奥扎格雷钠口服溶液Ⅰ期临床耐受性研究

目的评价健康志愿者单次口服奥扎格雷钠口服溶液的安全性并探索最大耐受剂量。方法按GCP要求设计试验方案。单剂量耐受试验将24名受试者随机分至4个剂量组,每组6名,男女各半,从低剂量开始给药,观察指标为临床症状、生命体征和实验室检查指标等,应用方差分析进行统计学处理。结果在单剂量给予奥扎格雷钠口服溶液耐受性试验中,各组受试者入选时各项指标均在正常范围,条件均衡,具有可比性。仅发现400mg剂量组有1例可能与药物有关的轻度不良反应,表现为心电图出现偶发室性期前收缩,未经处置自然消失,其他均未见有临床意义的改变。结论24名健康受试者单次口服奥扎格雷钠口服溶液,最大剂量至400mg,比较安全、耐受性好。

链脲佐菌素致大鼠高血糖模型的实验研究

目的探讨链脲佐菌素（streptozocin，STZ）所致Wistar大鼠高血糖稳定模型的最佳实验条件。方法应用讹腹腔注射制备大鼠高血糖模型，计算成模率和死亡率。结朵采用一次给药法，分为不同剂量组（40mg／kg；50mg／kg；60mg／kg），其中50mg／ks剂量组成模率较好。采用两次给药法，第一次给予10mg／kg，隔1天分别给予以下剂量（40mg／kg，50mg／kg，60mg／kg），其中第一次10mg／kg，第二次50ms／ks剂量组成模率最高。两次给药法相对应剂量组成模率比一次给药法高。日照时间对成模率及死亡率均有影响。日照时间短，成模率明显降低，而且死亡率明显增高。结论用STZ制备糖尿病模型是一种稳定可靠的方法。实验选取雄性Wistar大鼠体重190～220g，在日照时间充足的条件下饲养。给药方式采取两步给药法，剂量为10mg／ks，隔1天给予50mg／kg，其成模率最高。

了哥王水煎液的抑菌作用研究

目的观察了哥王水煎液对4种细菌的抑菌效果。方法采用琼脂扩散法观察抑菌圈大小,用倍比稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)与最低杀菌浓度(MBC)。结果了哥王水煎液对大肠杆菌ATCC25922,金黄色葡萄球菌ATCC25923,藤黄八叠球菌CMCC(B)28001,枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501均有抑菌效果,其MIC和MBC:大肠杆菌为156mg/ml和312mg/ml;枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌均为78mg/ml和156mg/ml;藤黄八叠球菌为39mg/ml和78mg/ml。结论了哥王水煎液对4种供试菌均有抑菌效果,且具有浓度依赖性。其抑菌强度由强到弱依次为:藤黄八叠球菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌。

异福酰胺胶囊体内生物等效性研究

目的观察20名健康志愿者单次口服异福酰胺胶囊的人体药代动力学及相对生物利用度。方法采用HPLC定量分析法分别测定给药后受试者血浆中利福平、异烟肼和吡嗪酰胺3种有效成分的浓度。结果被试制剂与参比制剂的药代动力学参数分别是:利福平tmax(1.7±0.5)h和(1.6±0.3)h,Cmax(7.95±1.30)mg/L和(7.87±1.21)mg/L,AUC0-t每小时(49.82±8.38)mg/L和(48.35±8.12)mg/L,相对生物利用度为(103.2±7.0)%。异烟肼tmax(1.70±0.25)h和(1.72±0.26)h,Cmax(5.76±0.85)mg/L和(5.89±0.94)mg/L,AUC0-t每小时(22.78±9.34)mg/L和(21.86±7.92)mg/h/L,相对生物利用度为(103.6±12.3)%。吡嗪酰胺tmax(2.45±0.43)h和2.45±0.32h,Cmax(21.18±0.98)mg/L和(21.56±1.02)mg/L,AUC0-t每小时(304.0±27.93)mg/L和(298.2±29.06)mg/L。吡嗪酰胺相对生物利用度为(102.1±5.3)%。结论受试制剂与参比制剂生物等效。

高糖培养下大鼠冠状小动脉氧自由基生成部位的研究

目的探讨高糖培养下大鼠冠状小动脉超氧阴离子(O.2)的生成部位。方法显微镜下大鼠冠状小动脉的分离;DMEM(高糖)培养大鼠冠状小动脉;应用免疫荧光组织化学染色及激光扫描共聚焦显微镜检测O.2生成部位。结果高糖组大鼠冠状小动脉内皮组织O.2生成量比正常组增高,外膜组织、平滑肌组织O.2生成量与正常组无差别。结论高糖培养下大鼠冠状小动脉O.2只产生于内皮细胞。

尼莫地平纳米脂质体制备工艺及处方优化研究

目的优化制备尼莫地平纳米脂质体的工艺和处方。方法采用正交设计法,以尼莫地平脂质体冻干粉重建包封率、药物利用率、重建后0 h及10 h小粒径(<0.15μm)脂质体包封药物的百分率、粒径分布、泄漏率等多个指标综合评分,优化尼莫地平脂质体的处方和工艺。结果尼莫地平脂质体的最佳工艺处方为:药物:(磷脂+胆固醇)为1:40;胆固醇:磷脂为1:6;去氧胆酸钠:(磷脂+胆固醇)为1:4;吐温280:(磷脂+胆固醇)为1:4;冻干保护剂甘露醇的用量为处方总重的65%,水合介质为注射用蒸馏水,制备浓度为0.4 mg/mL,采用乙醇滴加2超声工艺制备,按该处方工艺组合制备3批脂质体,包封率平均为92.8%,平均粒径为18.9 nm。结论按优化处方制得的尼莫地平纳米脂质体的包封率和粒径均令人满意。

穿琥宁注射液对大鼠CYP1A2亚型的影响

目的通过体内、体外试验,观察穿琥宁注射液对大鼠CYP1A2亚型的影响。方法大鼠尾静脉注射给予不同浓度的穿琥宁注射液(25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg)或生理盐水,连续给药7d,第8d给予探针药物咖啡因灌胃,6h后断头取全血,用HPLC法测定空白对照组和各试验组全血中咖啡因的代谢率,利用Western blot技术测定穿琥宁注射液对大鼠CYP1A2亚型蛋白表达的影响;在肝微粒体温孵体系中,加入探针药物非那西丁,通过HPLC法测定大鼠肝微粒体中非那西丁的代谢物对乙酰氨基酚的生成速率的影响。结果穿琥宁注射液低、中、高剂量组的咖啡因代谢率分别为(72.82±17.90)%、(81.31±19.21)%和(77.11±14.71)%,空白对照组代谢率为(67.12±15.13)%,各试验组与空白对照组的咖啡因代谢率无显著性差异(P>0.05),CYP1A2蛋白表达无显著性差异。肝微粒体温孵试验低、中、高3个剂量组和空白对照组的对乙酰氨基酚生成速率分别为(0.53±0.18)pmol/(min·gp)、(0.50±0.14)pmol/(min·gp)、(0.35±0.14)pmol/(min·gp)和(0.49±0.16)pmol/(min·gp),各试验组与空白对照组比较对乙酰氨基酚的生成速率均无显著性差异(P>0.05)。结论体内、体外试验结果均表明穿琥宁注射液对大鼠CYP1A2亚型无诱导或抑制作用。

白花蛇舌草水提取物对大鼠细胞色素P450 1A2亚型的影响

目的观察白花蛇舌草水提取物对大鼠细胞色素P450 1A2亚型(CYP 1A2)的影响。方法实验组(高、中、低剂量组)大鼠分别给予白花蛇舌草水提取物5．84g/kg、8．26g／kg、11．68g/kg,对照组给予生理盐水,用蛋白印迹方法测定大鼠CYP 1A2的蛋白表达。通过高效液相色谱(HPLC)法测定全血中咖啡因的代谢率,研究白花蛇舌草水提取物对大鼠肝脏CYP 1A2的影响;用HPLC法测定非那西丁的代谢率,确定白花蛇舌草水提取物对大鼠肝微粒体CYP 1A2活性的影响。结果蛋白印迹分析结果表明,白花蛇舌草水提取物对CYP 1A2蛋白表达没有影响。给予高、中、低剂量白花蛇草水提物的大鼠咖啡因代谢率分别为(33．62±5．08)％、(32．19±4．87)％、(31．05±4．93)％;对照组大鼠咖啡因代谢率为(30．73±5．40)％,实验组间及与对照组比较均无显著性差异(P>0．05)。肝微粒体体外温孵实验中,实验各剂量组和对照组非那西丁代谢率分别为(3．76±0．83)％、(3．61±0．79)％、(3．84±0．86)％、(3．81±0．82)％,实验组间及与对照组比较均无显著性差异(P>0．05)。结论体内、体外实验结果均表明,白花蛇舌草水提取物对大鼠肝脏CYP 1A2没有抑制作用。

高效液相色谱法测定人血浆中噁丙嗪分散片的浓度及药动学

目的 建立高效液相色谱法测定人血浆中丙嗪分散片浓度的方法。方法 高效液相色谱法 ,色谱柱为KromasilC18(6 .0mm× 15 0mm ,5 μm) ,流动相为甲醇∶水 (6 5∶35 )。血浆样品用乙醚提取。 结果 丙嗪的线性范围为3.12 5～ 10 0mg/L ,最低检测浓度为 3.12 5mg/L。高、中、低 3种浓度 (10 0 ,2 5 ,6 .2 5mg/L)的日内、日间变异均小于15 %。结论 该方法灵敏、精确、稳定 ,适用于丙嗪生物样本的测定和药代动力学研究。

人肝脏微粒体蛋白凝胶免疫多克隆抗体的制备

目的制备人肝微粒体蛋白多克隆抗体,为进一步研究微粒体蛋白的功能及制备单克隆抗体打下基础。方法用含人肝微粒体高丰度蛋白的蛋白凝胶免疫家兔,再用ELISA和Western blot方法检测血清效价和抗体特异性。结果2只家兔均产生了高效价的抗血清,Western blot结果显示,抗血清可以与相应蛋白结合。结论用含人肝微粒体高丰度蛋白的蛋白凝胶免疫的2只家兔均获得了高效价的抗血清,为深入研究该蛋白的定性、定量及定位奠定了基础,并为将来进行单克隆抗体的制备做前期技术支持。

布洛芬对大鼠体温降低作用的昼夜节律研究

目的:研究布洛芬不同时辰给药对大鼠体温降低作用及血药浓度的昼夜节律变化规律。方法:采用随机区组实验设计,60只大鼠分别在不同时间(2:00、6:00、10:00、14:00、18:00、22:00)单次灌胃给予布洛芬颗粒50mg.kg-1,另取10只为空白对照,观察大鼠体温和血药浓度的昼夜节律变化规律,以时间图和余弦法进行分析。结果:大鼠正常体温及用药后体温均呈现明显的昼夜节律变化,峰值相位及振幅无显著改变,仅均值下降;最佳拟合曲线分别为Yti=38.7+0.52Cos(15°×ti—86.80°)和Yti=37.8+0.55Cos(15°×ti—117°)。大鼠在不同时辰给药血药浓度亦呈现明显的昼夜节律变化,明期血药浓度高于暗期,最佳拟合曲线Yti=41.95+5.30Cos(15°×ti—272.83°)。结论:大鼠在不同时辰给予布洛芬,体温和血药浓度均存在昼夜节律的差异。