巨噬细胞对小鼠诱导多能干细胞向肝祖细胞分化的影响

目的探讨巨噬细胞(Mc)对小鼠诱导多能干细胞(iPSCs)向肝祖细胞(HPCs)分化的影响。方法C57BL/6N小鼠24只,采取腹腔冲洗法获得巨噬细胞,收集上清获得巨噬细胞条件培养基(Mc-CDM)。通过激活素A、骨形态发生蛋白4和成纤维细胞生长因子等诱导小鼠iPSCs向HPCs分化。将HPCs的诱导分为两组,一组使用正常培养基,为对照组(Ctrl组);另一组在诱导D5使用Mc-CDM培养基,为实验组(Mc组)。通过形态学、免疫荧光、Western Blot检测方法,比较正常Ctrl组与Mc组HPCs的形态及相关蛋白表达的差异。计量资料两组间比较采用t检验。结果在体外建立了iPSCs来源的HPCs;HPCs具有向肝细胞分化的潜能。免疫荧光结果显示:与第12天的Ctrl组相比,第12天的Mc组的肝祖细胞特异性蛋白CK19的表达显著增高(0.901±0.072 vs 0.686±0.097,t=-3.093,P<0.05);Western Blot结果显示:与第12天Ctrl组相比,第12天Mc组肝祖细胞相关蛋白CK19的表达显著增高(1.922±0.103 vs 1.448±0.012,t=-7.881,P<0.05);同时,第12天Mc组自噬相关蛋白LC3的表达亦显著增高(1.392±0.042 vs 1.101±0.048,t=-5.978,P<0.05)。结论巨噬细胞可促进小鼠iPSCs向HPCs分化,其机制可能与HPCs细胞自噬水平增加有关。

以“三个能力”培养为目标的医学形态学教学改革

针对我国高等医学教育的改革目标是培养学生的实践能力、创新能力和可持续发展能力要求,我校在医学检验（病理检验方向）本科等专业进行了多学科的“以系统为中心”的基础医学理论和实验教学法,及病理学的“案例”教学法、“三明治”教学法和“PBL”教学法等教学改革实践数年,还对感兴趣的学生在课外进行了研究性课题的指导,连续几届数名学生在全国机能实验设计大赛中获得了好成绩,在激发学生学习兴趣,

GFP-Kdm6a表达载体的构建及鉴定

目的构建及鉴定GFP-Kdm6a表达载体。方法提取基因背景为B6D2F1的ES总RNA,逆转录合成cDNA,经PCR扩增获得Kdm6a基因,与双酶切的GFP-C1质粒连接,经转化及测序鉴定GFP-Kdm6a载体构建成功。将构建好的GFP-Kdm6a载体转染入293T细胞,检测载体的表达情况。结果经琼脂糖凝胶电泳,获得目的基因Kdm6a条带。基因测序证实所检测重组质粒序列与Kdm6a基因序列完全一致。经转染的293T细胞检测到GFP-Kdm6a表达。结论克隆B6D2F1鼠Kdm6a基因、获得成功GFP-Kdm6a重组质粒的构建,在293T细胞呈阳性表达。