内皮抑素治疗人喉癌裸鼠模型的实验研究

目的 研究内皮抑素对裸鼠喉鳞状细胞癌皮下移植模型的抑瘤作用,探讨其抑瘤机制及人喉癌生物治疗新方法。方法 建立人喉癌Hep-Ⅱ细胞株裸鼠皮下接种模型。应用内皮抑素治疗,观察肿瘤生长情况,对用药后肿瘤组织进行病理学检查,通用型二步法免疫组化检查及电镜观察。计数微血管密度(microvessel density,MVD),计算增殖细胞核抗原(proliferationg cell nuclear antigen,PCNA)和血管内皮生长因子(vascuoar endothelial growth factor,VEGF)阳性率。结果 在实验组与对照组之间,鼠净重、瘤重、瘤体积及瘤重/鼠净重,经t检验P值<0.05或<0.01,差异均有显著性意义,抑瘤率为45.9％。病理学检查及电镜观察表明,实验组应用内皮抑素治疗肿瘤生长受到抑制,细胞分裂少见,可见肿瘤细胞的坏死凋亡,新生血管明显减少。MVD、PCNA及VEGF表达在实验组明显低于对照组,经t检验P值分别为<0.01、<0.05、<0.05,差异均有显著性意义。结论 内皮抑素可显著抑制人喉癌裸鼠模型肿瘤的生长和发展,其可能机制为抑制肿瘤血管生成。

槲皮素抗阿霉素诱导的培养心肌细胞的凋亡

目的观察槲皮素对阿霉素(adriamycin,ADR)致大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法原代培养乳鼠心肌细胞,随机分为正常对照组、阿霉素损伤组、槲皮素对照组、阿霉素+槲皮素(低、中、高浓度)组。比色法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,MTT法测定心肌细胞存活率,电镜观察细胞超微结构,免疫细胞化学法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达,用RT-PCR和Western blot检测caspase-3 mRNA和蛋白的表达。结果与正常对照组相比,槲皮素对照组各指标无明显改变,阿霉素组LDH活性增强,细胞存活率降低,Bcl-2表达减少,Bax表达增加,心肌细胞超微结构损伤明显,caspase-3 mRNA和蛋白的表达均升高;高中低剂量槲皮素均可减轻阿霉素所致的损伤。结论槲皮素对ADR致培养心肌细胞凋亡具有保护作用,其机制与调节细胞内凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2和Bax的表达有关。

肌肽和SOD对自由基清除作用的比较

肌肽和ＳＯＤ对自由基清除作用的比较王爱民，董军，王保安，马波，范业鹏，王剑（哈尔滨医科大学生化教研室，哈尔滨１５００８６）化学发光法做为一种重要的检测手段近年来在生化、免疫及医学领域中得到了广泛应用，特别是借助于化学发光增强剂鲁米诺（Ｌｕｍｉｎｏｌ）...

血红素加氧酶-1中第39位赖氨酸对电子传递功能的影响

目的验证血红素加氧酶－１（ＨＯ－１）中的第３９位赖氨酸（Ｋ３９）对电子传递的影响。方法通过定点诱变将Ｋ３９置换为酸性氨基酸谷氨酸（Ｅ），并将得到的变异型酶基因克隆到高度表达的载体上表达，提纯变异型ＨＯ，测定其活性，比较变异型酶与野生型酶的活性区别，以了解高保守的碱性氨基酸Ｋ３９对电子传递的影响。结果 ＨＯ催化血红素的体外反应，由抗坏血酸提供电子时，变异型酶Ｋ３９Ｅ与野生型酶比较活性没有显著性差异；而ＨＯ催化血红素的模拟体内反应，由ＮＡＤＰＨ－细胞色素Ｐ４５０还原酶提供电子时，变异型酶Ｋ３９Ｅ与野生型酶相比活性有显著性差异。结论 ＨＯ的碱性氨基酸Ｋ３９在接受并传递ＮＡＤＰＨ－细胞色素Ｐ４５０所提供的电子时具有重要作用。

大鼠心肌多巴胺受体在缺氧-复氧时的表达变化及其意义

目的:观察大鼠心肌多巴胺受体在缺氧-复氧时的表达,初步探讨其与心肌缺氧-复氧损伤的关系。方法:采用Langendorff离体灌流装置复制大鼠心肌缺氧-复氧模型。用RT-PCR和Western blotting结合图像分析系统,分别检测缺氧-复氧心肌多巴胺受体DR1、DR2mRNA和蛋白质的表达变化;用紫外分光光度计测定大鼠冠脉流出液中LDH活性;透射电镜观察心肌超微结构的变化。结果:大鼠心肌组织在缺氧40min时的DR1、DR2mRNA和蛋白表达高于正常对照组(P<0.05),缺氧40min后复氧1h显著高于正常对照组(P<0.01),2h达高峰,3h、4h后降低,但仍高于正常组(P<0.01);同时随复氧时间延长,冠脉流出液中LDH活性增加,心肌超微结构损伤加重。结论:大鼠心肌多巴胺受体DR1、DR2表达在缺氧-复氧过程中呈先升高后降低的特点,可能参与心肌缺氧-复氧损伤的发生。

谷氧还蛋白的生物学活性及其与人类疾病的关系

谷氧还蛋白(glutaredoxin,Grx),又称巯基转移酶(thioltransferase,TTase),是巯基-二硫键氧化还原酶家族的重要组分。Grx最早由Holmgren发现,在生物界普遍存在,是一种依赖谷胱甘肽(GSH)催化氧化状态的蛋白质二硫键还原为巯基,修复蛋白质活性的小分子酶蛋白。它具有多种生物学活性,在调节机体的氧化还原反应和细胞生长、抑制凋亡方面起重要作用,与人类某些疾病,如心脑血管疾病、白内障、糖尿病、AIDS、自身免疫性疾病、肿瘤和感染等的发生、发展,以及干预治疗有关。

大鼠卵泡发育过程中基质金属蛋白酶-2,-9的作用

目的 探讨基质金属蛋白酶 2 , 9(MMP 2 , 9)在大鼠卵泡发育的组织重建中的作用。方法 采用原位杂交方法检测动情周期大鼠卵泡中MMP 2 , 9mRNAs的基因表达变化 ,并通过密度扫描方法对原位杂交结果进行半定量分析。结果 在动情周期中 ,各情期卵巢中卵泡的颗粒细胞和发育良好的卵泡的膜细胞中均可检测到MMP 2mRNA的杂交信号 ;MMP 9mRNA的表达始于已发育良好的窦前卵泡的膜细胞 ,此后在小窦状卵泡、窦状卵泡及排卵前卵泡的膜细胞中均检测到MMP 9mRNA的杂交信号。结论 MMP 2 ,

凝胶过滤层析分离蛋白质实验中三种过滤介质分离效果的比较

目的 探讨凝胶过滤层析分离蛋白质的最佳实验效果。方法 分别采用不同规格的凝胶过滤层析介质SephadexG 5 0、G 75、G 10 0 ,通过凝胶过滤层析法分离已知分子量的混合蛋白质。结果 混合样品得到分离 ,呈现三组分离样品的层析图。结论 从大分子物质中除去小分子物质时应选用交联度大的介质G 5 0。进行中等蛋白质分离时 ,选用G 75较为合适。将小分子物质浓缩而除去大分子物质时 ,应选用交联度小的介质 ,如G 10 0或G 2 0 0。

牛磺酸对缺血再灌注家兔抗氧化能力影响的实验研究

目的 探讨牛磺酸对家兔缺血再灌注过程中脂质过氧化反应的影响。方法 将家兔分为对照组、实验组(牛磺酸组 ) ,按改良Wigger’s法建立重度失血性休克模型。于休克前、休克后 2h及再灌注后 0 .5h、1h、2h分别测定血清超氧化物歧化酶 (SOD)及丙二醛 (MDA)。结果 实验组再灌注后 0 .5h、1hSOD活性均高于对照组 ,再灌注后0 .5h、1h、2hMDA含量均低于对照组。结论 牛磺酸具有抗缺血再灌注损伤及抑制脂质过氧化的作用 。

高脂血症沙鼠某些脂酶活性的变化及鸦胆子油乳剂降脂作用的研究

通过制成的长爪沙鼠高脂血症模型观察其心肌和肝脏的组织总脂解活性（ＬＡ），脂蛋白脂肪酶（ＬＰＬ），肝甘油三酯脂肪酸（ＨＴＧＬ）及血清卵磷脂：胆固醇脂酰基转移酶（ＬＣＡＴ）的活性变化，并对中药鸦胆子油乳剂的降脂作用及机理进行了探讨。结果表明。高脂血症沙鼠血清中ＬＣＡＴ活性明显升高；肝脏ＬＡ降低；心肌和肝脏的ＬＰＬ活性都明显降低，而ＨＴＧＬ的活性则无明显改变；给其投入鸦胆子油乳剂后，血清ＬＣＡＴ活性更进一步增强；血清总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）降低；ＬＡ及ＨＴＧＬ无明显改变；但ＬＰＬ活性增高。说明鸦胆子油乳剂具有明显的降脂作用。

高脂血症沙鼠血清中卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性变化及鸦胆子油乳剂降脂作用的研究

高脂血症沙鼠血清中卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性变化及鸦胆子油乳剂降脂作用的研究作者简介：于晓光，女，３４岁，硕士，讲师于晓光王淑娟高旭（哈尔滨医科大学生化教研室，哈尔滨１５００８６）王继芬（哈尔滨市道外区卫生防疫站）王志学（阿城市亚沟卫生院）不少西药有...

L_(7811)白血病细胞线粒体膜流动性的测定

本文用DPH荧光探剂标记线粒体膜和荧光偏振技术,对正常615小鼠胸腺淋巴细胞和脾细胞的线粒体膜及其L_(7811)白血病鼠腹水细胞和脾细胞的线粒体膜流动性进行测定。结果表明,L_(7811)白血病鼠腹水细胞及其脾细胞的线粒体膜的荧光偏振度比正常小鼠明显降低,微粘度降低,而流动性增大。

内皮抑素体外抑制喉鳞状细胞癌细胞的效果观察

目的探讨内皮抑素对喉鳞状细胞癌(简称喉癌)细胞(Hep-2)和人脐静脉血管内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcell,HUVEC)的作用及其可能的机制。方法①MTT法检测,10μg/ml～50μg/ml的内皮抑素作用72小时和30μg/ml的内皮抑素作用24～72小时对Hep-2和HUVEC的影响;②电镜观察,加药前后Hep-2和HUVEC的超微结构;③RT-PCR法检测,加药前后Hep-2中survivin基因的表达;④光镜观察,内皮抑素(30μg/ml)对体外人造血管模型的影响。结果①内皮抑素(20μg/ml～50μg/ml)能抑制Hep-2和HUVEC的增殖(P<0.05,P<0.01),呈剂量-时间依赖性;②Hep-2与HUVEC药物作用组均呈凋亡改变;③RT-PCR结果,药物作用组中survivin基因表达受到部分抑制(P<0.01);④内皮抑素能抑制新生血管的形成,并能破坏新生的血管网。结论内皮抑素可能通过诱导Hep-2和HUVEC的凋亡抑制其增殖,并能破坏新生的血管。内皮抑素可能以此抑制喉癌的生长与转移。

内皮抑素对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及体外微血管模型的作用及其可能的机制

目的：探讨内皮抑素对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）及体外微血管模型的作用及其可能的机制。方法：1．MTT法检测不同浓度（10～50μg／ml）内皮抑素作用72h和30μg／ml内皮抑素作用不同时间（24～72h）对HUVEC细胞的影响；2、电镜观察HUVEC细胞超微结构的变化；3．光镜下观察内皮抑素（30μg／ml）对体外人造血管模型的影响。结果：1．MTT检测显示，内皮抑素（20～50μg／ml）能抑制HUVEC细胞的增殖（P〈0．05，P〈0．01），具有剂量-时间依赖性。2．电镜观察，HUVEC细胞内皮抑素作用组均出现凋亡改变。3．光镜观察，内皮抑素能抑制新生血管的形成，并能破坏新生的血管网。结论：内皮抑素能抑制人脐静脉血管内皮细胞HUVEC的增殖，并具有时间一剂量依赖性，机制可能为诱导细胞凋亡。提示，内皮抑素可能通过诱导HUVEC的凋亡抑制其增殖，并能破坏新生的血管。内皮抑素可能以此抑制机体肿瘤的生长与转移。

非霍奇金淋巴瘤细胞遗传学分型的临床应用

目的 研究非霍奇金淋巴瘤染色体改变与临床过程及预后的内在联系。方法 采用短期培养法对非霍奇金淋巴瘤进行染色体核型分析,并对全部病人进行临床治疗追踪观察,观察不同核型对治疗的反应。结果 核型正常或t(14;18)改变者效果好,多倍体,1号,7号染色体异常者治疗效果差,据此进行细胞遗传学分型能准确地反映肿瘤的生物学行为。结论 根据特异性染色体改变进行分型,可以对不同病人选择不同的治疗方案,增加治愈率,减少化疗副反应。

神经肽注射液多肽成份的分离及鉴定

本实验采用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２５及ＡＣＡ凝胶柱层析技术，对神经肽注射液中多肽成份进行过柱分离。将过柱后收集的不同洗脱峰的溶液通过紫外扫描，茚三酮显色，微量双缩脲试验及薄层层析等技术进行鉴定。此外还用ＳＤＳ—ＰＡＧＥ检测该注射液纯度及分子量。结果表明神经肽注射液含有一种主要多肽成份及大量小分子肽类，其主要多肽成份的分子量为１４，０００Ｄ。

IL-1β、IFN-γ对灌流大鼠卵巢中基质金属蛋白酶-2,-9mRNA基因表达的影响

目的 探讨IL 1β、IFN γ对基质金属蛋白酶 - 2 ,- 9(MMP - 2 ,- 9)mRNA基因表达的影响。 方法 采用体外灌流卵巢系统、原位杂交 (insituhybridization)等方法检测IL 1β、IFN γ对大鼠卵泡发育过程中MMP - 2 ,- 9mRNA基因表达变化 ,并通过密度扫描方法对原位杂交结果进行半定量分析。结果 IL 1β对MMP - 2mRNA的表达无明显的刺激或抑制作用 ,但可显著增加卵泡膜细胞的MMP - 9mRNA的表达 ;IFN -γ可显著降低MMP - 2 ,- 9mRNA的表达。结论 IL 1β、IFN γ可通过调节卵泡发育过程中MMP - 2 ,-