微小颗粒骨异位成骨过程中TGF-β_1的表达

目的 通过观察转化生长因子 β1(TGF β1)在自体微小颗粒骨 (30 0～ 5 0 0 μm)异位成骨过程中的表达 ,探讨微小颗粒骨移植的成骨机制。方法 采用日本大耳白兔造股二头肌肌袋模型 ,分别植入自体微小颗粒骨及自体块骨。术后 1、3、5、7、11、14、2 1、2 8d取材 ,进行组织学、免疫组化染色及原位杂交。检测TGF β1及TGF β1mRNA表达并作图像分析。结果 ①术后 5d ,颗粒骨组开始有软骨生成 ,7d时达到高峰 ,2 1d后有骨吸收 ;块骨组则以骨吸收为主。②术后 1d见基质及血肿中TGF β1阳性染色 ,亦见骨细胞TGF β1阳性染色。 5～ 11d颗粒骨组见成骨细胞、软骨细胞、间充质细胞及骨细胞表达大量TGF β1。 14d以后TGF β1渐减少 ,2 1d以后渐平稳。颗粒组TGF β1表达高峰出现早、强度高、持续时间长。③颗粒骨组TGF β1mRNA阳性表达细胞出现早 ,高峰在术后 5～ 11d ,主要为软骨细胞、成骨细胞、骨细胞及间充质细胞。结论 颗粒骨异位成骨能力强于块骨 ,TGF β1表达高峰出现时间早、量大、持续时间长。TGF β1mRNA定位细胞广泛 ,信号明显强于各期块骨组。

雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体表达的研究

目的 研究雌性大鼠一生中成骨细胞内雌激素受体 (ER)表达水平的变化规律。方法 采用二次酶消化、反复贴壁法分离纯化培养大鼠成骨细胞并进行鉴定 ,应用半定量Westernblot对不同月龄雌性Wistar大鼠成骨细胞内雌激素受体进行检测。结果 ER表达在 1、2月龄组呈低度表达 ,3月组ER开始呈现上升趋势 ,至 8、9、1 0月组ER达到高峰 ,1 0月组以后表达呈现下降趋势。结论 ER表达在不同月龄大鼠呈规律性分布 。

去势与非去势不同月龄雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体β的表达特点

目的:观察去势与非去势雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体β的表达水平,并比较其变化特点。方法:实验于2003-02/06在哈尔滨医科大学第二临床医学院科研中心完成。分别取新生,2,4,6,8,10,12个月龄的雌性Wistar大鼠各14只,按月龄分为6组,2,4,6,8,10,12个月龄组,各月龄组再随机分对照组,正常饲养不造模;去势组行卵巢切除造模,每组各7只。两个月后处死。①成骨细胞的生物学特征检测:取新生雌性Wistar大鼠14只用于大鼠成骨细胞体外培养。采用二次酶消化法、反复贴壁法分离纯化培养大鼠成骨细胞。采用倒置显微镜观察成骨细胞形态及超微结构。大鼠成骨细胞检验学特征碱性磷酸酶检测采用改良钙钴法,阳性反应为胞质中出现灰黑至深黑颗粒状或片状沉淀。成骨细胞培养上清液碱性磷酸酶及骨钙素检测,采用磷酸对硝基苯酯二钠盐比色法进行碱性磷酸酶检测,测得A值,换算成国际单位。采用放射免疫试剂盒进行骨钙素检测,计数器测定沉淀物cpm值,根据标准曲线得到样品中骨钙素含量。②成骨细胞内雌激素受体检测:应用半定量蛋白印迹酶促底物染色法以及发光法。测得A值,以A值越高,说明雌激素受体β表达越多。结果:纳入84只大鼠分为6组,均进入结果分析。①成骨细胞形态学观察:随着培养时间的延长,细胞伸出较多突起,细胞融合成片,培养12～18d呈多层生长。②大鼠成骨细胞碱性磷酸酶染色结果:镜下见90%的细胞呈碱性磷酸酶染色阳性。③成骨细胞培养上清液碱性磷酸酶及骨钙素含量:成骨细胞碱性磷酸酶和骨钙素明显高于成纤维细胞(P<0.01)。④去势与非去势大鼠成骨细胞内雌激素受体β的表达结果:应用酶促低物染色法测定,非去势组雌激素受体β表达在2个月龄组呈低度表达(90.81±2.20),4,6个月组雌激素受体β开始呈现上升趋势(121.10±5.78,143.20±4.41)至8,10个月组雌激素受体β达到高峰(186.10±6.60,190.90±6.10),10月组以后表达呈现下降趋势;去势组2,4,6,8,10,12个月组雌激素受体β都呈低度表达(87.80±2.51,89.50±2.72,89.81±2.43,90.59±2.34,92.52±2.62,90.39±2.53),除2个月龄组以外,其他各月龄组非去势组均显著高于去势组(P<0.05,0.01)。结论:①本实验采用酶消化法培养的细胞符合成骨细胞的生物学特征,具备成骨细胞功能。②去势大鼠在观察的不同时限点均出现成骨细胞雌激素受体β表达较同月龄非去势大鼠显著减少,说明去势影响成骨细胞内雌激素受体β的表达。

转化生长因子-β与骨生成

转化生长因子—β(TGF - β)是一族多种生物活性的细胞因子。在骨组织中含量丰富 ,它通过调整细胞增殖、分化及促进细胞外基质的合成 ,在骨的发生。

前臂后内侧入路修复桡神经深支损伤

目的介绍经前臂后内侧入路修复桡神经深支损伤的手术方法,并探讨其疗效。方法前臂桡神经深支损伤患者16例,男14例,女2例;年龄18-52岁,平均30岁。损伤原因:切割伤14例,手术损伤1例,桡骨骨折1例。病程1 h,2个月,平均14天。结果术后随访5-14个月,优(M_4)12例,良(M_3)3例,可(M_2)1例。结论经前臂后内侧入路治疗桡神经深支损伤,手术简洁、视野清晰、效果满意。

维生素K_2与骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症是一种骨量降低，骨组织微结构破坏，以骨脆性增加，骨强度下降，骨折风险增加为特征的全身骨骼系统疾病。近年来，随着老龄化人数的增加，骨质疏松症已经严重威胁了中老年人身体健康，成为人类社会共同关注的重要健康问题。据一项全国性流行病学调查显示，50岁以上男性骨质疏松症患病率为14．4％，女性升高到20．7％，60岁以上人群的患病率进一步升高。

低氧对MSCs增殖和分化的影响

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有自我更新、多向分化和强可塑性的细胞,具有分化为血液、骨、软骨、脂肪、肌肉、表皮、上皮、神经等组织的潜能,受到再生医学研究的关注。目前已有研究表明将MSCs移植到多种损伤组织中都能改善损伤组织的功能。文章在简要回顾了低氧环境对MSCs增殖和分化的研究内容和有关理论争论基础上重点介绍了缺氧诱导因子(HIF)通路对MSCs增殖和分化的影响。文章阐述了低氧环境对MSCs向成骨,成软骨,成脂及成神经元方向分化的影响。由于人体组织内生理条件下的氧张力远远小于大气中的氧张力(21%),采用低氧培养MSCs的研究方法得出的结论将更加贴近实际MSCs在人体内的增殖、分化情况。因此研究MSCs在低氧张力环境中增殖、分化的能力将为MSCs能成功移植到体内并发挥作用提供保障。