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题名抗肿瘤多肽基因重组、纯化方法改进及活性研究
被引量:1
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作者
郑天虎
刘兴汉
赵玲
王立新
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机构
哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学研究室
哈尔滨医科大学药学院药理学教研室
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出处
《哈尔滨医科大学学报》
CAS
2019年第6期561-564,共4页
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基金
黑龙江省自然科学基金面上项目(H2015014).
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文摘
目的改进抗肿瘤多肽30肽纯化方法并测定其活性。方法设计并合成His标签序30肽序列,与PTYB21重组后转化到大肠埃希菌Rosetta(DE3)pLysSS菌株,再经IPTG诱导、镍离子柱纯化后经SDS-PAGE电泳检测融合蛋白表达情况,DTT裂解后G25葡聚糖凝胶层析分离30肽,测定浓度、纯度后,计算产量,MTT检测30肽抗肿瘤活性。结果重组的PTYB21-His-30肽大量地表达融合蛋白,经镍离子柱层析的纯化的30肽与传统提取方法几丁质层析方法总产量基本一致,并且具有较好的抗肿瘤活性。结论重组的抗肿瘤多肽表达载体经镍离子层析后能够纯化出理想的30肽,该纯化方法操作流程简单、节约成本,有利于抗肿瘤多肽的大规模提取。
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关键词
抗肿瘤多肽
组氨酸标签
蛋白质纯化
层析
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Keywords
anti-tumor peptide
His-tag
protein purification
chromatography
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分类号
R979.1
[医药卫生—药品]
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