)。比色法检测细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;透射电镜观察细胞超微结构改变;流式细胞仪检测细胞凋亡变化;Western blot方法检测DR2蛋白表达、p-p38和p-JNK的活性。结果:与正常组相比,I/R能够增加DR2蛋白的表达,升高LDH活性和MDA含量,降低SOD活性,加重细胞损伤和细胞凋亡,上调p-p38和p-JNK的活性;与I/R组比较,PC进一步增加DR2蛋白的表达,降低LDH活性和MDA含量,增加SOD活性,减轻细胞损伤和细胞凋亡,下调p-p38和p-JNK的活性,Bro增强了PC的心肌保护作用,Hal则可取消Bro的这种作用。结论:DR2激活通过下调p-p38和p-JNK的活性参与缺血后处理对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。