力竭运动对大鼠凝血状态的影响

目的:探究一次性力竭运动对大鼠凝血状态的影响及其机制。方法:48只SD大鼠随机分为对照组和力竭运动组,每组24只。力竭运动组大鼠采用无坡度跑台进行一次性跑台训练25~50 min,以5 m/min的初始速度匀加速运动至25 m/min,直至大鼠力竭。训练结束后利用血栓弹力图监测大鼠凝血功能;建立下腔静脉结扎模型评估血栓形成倾向;流式细胞术检测磷脂酰丝氨酸(PS)外翻和Ca^(2+)浓度;酶标仪检测FXa和凝血酶生成;血凝仪检测凝血时间。结果:与对照组比较,力竭运动组大鼠血液呈高凝状态,血栓形成几率、重量、长度及其比值均明显升高(P<0.01),大鼠红细胞和血小板PS外翻水平均明显升高(P<0.01),且细胞内Ca^(2+)浓度明显升高(P<0.01),大鼠红细胞和血小板凝血时间明显缩短(P<0.01),FXa和凝血酶生成明显升高(P<0.01),且均可被乳粘素(Lact)抑制(P<0.01)。结论:力竭运动大鼠血液呈高凝状态,血栓形成风险增高,力竭运动导致的Ca^(2+)依赖的红细胞及血小板PS外翻增多可能是其血栓形成的重要机制。

小檗碱对力竭运动诱导的大鼠心肌损伤具有保护作用

目的探讨小檗碱对力竭运动诱导的大鼠心肌损伤的影响及其机制。方法健康雄性SPF级Sprague-Dawley大鼠40只,采用随机区组设计法将大鼠分为5组,即对照组、力竭运动组、低剂量小檗碱组(50 mg·kg-1·d-1)、中剂量小檗碱组(100 mg·kg-1·d-1)和高剂量小檗碱组(150 mg·kg-1·d-1)。不同剂量小檗碱组大鼠分别灌胃相应浓度的小檗碱溶液1.5 ml·d-1·只-1,对照组和力竭运动组大鼠灌胃同体积的生理盐水;灌胃30 min后各组大鼠分别进行力竭游泳训练(对照组大鼠不运动)。共灌胃14 d,每天进行1次力竭游泳训练。采用小动物超声成像系统检测大鼠心功能指标[左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室射血分数(LVEF)、左心室收缩期直径(LVIDs)、左心室舒张期直径(LVIDd)]。苏木素伊红(HE)和Masson染色检测大鼠心肌形态结构。酶联免疫吸附法检测大鼠心肌组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。TUNEL染色法检测大鼠心肌细胞凋亡情况。Western blot法检测大鼠心肌组织中心肌肥厚标志蛋白B型利钠肽(BNP)和凋亡标志蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果(1)各组大鼠的心功能:力竭运动组大鼠LVFS和LVEF均明显低于对照组,LVIDs和LVIDd均明显大于对照组(P均<0.01)。而中剂量小檗碱组和高剂量小檗碱大鼠的LVFS和LVEF则均明显高于力竭运动组,LVIDs和LVIDd均明显小于力竭运动组(P均<0.01)。(2)各组大鼠的心肌结构:HE染色结果显示,对照组大鼠心肌细胞排列紧密、规则,形态正常,结构清晰,染色均匀。力竭运动组大鼠心肌细胞排列紊乱,细胞染色不均匀,细胞质中出现空泡。中剂量小檗碱组大鼠心肌细胞排列紊乱及染色不均等情况均较力竭运动组轻。Masson染色结果显示,对照组大鼠心肌细胞排列紧密、规则,形态正常,结构清晰,出现很少蓝染(纤维化)。力竭运动组大鼠心肌细胞出现明显纤维化。中剂量小檗碱组大鼠心肌细胞纤维化程度则明显较力竭运动组轻。(3)各组大鼠心肌组织中MDA含量和SOD活性:力竭运动组大鼠心肌组织中MDA含量明显高于对照组,中剂量小檗碱组大鼠心肌组织中MDA含量则明显低于力竭运动组(P均<0.01)。力竭运动组大鼠心肌组织SOD活性明显低于对照组,中剂量小檗碱组大鼠心肌组织SOD活性则明显高于力竭运动组(P均<0.01)。(4)各组大鼠心肌细胞凋亡情况:TUNEL染色结果显示,对照组大鼠仅可见少量凋亡心肌细胞,力竭运动组大鼠则可见大量凋亡心肌细胞,而中剂量小檗碱组大鼠凋亡心肌细胞数明显少于力竭运动组。力竭运动组大鼠心肌细胞凋亡指数为39.02%明显高于对照组的2.76%(P<0.01),而中剂量小檗碱组大鼠心肌细胞凋亡指数为20.23%明显低于力竭运动组(P<0.01)。(5)各组大鼠心肌组织中BNP、Bcl-2和Bax的蛋白表达水平:力竭运动组大鼠心肌组织中BNP蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.01),中剂量小檗碱组则明显低于力竭运动组(P<0.01)。力竭运动组大鼠心肌组织中Bax蛋白表达水平明显高于对照组,Bcl-2蛋白表达水平明显低于对照组(P均<0.01)。中剂量小檗碱组大鼠心肌组织中Bax蛋白表达水平则明显低于力竭运动组,Bcl-2蛋白表达水平明显高于力竭运动组(P均<0.01)。结论小檗碱可抑制力竭运动诱导的大鼠心肌损伤,其机制可能与抑制力竭运动诱导的自由基释放和凋亡有关。

跑台运动对孤独症大鼠空间学习和记忆能力的影响

目的探讨跑台运动对孤独症大鼠空间学习和记忆能力的影响及其作用机制。方法选择正常Wistar大鼠10只作为对照组，丙戊酸钠（VPA）诱导的孤独症模型大鼠20只按照随机数字表法分为模型组和训练组。训练组大鼠进行4周跑台运动，对照组和模型组仅置于跑台上但不转动跑台。训练结束采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力，随后处死大鼠取海马组织检测氧化应激相关指标。采用Nissle染色和神经元核抗原（NeuN）免疫组化染色检测海马神经元形态和表型，采用Western blotting检测相关蛋白的表达。结果（1）Morris水迷宫实验第2-4天，与模型组大鼠比较，训练组大鼠逃避潜伏期明显缩短，穿越平台次数明显增多，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（2）Nissl染色结果显示，与模型组大鼠比较，训练组大鼠海马CA1区正常神经元数量明显增多，差异有统计学意义（P〈0．05）。（3）NeuN免疫组化染色结果显示，模型组大鼠NeuN阳性细胞数量显著少于对照组，训练组NeuN阳性细胞数量显著多于模型组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（4）酶活性测定及Western blotting结果显示．训练组大鼠海马组织丙二醛（MDA）活性下降。谷胱甘肽（GSH）活性显著增加，超氧化物歧化酶（SOD）N谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）活性显著增强，与模型组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。训练组大鼠B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、脑源性神经营养因子（BDNF）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）／Akt、磷酸化钙离子相关蛋白a亚型钙调蛋白激酶2（p-CaMKⅡ）／CaMKⅡ和磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白（p-CREB）／CREB均明显上调，Bcl-2相关X蛋白（Bax）和半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）均明显下调，与模型组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论跑台运动能够提高孤独症大鼠的空间学习和记忆能力，其机制可能与跑台运动增强了海马神经元的抗凋亡及抗氧化作用有关。

游泳康复训练通过钙调蛋白激酶Ⅱ对脑缺血再灌注沙鼠学习记忆功能的影响

目的探讨游泳康复训练对脑缺血再灌注沙鼠学习记忆功能障碍的保护作用及其机制。方法按随机数表法将40只成年健康雄性沙鼠随机分为假手术组(Sham组)、假手术+游泳组(Sham+S组)、脑缺血/再灌注组(I/R组)、脑缺血/再灌注+游泳组(I/R+S组),每组10只。I/R组和I/R+S组采用颈总动脉双侧血管阻断构建脑缺血/再灌注的沙鼠模型;Sham组和Sham+S组只暴露双侧颈总动脉,但不行动脉夹闭。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能改变;应用检测试剂盒分析检测海马神经元氧化应激损伤情况;利用Western blot技术检测海马组织Bax、Bcl-2和CaMKⅡ蛋白表达变化。结果与Sham组相比,I/R组定位巡航时间延长、穿梭次数减少,差异具有统计学意义(P<0.01);I/R+S组与I/R组相比,定位巡航时间明显缩短、穿梭次数明显增加(P<0.01)。与Sham组[SOD:(123.13±7.50)U/mg,GSH:(42.10±2.17)μg/g,GSH-Px:(61.37±2.51)μg/g,MDA:(2.91±0.23)nmol/mg]相比,I/R组SOD、GSH、GSH-Px活性明显降低,MDA含量明显增加[SOD:(75.50±6.96)U/mg,GSH:(22.50±1.64)μg/g,GSH-Px:(33.15±2.04)μg/g,MDA:(5.96±0.32)nmol/mg];与I/R组相比,I/R+S组上述变化明显逆转[SOD:(110.30±5.90)U/mg,GSH:(34.31±1.73)μg/g,GSH-Px:(50.13±2.31)μg/g,MDA:(3.54±0.29)nmol/mg],均差异具有统计学意义(均P<0.01)。与Sham组相比,I/R组沙鼠海马组织Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白和p-CaMKⅡ蛋白表达降低,均差异具有统计学意义(均P<0.05);与I/R组相比,I/R+S组沙鼠海马组织Bax蛋白表达下降,Bcl-2蛋白和p-CaMKⅡ蛋白表达升高,均差异有统计学意义(均P<0.05)。结论游泳康复训练可通过抗氧化应激和抗凋亡改善沙鼠缺血再灌注所致的学习记忆障碍,此作用可能与CaMKⅡ信号通路有关。