克霉唑对急性早幼粒细胞白血病细胞及骨髓基质细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究抗真菌药物克霉唑作为钙激活性钾通道阻断剂对人类急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞及骨髓基质细胞增殖和凋亡的影响。方法:通过台盼兰拒染计数法检测了钙激活性钾通道阻断剂克霉唑对人APL细胞株NB4、APL患者原代细胞和骨髓基质细胞生存活力的影响,流式细胞仪检测细胞周期变化及亚二倍体的出现,AnnexinV/PI试剂盒和DAPI荧光染色检测细胞的凋亡情况,激光扫描共聚焦显微镜实时监测[Ca2+]i的变化。结果:克霉唑以浓度依赖方式显著抑制NB4细胞和APL原代细胞生长,在同样条件下骨髓基质细胞没有显著毒性。5μmol/L克霉唑作用72h后,细胞周期明显被阻滞于G0/G1期,S期显著减少,并出现亚二倍体峰。Annexin V/PI双标记和DAPI荧光染色证实克霉唑诱导NB4细胞和APL原代细胞凋亡,凋亡率分别为(30.5±3.9)%、(33.7±4.5)%。5μmol/L克霉唑引起[Ca2+]i荧光比值显著增高。结论:钙激活性钾通道阻断剂克霉唑诱导APL细胞凋亡,这为治疗APL提供了新的有希望的治疗方法,其机制可能与克霉唑调节细胞内钙水平有关。

不同化疗药对APL/NB4细胞促凝血活性的影响

目的:比较柔红霉素(DNR)、羟基脲(HU)、高三尖杉酯碱(HHT)对三氧化二砷(ATO)诱导的急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)细胞促凝血活性的影响。方法:应用0.25μmol·L-1ATO处理NB4细胞6 d,采集入院时无白细胞增高、ATO治疗后出现高白细胞血症(WBC≥10×109L-1)的6例APL患者外周血,分离出单个核细胞(APL细胞)。在体外用治疗浓度的DNR、HU、HHT处理NB4/APL细胞24 h,检测细胞凋亡率及促凝血活性。结果:HU和DNR可增强NB4细胞促凝血活性(P<0.05),而HHT处理后其促凝血活性不增强(P>0.05);APL细胞在体外经HHT处理,可显著增加细胞凋亡比例(P<0.05),且促凝血活性无明显增强(P>0.05),而DNR和HU在促进细胞凋亡的同时,也增强了促凝血活性(P<0.05)。结论:DNR、HHT、HU都可以诱导ATO处理的NB4/APL细胞凋亡,其中以HHT促凋亡作用最强,促凝血活性影响最小。