病理生理学中“细胞信号转导和疾病”教学内容初探

细胞信号转导是细胞接受外界信号的变化或刺激并通过信号转换做出相应的生物学反应的过程,细胞信号转导的异常是细胞功能障碍的基础.如何讲好病理生理学课程中新增加的细胞信号转导这一章,结合以往的教学经验从三个方面来论述,即以动态的观点、结合研究进展和以疾病规律为中心灵活讲解细胞信号转导与疾病.

留学生教育中病理生理学教学思考

随着国际间的交流与合作日益频繁,留学生教育已成为高等教育的重要组成部分。在留学生医学教育中,作为基础与临床桥梁的病理生理学是一门重要的基础学科。在教学过程中,不断提高教师英语授课水平、加强教师自身素质的培养是把握教学质量的关键;同时,加强与留学生的沟通与了解、运用多种教学方式激发留学生的学习兴趣及能力也是促进教学质量提高的重要手段。就留学生教育中的病理生理学教学进行了初步探究,对面临的问题提出了见解,旨在为留学生教育的深入开展提供思路。

病理生理学教学中的几点体会

病理生理学一直被学生认为是一门较难掌握的学科.青年教师在病理生理学的教学工作中,更应该顺应社会需要,提高自己的道德素质,完善自己的知识结构,更新观念,成为一名知识水平、人格魅力、职业道德都经得住考验的优秀教师.

心房肽的来源、化学与生理作用

心房肌细胞内的特殊颗粒是50年代中期由Kish用电镜观察豚鼠和公牛心房时发现的,并做了一般形态学描述。后来Battig和Cantin等在人的心房肌细胞内也发现有这种颗粒。1959年Bompiani 等在研究心房组织的传导和收缩时,对这种颗粒进行了更为详尽的描述。

红细胞膜带3蛋白及膜流动性在病理状态下的变化(英文)

目的 研究带 3蛋白与红细胞膜流动性的关系及其在病理状态下的改变。方法 对血液病及高血压患者红细胞膜带 3蛋白相对含量、红细胞膜流动性及血浆MDA分别进行了测定。结果 血液病患者红细胞膜带 3蛋白相对含量和膜流动性较对照组显著降低。而血浆MDA含量较对照组显著升高。结论 病理状态下 ,膜流动性的降低与带 3蛋白的相对含量减少有关。

精胺预处理对离体灌流大鼠心肌缺血/再灌注损伤及细胞凋亡的影响

目的探讨精胺预处理对离体灌流大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响及其可能的抗凋亡作用。方法应用Langehdorff离体灌流大鼠心脏复制模拟心肌缺血/再灌注损伤模型。24只大鼠随机分为3组,每组8只:对照组(Con-trol)、缺血/再灌注组(IR)、精胺干预组(Spermine)。比色法测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)活力,心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及心肌丙二醛(MDA)含量;多导生理记录系统记录心脏功能;HE染色光镜下观察心肌形态学变化;三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测心肌梗死面积;透射电镜和TUNEL方法检测细胞凋亡;免疫组化检测心肌Fas与Bcl-2蛋白的表达。结果 (1)与对照组比,IR组冠脉LDH漏出明显增多、心肌组织中MDA水平增加、SOD活性降低(P<0.01);心功能明显下降(LVDP,HR,CF均低于对照组,P<0.05);光镜下可见心肌细胞呈凝固性或带状坏死。与Control组比,IR组心肌梗死面积及心肌细胞凋亡率明显增加(P<0.01);心肌Fas蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调。透射电镜下心肌细胞核染色质浓缩、凝聚且边集,染色质在核膜周边聚集形成新月形,线粒体嵴排列紊乱。(2)与IR组比,Spermine组冠脉LDH漏出减少,心肌组织中MDA减少,SOD增加(P<0.01);心功能有明显改善(LVDP,HR,CF均明显高于IR组,P<0.05);光镜下心肌细胞结构清晰。Spermine组与IR组比心肌梗死面积及心肌细胞凋亡率均明显降低(P<0.01);心肌Fas蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调;电镜下可见心肌肌节结构清晰,线粒体嵴完整、基质致密,未见核染色质凝聚。结论外源性精胺能明显减轻离体灌流大鼠心肌缺血/再灌注损伤,其机制可能与精胺抑制细胞凋亡有关。

复方丹参滴丸对离体大鼠缺氧/复氧心肌的保护作用

目的和方法 :采用Langendorff大鼠离体心脏灌流技术 ,制备心肌缺氧 /复氧损伤模型 ,分别在缺氧前及缺氧后 ,用复方丹参滴丸及消心痛对心肌给予保护 ,利用高效液相色谱仪 (HPLC)测定离体大鼠心肌组织中的高能磷酸化合物的含量变化 ,利用H - 6 0 0透射电子显微镜对心肌细胞超微结构进行观察。本实验共分 6组 :正常对照组 ;单纯缺氧 /复氧组 ;复方丹参滴丸前、后保护组 ;消心痛前、后保护组。结果 :①单纯缺氧 /复氧组心肌组织中AMP、ADP、ATP及AN含量均明显低于正常对照组 (P <0 0 1)。②复方丹参滴丸前、后保护组大鼠心肌组织内的AMP、ADP、ATP、AN含量均高于单纯缺氧 /复氧组 (P <0 0 1) ,也相应高于消心痛前、后保护组 (P <0 0 1) ,两组的ATP、AN含量均接近正常水平 (P >0 0 5 )。③消心痛前、后保护组的AMP、ADP、ATP、AN含量均低于正常对照组 (P<0 0 1)。电镜结果也证明复方丹参滴丸对缺氧 /复氧心肌细胞超微结构具有明显的保护作用。结论 :复方丹参滴丸无论在缺氧前预灌注时及缺氧后再灌注时给予 ,均能通过提高心肌组织中高能磷酸化合物的含量 ,保护心肌细胞超微结构来保护心肌 ,其保护效果优于消心痛。

红花黄素对豚鼠单个心室肌细胞动作电位和钙电流的影响

目的 观察红花黄素对豚鼠单个心室肌细胞动作电位和钙电流的影响。方法 采用膜片钳全细胞式记录技术。结果 红花黄素（３３ μｇ· Ｌ－ １） 能延长单个心室肌细胞动作电位时程，由（３５９３３ ±２７１８） ｍｓ 延长至（４１３３３ ±６１８８）ｍｓ（ Ｐ＜ ００５ ，ｎ ＝ ６） 。同时增加内向 Ｌ型钙电流的峰值，由（ － １０２１ ±７４） ｐ Ａ 至（ － １４３６ ±２１２） ｐ Ａ（ Ｐ＜ ００５ ，ｎ ＝ ７） 。结论 由于红花黄素具有上述电生理作用。

复方丹参滴丸对培养的乳鼠心肌细胞缺氧及缺氧/复氧时Fas/FasL蛋白表达的影响

探讨复方丹参滴丸 (DanShenPill,DSP)对培养的乳鼠心肌细胞缺氧及缺氧 /复氧时凋亡相关基因Fas/FasL蛋白表达的影响。方法 :按常规培养新生 4d乳鼠心肌细胞 ,于培养 2 4h后进行缺氧及缺氧 /复氧实验 ,以免疫组织化学方法检测心肌细胞Fas/FasL蛋白表达的变化。结果 :缺氧 4 5h及 10 5h后 ,心肌细胞Fas/FasL蛋白的阳性表达指数 (positiveexpressionindex ,PEI %)均显著高于对照。 10 5h组与 4 5h组无明显差异。复方丹参滴丸组PEI明显低于缺氧组 (P <0 0 5 )。缺氧 30min后再给氧 4h与 10h ,心肌细胞Fas/FasL蛋白的PEI显著高于对照 ,复氧 10h组与 4h组无明显差异 ,复方丹参滴丸组PEI低于缺氧复氧组 (P <0 0 5 )。结论 :缺氧及缺氧 /复氧时均有凋亡相关基因Fas及其配体FasL蛋白表达的增强 ,复方丹参滴丸可通过下调Fas/FasL蛋白表达以减少凋亡从而减轻缺氧损伤及缺氧 /复氧损伤。

槲皮素抗阿霉素诱导的培养心肌细胞的凋亡

目的观察槲皮素对阿霉素(adriamycin,ADR)致大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法原代培养乳鼠心肌细胞,随机分为正常对照组、阿霉素损伤组、槲皮素对照组、阿霉素+槲皮素(低、中、高浓度)组。比色法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,MTT法测定心肌细胞存活率,电镜观察细胞超微结构,免疫细胞化学法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达,用RT-PCR和Western blot检测caspase-3 mRNA和蛋白的表达。结果与正常对照组相比,槲皮素对照组各指标无明显改变,阿霉素组LDH活性增强,细胞存活率降低,Bcl-2表达减少,Bax表达增加,心肌细胞超微结构损伤明显,caspase-3 mRNA和蛋白的表达均升高;高中低剂量槲皮素均可减轻阿霉素所致的损伤。结论槲皮素对ADR致培养心肌细胞凋亡具有保护作用,其机制与调节细胞内凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2和Bax的表达有关。

白藜芦醇对小鼠阿霉素性心肌损伤的保护作用及机制

目的研究白藜芦醇(Res)对阿霉素(ADM)诱导的心肌损伤的保护作用及机制。方法一次性腹腔注射ADM(15mg·kg-1),建立小鼠阿霉素急性心肌损伤模型,并观察白藜芦醇预防性给药的保护作用。结果与正常对照组相比,ADM可使小鼠心电图QRS波电压幅度下降(P<0.01),心律失常率发生达60%;心肌超微结构损伤明显;血清中MDA、NO含量及LDH活性升高,SOD活性降低;p53蛋白表达升高(P<0.01)。与ADM损伤组相比,5、10、15mg·kg-1白藜芦醇呈剂量依赖性降低血清LDH活性和MDA、NO含量,增加SOD活性;减少QRS波电压下降幅度和心律失常发生率;下调p53蛋白表达(P<0.01或P<0.05);减轻电镜下心肌超微结构损伤。白藜芦醇对正常小鼠仅升高SOD活性,对其余指标无明显影响。结论Res对阿霉素性心脏损伤具有保护作用,其机制可能与其增强心肌SOD活力、抗脂质过氧化和抑制心肌细胞凋亡有关。

丹参酮Ⅱ-A抑制豚鼠单个心肌细胞L型钙电流和缩短动作电位时程效应的相关性分析

目的旨在探讨药物阻断L型钙电流与其缩短心肌细胞动作电位时程（APD）效应之间的相互关系。方法采用膜片钳全细胞式记录方法，同时观察了丹参酮Ⅱ-A（DST）对豚鼠同一个心室肌细胞跨膜电位和L型钙电流的影响，并对药物的有关效应作相关分析。结果DST显著缩短豚鼠心肌单细胞的动作电位时程（APD），呈剂量依赖关系（r=-0.987）;10、20、和40μmol·L-1DST可使L型钙内向峰电流分别减少35.2％、57.7％和74.7％，亦呈浓度依赖方式（r=-0.948）。经相关性分析证实，在本实验采用的DST相应浓度作用下，APDS50、APD90和APD50～10的缩短与L型钙电流峰值的减少之间呈高度正相关（r分别为0.9870、0.9867和0.9896）。结论DST缩短心肌细胞APD和阻断L型钙电流的效应是高度一致的，且以APD50～10表示平台期的长短更合理。

不同鼠龄大鼠心肌组织中钙敏感受体的表达及与缺氧-再灌注损伤的关系

目的:观察不同鼠龄大鼠心肌组织钙敏感受体(CaSR)的表达规律及与心肌缺氧-再灌注损伤的关系。方法:采用RT-PCR技术,检测不同情况下心肌组织CaSR的表达差异;Lagendorff离体心脏灌流的方法复制心脏缺氧-再灌注模型;用透射电镜观察心肌超微结构的变化。结果:大鼠出生后,心肌组织中CaSR的表达逐渐升高,1个月时达到高峰,2、3个月保持在出生水平,此后上升并维持在较高水平。大鼠心肌缺氧40 m in及再灌注1 h、2 h心肌组织CaSR的mRNA表达升高,再灌注3 h、4 h后降低;同时随再灌注时间延长,心肌超微结构损伤愈严重。结论:大鼠心肌组织存在钙敏感受体,其表达与月龄有一定关系,并可能参与心肌缺氧-再灌注损伤的发生。

大鼠心肌多胺代谢限速酶ODC、SSAT活性分析

目的建立大鼠心肌多胺代谢限速酶鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰转移酶(SSAT)活性分析方法。方法以Langendorff离体灌流心肌为实验材料,制备心肌组织匀浆;分别以dl[114C]Ornithine及[114C]acetylCoenzymeA为底物,以液体闪烁计数仪记录生成的14CO2及[14C]acetylspermidine的放射活度,并以其代表ODC,SSAT的活性;计算大鼠心肌ODC、SSAT的酶促反应动力学参数,筛选出适宜的底物浓度;同时观察一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)对酶活性的影响。结果①大鼠心肌ODC、SSAT基础活性分别为:(9.67±3.09)nmol·mg-1Pro·h-1;(3.59±0.91)nmol·mg-1Pro·min-1。②ODC催化LOrnithine的酶促反应动力学参数Km=(54.95±8.14)μmol·L-1;Vmax=(2.364±0.37)nmol·mg-1·h-1;SSAT催化AcetylCoenzymeA的酶促反应动力学参数Km=(12.87±1.88)μmol·L-1;Vmax=(0.50±0.07)nmol·mg-1·min-1。③大鼠心肌ODC、SSAT活性检测的底物浓度分别为:90μmol·L-1(18.5kBq)DL[114C]Ornithine及36μmol·L-1(2.96kBq)[114C]acetylCoA。④SNP呈浓度依赖性地抑制ODC的活性、诱导SSAT的活性。结论建立了大鼠心肌多胺代谢限速酶鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰转移酶(SSAT)活性的分析方法,该方法简便易行;根据Km值确定测定大鼠心肌ODC及SSAT?

丹参酮Ⅱ-A对大鼠心室肌细胞膜钾电流的影响

目的 研究丹参酮Ⅱ A(tanshinone ,TSN)对酶解分离的大鼠单个心室肌细胞的内向整流钾电流 (Ik1 )和瞬时外向电流 (Ito)的影响。方法 采用膜片钳全细胞记录技术。结果 应用CdCl2 0 .3mmol·L- 1 阻断钙电流发现 :TSN可抑制Ik1 和Ito。 1 0、2 0、40 μmol·L- 1 使Ik1 稳态电流由用药前 - 32 66 5pA± 381 6pA分别降至 - 2 90 1 0pA±52 8 3pA(P <0 .0 5 ,n =7) ,- 2 581 .0pA± 335 .7pA(P <0 .0 1 ,n=7) ,- 1 931 .9pA± 2 1 9.2pA(P <0 .0 1 ,n =7) ,抑制率分别为 1 2 1 %、2 3 4%、32 8%。较低浓度的TSN对Ito的作用不明显 ,较高浓度有抑制作用。 1 0、2 0、40 μmol·L- 1 使Ito峰值由用药前 2 374 4pA± 2 2 2 9pA分别降至 2 1 4 9 4pA± 341 3pA(P >0 .0 5 ,n =7) ,1 893 .1pA± 350 .8pA(P <0 .0 5 ,n=7) ,1 661 .3pA± 360 .0pA(P <0 .0 5 ,n =7) ,抑制率分别为 9%、2 0 1 %、30 0 %。结论 由于TSN对钾通道的阻滞作用 。

槲皮素抗实验性心律失常作用的研究

目的观察槲皮素抗实验性心律失常的作用,并探讨其可能机制。方法应用乌头碱,氯化钙制备大鼠心律失常模型,哇巴因制备豚鼠心律失常模型,观察槲皮素不同剂量对上述模型的保护作用。结果槲皮素(0.2mg/kg,0.4mg/kg)能提高乌头碱致大鼠和哇巴因致豚鼠发生室性早搏(VE)、室性心动过速(VT)、室颤(VF)的用量;延长氯化钙诱发大鼠心律失常出现的时间,缩短心律失常持续时间,减少心律失常发生率及死亡率。结论槲皮素具有抗多种实验性心律失常的作用。

丹参对心肌缺血和再灌注损伤的保护作用

采用在家兔全麻、开胸、自主呼吸和自主心律的条件下,结扎冠脉左室支造成急性心肌缺血模型,进而松开结扎结形成再灌注损伤模型。对心肌缺血和再灌注损伤的组织脂质过氧化物含量和局部血流量变化进行测定,同时辅以心电图监护;以丹参注射液为保护剂观察其作用效果。结果表明,随着缺血时间的延续,心肌脂质过氧化物含量逐渐增加;当缺血60分钟后再灌注30分钟,脂质过氧化物含量仍继续上升,明显高于缺血60分钟组,但与缺血90分钟组比较则无显著差异;其缺血区局部组织血流量再灌注后仅恢复53.2%。给予丹参保护的再灌注组,其缺血区组织脂质过氧化物含量较再灌注损伤组下降56.0%(P<0.005),而局部组织血流量恢复则提高32.0%(P<0.001)。

大鼠心肌缺血再灌注时能量代谢及脂质过氧化变化及复方丹参滴丸的保护作用(英文)

目的 探讨大鼠心肌缺血 再灌注时能量代谢及脂质过氧化变化及复方丹参滴丸的保护作用。方法 采用Langendorff离体心脏灌流技术 ,制备心肌缺血再灌注损伤模型 ,分别在缺血前预灌时及缺血后再灌注时用复方丹参滴丸对心肌给予保护 ,观察心肌能量代谢及脂质过氧化 (LPO)变化。本实验共分 4组 ,正常对照组 ,单纯缺血再灌注组 ,复方丹参滴丸前保护组 ,复方丹参滴丸后保护组。结果 ①心肌缺血 4 0min再灌注 2 0min ,心肌组织内高能磷酸化合物明显减少 ,脂质过氧化物含量明显增多 ,与正常对照组比P <0 .0 1。②在缺血前预灌注时及缺血后再灌注时加入复方丹参滴丸 ,心肌组织中的高能磷酸化合物均高于单纯缺血再灌注组 (P <0 .0 1) ,两组ATP、TAN均接近正常水平 (P >0 .0 5 )。两组的LPO低于单纯缺血再灌注组 ,复方丹参滴丸前保护组的LPO与对照组比无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论 心肌缺血 4 0min再灌注 2 0min ,心肌能量代谢障碍 ,脂质过氧化反应增强 ,大鼠心肌发生缺血再灌注损伤。复方丹参滴丸在缺血前预灌注时与缺血后再灌注时给予均可通过增加心肌能量储备 ,抑制脂质过氧化物的生成而保护心肌。

外源性多胺对老年大鼠抗衰老作用的实验研究

目的观察外源性多胺对自然衰老大鼠的抗衰老作用,并探讨其可能机制。方法 18月龄的老龄Wistar大鼠,多胺(精脒、精胺)灌胃给药6周,复制给药组动物模型(多胺给药组,polyamines),相同月龄的老龄Wistar大鼠为老年对照组(old),3月龄的Wistar大鼠为青年对照组(young)。生化方法检测各组大鼠心脏、肝脏组织SOD活力、MDA含量。酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定大鼠心脏、肝脏组织中TNF-α、IL-1β含量。透射电子显微镜观察心肌超微结构变化。结果与青年对照组比,老年对照组心脏、肝脏组织SOD活力明显下降,MDA含量明显增加,TNF-α和IL-1β水平均有显升高;与老年对照组比,多胺给药组心脏、肝脏组织SOD活力明显升高,MDA含量明显降低,TNF-α、IL-1β水平明显降低。电镜观察结果显示:老年对照组的心肌可见大量脂褐素颗粒沉积,并可见线粒体数目减少、体积增大、基质疏松、嵴呈现絮状变;多胺给药组心肌肌节结构清晰,线粒体基质致密、嵴排列整齐,偶见脂褐素颗粒。结论外源性多胺在一定程度上能够延缓自然衰老大鼠的衰老过程,其作用机制可能与提高老龄大鼠心脏、肝脏组织的抗氧化能力和抑制炎症介质的生成有关。