医学检验本科实践能力评价体系的建立与研究

为加强我校医学检验专业本科生的实践能力,我们对我校2003级医学检验本科生的实践技能考核和课间实习状况进行了问卷调查和分析,结果显示,实习医院对学生的总体评价良好。通过实习医院对我校医学检验本科生在理论应用、实践操作、独立工作和创新能力等方面的综合评价,建立实践技能评价体系,为今后的教学改革提供重要的参考依据。

医学检验专业实践教学改革与毕业生质量评价

寻求医学检验专业教学改革新方案。方法：以我校检验专业2000、2001届毕业生为对照组,以2002、2003届毕业生为实验组,对实验组进行实践教学改革。毕业前分别进行综合实践技能考核,并对部分毕业生进行了追踪调查。结果：实验组的技能考核成绩明显高于对照组,毕业生质量明显提高。结论：实践教学改革有利于提高医学检验专业教学质量。

构建一体化多层次开放式医学检验实验中心

实验室在医学检验专业教学中具有不可替代的重要地位。加强医学检验实验室建设,改革实验室管理体制,改革实验教学内容,转变实验室运行模式,是新时期人才培养的需要。为适应学科的发展,我校对实验室进行了大刀阔斧地改革,成立了医学检验实验中心。构建了一体化、多层次、开放式运行模式,充分发挥了实验中心实验教学基地、科研基地、检验技术研发基地的作用。

关于现代检验医学发展与前景的探讨

现代检验医学是临床各学科中非常重要的一门辅助性诊断学科。文章对检验医学的发展、面临的问题进行了系统分析,并对检验医学的未来提出了设想,旨在提高对检验医学的认识,加强检验医学在临床疾病诊断中的重要性。

齐墩果酸对K562细胞系VEGF表达影响的实验研究

目的观察齐墩果酸(Oleanolic Acid,OA)对慢性粒细胞白血病系K562细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法采用MTT实验观察OA对体外培养K562细胞增殖抑制作用,用RT-PCR以及Western印迹法研究OA处理后K562细胞中VEGF基因表达的变化。并用ELISA方法检测培养液中VEGF的表达。结果OA能抑制K562细胞生长,呈一定的量效特征;并能抑制K562细胞中VEGF的表达。结论OA通过下调VEGF表达,抑制白血病细胞的增殖。

大学生创新能力培养教学模式探讨

培养具有创新能力的人才,已成为高等教育的主题。课堂教学是提高大学生创新能力的主渠道和主阵地。针对大学生创新能力的构成要素:知识、能力和品质,提出课堂教学中提高大学生创新能力的几点建议:转变教学思想、更新教学内容、改革教学方法、优化教学手段、强化教学管理以及完善考核制度。

肿瘤抑素相关肽T42肽的纯化及抗肝癌细胞Hepg2活性的测定

目的:利用已成功构建的肿瘤抑素相关活性肽T42肽高效表达基因工程重组菌pTYB2-T42,提取纯化T42肽,检测其抗肿瘤活性,为研究T42肽抗肿瘤作用机制及新型抗肿瘤药物研发提供实验基础。方法:将pTYB2-T42大肠杆菌进行培养,IPTG诱导其产生融合蛋白,经几丁质柱亲和层析得到目的蛋白,葡聚糖凝胶G15去除DTT干扰,TricineSDS-PAGE鉴定T42肽,紫外分光光度法检测其浓度。MTT检测T42肽对细胞的生长增殖抑制作用,AO/EB荧光染色检测细胞凋亡形态学变化。结果:提取的T42肽其相对分子质量在5000左右,与理论值4600一致。MTT实验结果显示:T42肽作用下Hepg2细胞生长增殖受到抑制,且随着T42肽浓度的增加,Hepg2细胞存活率逐渐下降,其半数抑制浓度(IC50)为30mmol.L-1;AO/EB荧光染色结果表明:经过30mmol.L-1T42肽作用24h后的Hepg2细胞表现出细胞皱缩呈圆形或卵圆形,核皱缩变形且胞膜受损等一系列细胞凋亡特征性的形态变化。结论:T42肽具有显著的抗肿瘤细胞活性,可明显抑制人肝癌细胞Hepg2的生长增殖,并促进其凋亡。

大豆异黄酮对青年雌性大鼠卵巢、子宫组织中Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达的影响

目的:通过动物实验研究,观察Bcl-2 mRNA和Bax mRNA在青年雌性大鼠卵巢和子宫组织中的表达情况,从细胞凋亡角度研究大豆异黄酮对青年雌性大鼠的抗衰老作用。方法:选用2月龄青年雌性大鼠50只,按体质量分成5组,每组10只,分别为对照组(基础饲料)、低剂量组(大豆异黄酮100mg/(kgbw·d))、中剂量组(大豆异黄酮200mg/(kgbw·d))、高剂量组(大豆异黄酮300mg/(kgbw·d))、雌激素组(己烯雌酚0.5mg/kg饲料),实验周期7周。采用原位杂交法检测各组大鼠卵巢和子宫组织中Bcl-2 mRNA和Bax mRNA的表达水平。结果:大豆异黄酮能够增强大鼠卵巢和子宫组织中Bcl-2 mRNA的表达水平;而各剂量组大鼠卵巢和子宫组织中Bax mRNA水平呈下降趋势。结论:大豆异黄酮可以增强抗凋亡基因Bcl-2mRNA,拮抗促凋亡基因Bax mRNA的水平,推测这是大豆异黄酮对青年雌性大鼠发挥抗衰老作用的途径之一。

变应性鼻炎患者IL-13、IFN-γ与IgE的相关性

目的:探讨IL-13、IFN-γ水平对变应性鼻炎IgE合成的调节作用。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定28例变应性鼻炎患者(鼻炎组)和28例健康人(对照组)的血清中IL-13、IFN-γ及IgE的水平,并对变应性鼻炎患者的IgE分别与IL-13、IFN-γ作相关性研究。结果:鼻炎组患者血清中的IL-13水平显著高于对照组,而IFN-γ水平却显著低于对照组。IgE水平与IL-13浓度呈正相关,而与IFN-γ浓度呈负相关,r分别为0.712和-0.653(均P<0.01)。结论:变应性鼻炎患者体内IgE升高与IL-13分泌过多及IFN-γ分泌受抑制有关。

肿瘤抑素相关肽T42对人脐静脉内皮细胞和人胃腺癌细胞的抑制作用

目的:观察大肠杆菌内表达的pTYB2-T42重组质粒经纯化后获得的肿瘤抑素相关肽T42,在体外对人脐静脉内皮细胞及肿瘤细胞的抑制作用。方法:实验于2006-06/11在哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室完成。在大肠杆菌中表达肿瘤抑素相关T42肽并用几丁质亲和层析纯化。采用四甲基偶氮唑盐比色法研究10～200mg/L肿瘤抑素相关肽T42、T19、T21、T19+T21半量联合和顺铂对人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞生长的影响,采用苏木精-伊红染色检测40mg/LT42肽作用24h后对细胞形态的影响,划痕修复实验研究40mg/LT42肽和40mg/L的T19肽+T21肽半量联合分别作用24,48h后对细胞迁移的影响。结果:①四甲基偶氮唑盐试验表明10～200mg/LT42肽对人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞有明显抑制作用且呈剂量依赖性,IC50分别为45mg/L和51mg/L。②40mg/LT42肽作用24h后可见人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃癌细胞单个凋亡细胞与周围细胞分离,细胞皱缩呈圆形或卵圆,深染,染色质边集。③40mg/L的T42肽单独作用24h或者48h均可明显抑制人脐静脉内皮细胞、人SGC-7901胃癌细胞的迁移(P<0.05),与40mg/L的T19肽+T21肽半量联合组比较对两种细胞的迁移能力没有显著影响(P>0.05)。结论:T42肽能抑制人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞的生长及迁移,其抗肿瘤细胞作用强于T21肽,抑制内皮细胞增殖作用强于T19肽,抑制细胞增殖活性与T19肽+T21肽半量联合用药基本相同。

山核桃树枝水煎剂的抑瘤作用及其对S_(180)荷瘤小鼠IL-2和IL-4影响的实验研究

目的:探讨山核桃树枝水煎剂(DJM)的抑瘤作用及其对S180荷瘤小鼠外周血白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-4(IL-4)水平的影响。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法检测荷瘤鼠外周血IL-2和IL-4的水平。结果:DJM对荷瘤鼠的抑瘤率为35.68%,DJM对荷瘤鼠外周血IL-2水平较模型组明显升高(P<0.01),IL-4水平较模型组降低(P<0.05)。结论:DJM对S180荷瘤小鼠肿瘤组织的生长具有明显的抑制作用;DJM可通过提高荷瘤小鼠外周血IL-2水平,降低IL-4水平来逆转Th1/Th2漂移,发挥抗肿瘤作用。

黄芪、赤芍对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:探讨黄芪、赤芍注射液对卡介苗(Bacillus Calmette Guerin,BCG)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤模型的保护作用。方法:采用静脉注射BCG和LPS制备小鼠免疫性肝损伤模型,观察黄芪、赤芍注射液单用及两药配伍对小鼠免疫性肝损伤的影响,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)及小鼠肝组织超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量。结果:黄芪、赤芍注射液及二者配伍应用均显著降低免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST、LDH含量,明显提高肝组织SOD活性,降低MDA活性,配伍用药的小鼠ALT、AST、LDH、SOD、MDA五项指标变化均优于黄芪注射液单用(P<0.05、P<0.05、P<0.05、P<0.01、P>0.05)、优于赤芍注射液单用(P<0.01、P>0.05、P<0.05、P<0.01、P<0.05)。结论:黄芪、赤芍注射液对BCG和LPS所致免疫性肝损伤有保护性作用,黄芪注射液配伍赤芍注射液对免疫性肝损伤保护性作用优于两药单用。

黄芪、赤芍及黄芪赤芍合剂对免疫性肝损伤模型小鼠血清IL-6、IL-8水平的影响

目的观察黄芪赤芍合剂对免疫性肝损伤模型小鼠血清白细胞介素(IL)-6、IL-8水平的影响。方法以卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)构建免疫性肝损伤小鼠模型。将小鼠随机分为正常组、模型组、黄芪组、赤芍组、黄芪赤芍合剂组,正常组未接受任何处理,其余各组分别经生理盐水、黄芪提取物、赤芍提取物和黄芪赤芍合剂处理后测定血清IL-6、IL-8含量。结果模型组小鼠血清IL-6、IL-8含量高于正常组(P<0.05),黄芪组、赤芍组及黄芪赤芍合剂组小鼠血清中IL-6、IL-8含量顺次降低(P<0.05)。结论黄芪赤芍合剂比黄芪或赤芍单独用药能更明显地降低免疫性肝损伤小鼠模型血清IL-6、IL-8含量;监测接受黄芪或赤芍治疗的肝脏疾病患者血清IL-6、IL-8水平有助于合理用药、疗效观察及预后判断。

Caspase-3在牛膝多糖诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用

为研究牛膝多糖对肝癌BEL-7402细胞凋亡及相关蛋白Caspase-3表达的作用,采用不同浓度ABPS作用于肝癌BEL-7402细胞48h,MTT法检测细胞生长抑制率,荧光显微镜观察细胞形态变化,Western Blot检测Caspase-3蛋白表达.实验结果表明,ABPS对BEL-7402细胞具有生长抑制作用,促进细胞凋亡,作用机制可能与上调Caspase-3蛋白表达有关.

血浆蛋白质Z及凝血4项检测在2型糖尿病并发症早期诊断中的意义

目的研究血浆蛋白质Z(PZ)及凝血4项(PT、APTT、TT、Fg)在2型糖尿病及血管并发症中的变化,并探讨其临床意义。方法以30例健康人为正常对照组,随机选择2型糖尿病患者60例,将其分为有血管并发症组(30例)和无血管并发症组(30例),PZ用ELISA法检测,试剂盒由法国Stago公司提供,在Moded680酶标仪上扫描测定。用美国Coulter公司ACL Futura全自动血凝分析仪及配套试剂检测凝血4项,血糖采用Beckman公司全自动生化分析仪检测。结果 糖尿病组PZ水平明显低于对照组(P值<0.001),在糖尿病组中有血管并发症组的PZ水平明显低于无并发症组(P值<0.01),PT、APTT、Fg在糖尿病无血管并发症组与对照组比较有差别(P值<0.05),有并发症组与无并发症组比较有差别(P<0.01),TT在各组之间均无显著差别(P值>0.05),PZ与血糖水平在健康人和患者中均有明显负相关(P均<0.001)。结论血栓形成在2型糖尿病血管并发症的发生发展中起着重要的作用,定期检查糖尿病患者血浆中PZ水平及凝血4项对于及早发现高凝倾向,进而加以预防和治疗并发症具有一定的参考价值。

鞘磷脂水解产物对结肠癌细胞中碱性鞘磷脂酶的影响

背景与目的:碱性鞘磷脂酶(alk-SMase)是鞘磷脂(SM)新陈代谢和发挥抑制结肠癌作用的关键酶。通过体外实验探讨SM的水解产物的神经酰胺(Cer)和鞘氨醇(Sph)对人结肠癌细胞HT-29中alk-SMase表达的影响。材料与方法:分别用12.5、25、50μmol/L的C2-Cer和Sph处理HT-29细胞12、24、48 h后,分别用Western blot法和RT-PCR检测细胞中alk-SMase的蛋白水平和mRNA表达水平的变化。实验并设DMSO溶剂对照组。结果:C2-Cer和Sph作用HT-29细胞后,其alk-SMase蛋白及其mRNA的表达下调。结论:Cer和Sph对HT-29细胞中alk-SMase的表达具有负反馈调节作用。

肠出血型大肠埃希菌免疫PCR检测方法的建立

目的建立检测肠出血型大肠埃希菌O157:H7的免疫PCR技术,确定该方法的灵敏度和特异性。方法链亲和素桥联生物素化的二抗和双链DNA指示分子,构建桥联系统,进而建立免疫PCR技术,通过PCR扩增指示分子检测O157:H7。结果免疫-PCR技术最少可检测到10 CFU/ml的纯培养菌,灵敏度较ELISA提高103倍,非O157:H7菌株检测结果均为阴性。结论免疫-PCR技术具有较高的灵敏度和特异性,操作简便、快速,可作为肠出血型大肠埃希菌O157:H7的检测方法。

案例教学法在临床实验室管理学教学中的应用

随着临床实验室管理学在医学检验专业学科中的地位提高，其针对学生的教学方法的研究也愈加重要。选用案例教学法不但能使学生熟练掌握实验室管理学中的基础知识，而且能提高学生作为实验室工作人员或管理人员的各种素质。