浅谈医学院校复合型人才的培养模式

21世纪,医学教育改革出现新局面,面临着新的挑战。医学教育的进步,有赖于人才培养模式的改革。仅有扎实专业知识的医学生,已经不能满足社会发展的需要。构建复合型人才培养模式是医学院校深化教育改革的关键,是医学教育实现"三个面向"的必经之路。作者就复合型人才的内涵,构建复合型人才培养模式的重要性,以及构建复合型人才培养模式的途径进行了探讨。

疫情防控期间“组织学与胚胎学”线上教学的实践与思考

新型冠状病毒肺炎疫情防控期间,为了实现“停课不停学”,我教研室开展了对“组织学与胚胎学”线上教学的探索与实践。本文介绍了此次线上教学的具体实施情况,并对整个线上教学的过程进行了总结和讨论,以期为将来开展线上、线下混合式教学改革提供参考。

猪骨髓间充质干细胞的分离培养及核移植后重构胚胎发育能力的研究

不同类型的细胞核移植效率不同,原因之一可能是不同类型细胞核移植后进行重编程的潜力不同。本实验对猪骨髓间充质干细胞(porcine bone marrow mesenchymal stem cells,pMSCs)体外分离培养的方法进行了优化,对猪骨髓间充质干细胞的增殖及生长特性进行了观察分析,并以其作为供体细胞进行核移植,对此类型细胞进行重编程的潜力进行了评估。结果表明用密度梯度离心法分离猪骨髓间充质干细胞优于全骨髓贴壁法;猪骨髓间充质干细胞数目在培养第6天达到峰值,传代培养10h时,贴壁率达到78.50%;传代培养后第4天分裂指数最高,为24.00‰;以猪骨髓间充质干细胞(pMSCs)和猪胎儿成纤维细胞(PF)分别作为供核细胞构建核移植胚胎,其体外囊胚发育率分别为14.63%与15.07%(P>0.05),孤雌对照组囊胚发育率为30.91%(P<0.05);而三组囊胚细胞数分别为30.67±17.7、24.1±6.5和25.8±11.4(P>0.05)。实验表明,体外培养的猪骨髓间充质干细胞生长增殖旺盛,生物学性状稳定,并适合作为核移植供体细胞。

理论与实验整合授课在组织学与胚胎学教学中的应用

目的 探讨理论与实验整合授课在组织学与胚胎学教学中的应用效果.方法 随机选取哈尔滨医科大学2015级五年制临床医学专业180名学生为研究对象,将其平均分为实验组和对照组.实验组学生采用理论和实验整合的教学方法,对照组学生采用理论和实验分开授课的教学方法.通过对学生进行问卷调查和考试评价教学效果.结果 调查结果显示,在增加学习兴趣、培养独立思考能力、交流沟通能力和分析解决问题方面,实验组学生评价优于对照组学生,P＜0.05,具有统计学意义;在有助于知识掌握方面,两组学生评价结果相似,P＞0.05,差异无统计学意义.比较两组学生考试成绩,实验组学生的实验成绩高于对照组学生,P＜0.05,具有统计学意义;实验组与对照组学生的理论成绩的差异没有统计学意义,P＞0.05.结论 在组织学与胚胎学教学中,理论与实验整合授课优于理论和实验分开授课的教学方法.

抗人羧酸酯酶-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备鼠抗人羧酸酯酶-Ⅱ(humancarboxyles-terases-Ⅱ,hCE-Ⅱ)单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定。方法以含hCE-Ⅱ的人肝脏微粒体蛋白混合抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗hCE-Ⅱ的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb。用间接ELISA法测定mAb的效价,以Westernblot鉴定mAb的特异性、免疫组化染色法对mAb相应的抗原进行组织定位。用免疫沉淀和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtime-of-flightmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质量指纹谱(peptidemassfingerprint,PMF),再通过Mascot在人类蛋白质数据库中分析比对鉴定mAb对应的抗原。结果获得1株可持续、稳定分泌抗hCE-Ⅱ的mAb的杂交瘤细胞系。杂交瘤细胞分泌的mAbIg的亚类(型)为IgG1(κ),腹水mAb的效价达1×10-7。Westernblot分析显示,在Mr为62000处有1条清晰的带。免疫组化染色显示,该mAb可与肝细胞的浆蛋白结合(hCE-Ⅱ存在于肝细胞浆内微粒体),而不与血管平滑肌细胞内的蛋白结合。该mAb免疫沉淀物的Mr为62000,与hCE-Ⅱ的Mr相符。对免疫沉淀的蛋白质进行质谱鉴定证实,该mAb对应的抗原为hCE-Ⅱ。结论制备出的鼠抗hCE-Ⅱ的mAb效价高、特异性良好,为进一步研究hCE-Ⅱ的功能及其在肝癌等癌症的诊断和治疗中的作用提供了工具。

胎鼠脊髓神经干细胞分离方法的比较

目的:比较机械法和胰酶消化法对胎鼠脊髓源神经干细胞增殖分化的影响。方法:分别用机械法和胰酶消化法分离胎鼠脊髓组织获得神经干细胞,应用台盼蓝检测细胞成活率,用无血清培养技术培养神经干细胞,应用MTT法检测细胞分裂增殖能力,采用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞和分化细胞。结果:机械法获得的细胞数量多于胰酶消化法。细胞经过培养其增殖能力机械法略强于胰酶消化法,但无统计学意义。培养形成的细胞球Nestin阳性,诱导分化后可见NSE和GFAP阳性细胞。结论:运用机械法比胰酶消化法分离胎鼠脊髓组织获得神经干细胞方法简单,容易操作,经过培养细胞增殖能力较强。并可提供健康的细胞来源。

创建基础医学拔尖人才创新研究型教学模式探析

目的 建立基础医学拔尖人才创新研究型教学模式.方法 实施三个方面的教学改革,包括建立科学研究实践教学体系,强调早期深入的科研实践；改革理论教学体系,将PBL案例讨论和全英文教学融入其中；建立适应创新研究型教学模式的考核体系和管理体系.结果 学生的批判性思维、创新意识和科研能力得到提高,科技成果的数量和质量逐年上升.结论 创新研究型教学模式有利于培养具有创新和研究能力的高水平基础医学拔尖人才.

4-羟基他莫昔芬对前列腺基质细胞增殖与凋亡的作用

目的：研究4-羟基他莫昔芬（OHT）对原代培养的前列腺基质细胞增殖与凋亡的影响。方法：以10^-8-10^-5mol/L的雌二醇（E2）、己烯雌酚（DES）、OHT以及10^-8-10^-6mol/L的E2与10^-7mol/L的OHT混合物分别作用于原代培养的前列腺基质细胞,采用MTT法和TUNEL法分别检测细胞增殖和凋亡。结果：OHT对前列腺基质细胞增殖和凋亡的作用与E2和DES比较均有显著差异（P均〈0.05）,在10^-7-10^-5mol/L浓度下表现出与浓度相关（r=-0.383,P=0.005）的抑制增殖作用（P〈0.05）,10^-7mol/L的OHT可以抑制相同甚至更高浓度（10^-6mol/L）E2的促增殖作用（P〈0.05）;OHT在10^-8-10^-5mol/L浓度下显示与浓度相关（r=0.349,P=0.012）的促凋亡作用（P〈0.05）,且10^-7mol/L OHT的促凋亡作用不能被相同甚至更高浓度（10^-6mol/L）E2所逆转（P〉0.05）。结论：OHT在一定浓度范围内对原代培养的前列腺基质细胞具有明显的抑制增殖和促凋亡作用,该作用可能不完全是通过竞争性抑制雌激素受体而实现的。

大鼠FBC与几丁质、胶原蛋白及明胶海绵联合培养移植治疗脑损伤的实验研究

目的：评价大鼠胎脑神经细胞(FBC)与几丁质(Chitin)多孔体、胶原蛋白(Collagen Protein)海绵及明胶(Glutin)海绵的细胞相容性；研究几丁质和胶原蛋白与大鼠FBC复合体(C-FBC，CP-FBC)脑内移植对脑损伤的修复作用。为中枢神经系统(CNS)组织工程材料的选择提供实验依据。

视神经蛋白突变在肌萎缩侧索硬化症中的研究进展

视神经蛋白(OPTN)目前被认为是原发性开角型青光眼(POAG),肌萎缩侧索硬化症(ALS)等神经退行性疾病的病理学标记蛋白。OPTN参与不同的细胞功能,例如调控后高尔基体膜运输、分泌、胞内病原体自噬、抗病毒先天免疫反应、有丝分裂、核因子-κB(NF-κB)通路、基因表达等。在OPTN突变的ALS临床病例中,受损的运动神经元呈现出胞质内OPTN泛素化聚集改变,蛋白质包涵体形成以及与ALS相关病理蛋白铜锌超氧化物歧化酶1(SOD1)、反式激活-反应性DNA结合蛋白-43(TDP43)、肉瘤熔合基因(FUS)的共定位。本文着重阐述OPTN突变在肌萎缩侧索硬化症中的研究进展,探讨其致病机制、病理改变以及治疗方法。

异丙基肾上腺素致大鼠心肌损伤的超微结构及体视学研究

实验用Ｗｉｓｔａｒ大鼠３５只，体重２１０ｇ。异丙肾（ＩＳＰ）组２８只，皮下注射ＩＳＰ５．０ｍｇ／ｋｇ，注射后４、１２、２４和４８小时分别处死７只大鼠，随同处死对照组７只。光镜观察心肌坏死部位和程度；电镜观察心肌超微结构变化；用体视学方法定量分析心肌线粒体形态变化。结果表明：心肌线粒体Ｖｖ和Ｖ值升高，与对照组比较差异显著（Ｐ＜０．０１），ＮＡ和Ｎｖ值变化与对照组比较无显著差异（Ｐ＞０．０５）。实验表明线粒体Ｖｖ和Ｖ植升高主要与线粒体肿胀有关，与线粒体的集聚和增生无关；线粒体的损伤破坏与心肌坏死程度密切相关；并提示注射ＩＳＰ后４８小时是制作大鼠心肌坏死模型的最佳时间。

地塞米松对不同月龄雌性大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响

目的观察体外培养的不同月龄雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体水平的差异及地塞米松(1×10-8mol/L)对不同月龄雌性大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响。方法采用酶消化法分别提取、纯化和培养新生(24h以内)、2、4、8、12月龄雌性Wistar大鼠成骨细胞,并且用Western-blot、ECL法检测体外培养成骨细胞雌激素受体的水平。结果提取的大鼠成骨细胞生长情况良好,碱性磷酸酶染色阳性,具有成骨细胞特性。Western-blot结果显示:雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体水平在新生鼠和8月龄鼠较高,在2、4、12月龄鼠较低;地塞米松组成骨细胞雌激素受体表达水平在新生和2月龄低于对照组,在4、8、12月龄高于对照组。结论不同月龄雌性大鼠体外培养的成骨细胞雌激素受体的表达水平不同;1×10-8mol/L地塞米松对体外培养的雌性大鼠成骨细胞雌激素受体水平有影响且与大鼠的月龄有关。

Uhrf1在心肌缺血再灌注损伤中调节mTOR的H3K9me2抑制自噬的作用

表观遗传疗法为心肌缺血性疾病的临床治疗提供了个性化的方案和新的治疗方向。本研究探讨表观遗传因子Uhrf1在体内、外对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用机制,以及调控mTOR的H3K9me2继而影响自噬的独特分子机制。小鼠心脏左前降支结扎再释放的方法建立体内MIRI模型;以H2O2处理的小鼠心肌细胞为体外MIRI模型。qRT-PCR、Western blotting和免疫荧光分析表明,Uhrf1显著降低心肌细胞的凋亡,Bax和caspase-3表达水平均下降,Bcl-2表达水平增加。

小鼠植入前胚胎致密化与囊胚形成的分子调控

哺乳动物胚胎植入前的发育中致密化和囊胚形成分别标志着第一次、第二次细胞分化(即细胞命运决定)的起始,是胚胎正常发育的必要条件。因此对影响致密化和囊胚形成的蛋白及调节因子的研究尤为重要。本文探讨了与致密化相关的细胞黏附蛋白、连接蛋白、细胞骨架等分子和囊胚形成相关的紧密连接蛋白、钠钾三磷酸腺苷激酶等分子的一系列调控,以及致密化和囊胚形成在细胞命运决定中的重要作用。

基于小规模私有在线课堂的混合教学模式在组织学教学中的应用

目的探讨基于小规模私有在线课堂(small private online course, SPOC)的混合教学模式在组织学教学中的应用效果。方法采用实验对照方法。选取哈尔滨医科大学2016级和2017级五年制临床医学专业361名学生为研究对象。两个年级分别设立实验组和对照组进行独立研究。在组织学教学中,实验组学生采用基于SPOC的混合教学模式,对照组学生采用传统的理论和实验分开授课的教学模式。教学结束后比较两组学生考试成绩和问卷调查以评价教学效果,并通过教师座谈评价实施效果。结果每个年级的实验组与对照组学生的考试成绩差异无统计学意义(均P>0.05)。问卷调查结果显示,在增加学习兴趣、培养学习自主性、交流沟通能力和分析解决问题方面,两个年级的实验组学生均优于对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。两个年级的实验组学生对基于SPOC的混合教学模式的满意度达到97%以上。教师认为基于SPOC的混合教学模式在提高师生关系、教学兴趣、职业自豪感等方面效果显著。结论在组织学教学中,基于SPOC的混合教学模式优于传统授课模式。

小鼠胚胎第一次细胞命运决定的分子调控机制

着床前小鼠的发育过程中,随着囊胚的形成,胚胎建立了两个不同的细胞系:滋养外胚层(TE)和内细胞团(ICM),且发生两次重要的命运选择。主要回顾了两个经典发育模式,即内外模式(inside-outsidemodel)和极性模式(polarity model),总结了TE和ICM第一次谱系分离过程中起关键作用的分子调控机制,并探讨了存在于卵裂球间的分子差异,对细胞极性、细胞命运和分子调节之间存在的复杂联系也进行了讨论。

TDP-43在神经退行性疾病中的功能和作用

核蛋白TAR DNA/RNA结合蛋43(TDP-43)目前被认为是肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)、额颞叶变性(frontotemporal lobar degeneration,FTLD)等神经退行性疾病的病理学标记蛋白。在中枢神经系统中,TDP-43作为必要的转录调控因子,参与mRNA前体的剪接,维持RNA稳态和运输。在突变和过表达TDP-43的转基因啮齿类动物模型中,受损伤的神经元呈现出胞核和胞质中TDP-43泛素化、磷酸化聚集,以及细胞周期进程的改变。在此,着重阐述基于TDP-43突变或过表达建立神经退行性疾病动物模型的研究进展,探讨其发病机制、病理学改变及治疗方法。

Daxx在细胞凋亡和转录调控中的作用

Daxx是一种高度保守的多功能性核蛋白,可与早幼粒细胞白血病蛋白(PML)相互作用共定位于PML癌基因区域(PODs),并与PML共同参与PODs球形结构的形成、维持及其他蛋白的募集。另外,Daxx兼有凋亡与抗凋亡,转录抑制与激活作用,但这种双重作用的机制目前还尚未明确。本文重点探讨Daxx在细胞凋亡与转录调控中的功能和作用,以期更好地理解Daxx发挥其双重作用的机制。

SIRT1在年龄相关性白内障中的研究进展

SIRT1是一种依赖于烟酰胺腺苷二核苷酸高度保守的去乙酰化酶,通过去乙酰化底物蛋白调控基因表达、应激反应、代谢、衰老和凋亡等过程。其中,SIRT1的抑制细胞凋亡、延缓细胞衰老的作用,与代谢疾病、心血管疾病、神经退行性疾病和年龄相关性白内障等一些年龄相关性疾病发病机理有密切联系。活性氧在晶状体上皮细胞中积聚,引起氧化应激和细胞凋亡,是年龄相关性白内障发病的重要原因。SIRT1通过调节其下游的蛋白质表达,抵抗氧化应激,减少晶状体上皮细胞的凋亡,阻止年龄相关性白内障的发展。