异丙肾上腺素导致大鼠心肌损伤的酶组织化学及超微结构观察

健康成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠５０只，雌雄各半，体重２１０±２０ｇ。正常对照组１０只，实验组４０只，每只大鼠皮下注射盐酸异丙肾上腺素（ＩＳＰ）５．０ｍｇ／ｋｇ，在注射后４、１２、２４、４８小时，分别处死１０只大鼠，取出心脏，进行（１）ＨＥ染色，（２）组化染色，按Ｐｅａｒｓｏｎ法显示ＳＤＨ，用物镜测微网计算每组ＳＤＨ活性产物的缺失面积；（３）超微结构观察，按立体学图像分析原理，用《多功能医学图像处理系统》微机计算各组电镜片中线粒体体密度值。本实验的观察表明：心肌细胞ＳＤＨ在注射ＩＳＰ后显示出不同的阶段性变化；ＳＤＨ的活性产物缺失部位与ＨＥ染色的心肌坏死部位一致；心肌ＳＤＨ的活性变化与线粒体的损伤同时出现，并与线粒体的破坏程度密切相关。

人胚胎肾小体系膜细胞的发育

对28例(8～28周)人胚胎肾小体的系膜细胞进行光镜和电镜观察.结果表明:原始期肾小体内无系膜细胞.发育期肾小体系膜细胞形成,成熟期肾小体系膜细胞数量增多.胚胎系膜细胞可能来源于原始期肾小体的间充质细胞.系膜细胞具有丰富的粗面内质网,游离核糖体以及大小不等的溶酶体和吞噬体,在胚胎期具有合成系膜基质,参与基膜形成和维护滤过膜通透性的功能.并对毛细血管起支持作用.文内描述了系膜细胞的形态结构并对其功能进行探讨.

干细胞核移植效率及核移植胚胎干细胞

干细胞为一类具有无限的或者永生的自我更新能力的细胞,包括胚胎性干细胞和成体干细胞。胚胎性干细胞有胚胎干细胞、畸胎瘤细胞和原始生殖细胞。成体干细胞主要有骨髓间充质干细胞、造血干细胞、神经干细胞、表皮干细胞、脂肪干细胞等。随着体细胞核移植技术与干细胞培养技术的成熟,两者相结合便产生了核移植来源胚胎干细胞(embryonic stem cells via nuclear transfer,ntES细胞),其不仅用于基础的研究,而且也用于临床医学的组织修复和移植的研究。现就干细胞作为核供体时的核移植效率,ntES细胞系的建立、其性质及诱导分化等的研究进展进行综述。

小鼠胸腺巨噬细胞的免疫组织化学研究

目的研究小鼠胸腺巨噬细胞的形态、分布及其独特亚型。方法利用巨噬细胞的四种单克隆抗体(F4/80、Mac-2、CD32/16、I-A),通过免疫组化双重染色来鉴定小鼠胸腺巨噬细胞表型、分布及形态学的多样性。结果形态学上,我们鉴定出三种类型巨噬细胞:树突状、圆形、扁平形,它们在胸腺具有不同的分布特征。树突状巨噬细胞被四种抗体标记;圆形巨噬细胞在皮髓交界至髓质为F4/80阴性,Mac-2阳性,CD32/16阴性,I-A阳性,与此相反,位于皮质的表达F4/80;扁平形巨噬细胞F4/80和CD32/16阳性,但是Mac-2阴性。结论在胸腺的不同位置,巨噬细胞具有形态学多样性,且具有不同的表型变化,提示在胸腺细胞的发育过程中,不同类型的巨噬细胞可能在胸腺的不同区域起着不同的作用。

犬肝不灌洗低温保存的实验研究——Ⅰ.肝糖原组织化学动态观察

本文是对犬肝进行不灌洗低温保存(25℃、15℃)的系列研究之一。采用临床少用的组织化学方法对反映肝脏物质代谢功能的肝糖原进行动态观察,发现25℃离体保存不灌洗犬肝3小时变化轻微、功能良好;而15℃保存可延长到4小时,证明适当的低温能够使保存效果更好。

国人胚胎肾脏发育的超微结构研究——Ⅰ.肾小体的发育

本文应用光镜、扫描及透射电镜观察20例正常发育的人胚胎肾脏(8周～28周)。结果表明:①肾小体的发育可分为3个阶段—原始阶段、发育阶段和成熟阶段。②胚胎第8周肾小体滤过膜已形成。③胎儿28周皮质浅层仍可见许多原始阶段肾小体。④原始阶段肾小体毛细血管原基为间充质细胞团。⑤肾小体包曼囊脏层细胞连接随其细胞发育成熟而改变位置。

人胚胎干细胞研究进展

胚胎干细胞 (Embryonic stem cell,ES)是从着床前的内细胞团 (ICM)或原始生殖细胞 (PGCs)经体外分离培养而建立的克隆细胞系。ES细胞的特点是只生长、不分化。并保持早期胚胎发育的多能性。人 ES细胞既具有其他哺乳动物 ES细胞的一般特性 ,又有自己的特殊性。人

犬肝不灌洗低温保存的实验研究——Ⅱ-酶组织化学动态观察

本文是对犬肝进行不灌洗低温保存(25℃、15℃)的系列研完之二,仍采用组织化学方法。通过对与肝脏能量关系密切的琥珀酸脱氢酶和乳酸脱氢酶动态观察,进一步证实了离体保存不灌洗犬肝的有效时限(25℃3小时,15℃4小时)。认为该时限能够满足临床完成肝移植的需要,并分析探讨了犬肝离体保存期间功能变化的特点。

NuMA和γ-tubulin在核移植克隆胚胎中的动态变化和作用

核有丝分裂器蛋白(NuMA)和γ-微管蛋白(γ-tubulin)在卵母细胞成熟、受精和核移植胚胎早期发育过程中起重要作用。供体细胞γ-tubulin和NuMA参与了核移植克隆胚有丝分裂纺锤体的组装,NuMA主要参与了纺锤体极的装配和维持,而供体中心体调节核移植胚最初纺锤体的形成。核移植重构胚中心体结构异常经常伴随染色体异常排列、纺锤体结构异常,而中心体分布异常经常伴随异常卵裂。

脑缺血及其再灌注后组织细胞的病理形态学研究

脑血管病是临床常见疾病之一,它与恶性肿瘤、心血管疾病同被视为死亡率最高的三大疾病。在脑血管疾病中,缺血性脑血管病又占多数,据国内文献报道,缺血与出血性脑血管病发生率之比为3.5:1; 国外有人统计缺血性脑卒中约占88％,出血性仅占12％。可见,研究和探讨缺血性脑血管病具有重要的意义。目前,对脑缺血及其再灌注损伤的实验研究多集中在病理生理学方面,而病理形态学方面的研究还不多见,下面本文就这一方面做如下介绍。

大鼠睾丸间质细胞发育的形态学研究及立体学定量分析

对６３例胚胎期至生后不同发育时期Ｗｉｓｔａｒ大鼠睾丸Ｌｅｙｄｉｇ细胞进行光镜、电镜观察及立体学分析。结果表明：１．大鼠睾丸Ｌｅｙｄｉｇ细胞从胚胎１５ｄ出现，１７ｄ初具分泌类固醇激素的结构特点。２．Ｌｅｙｄｉｇ细胞存在两个细胞增殖峰，一个在胚胎１７～１９ｄ，另一个在生后４周。两峰之间有一个低谷（约在生后第２周）。从胚胎至生后，细胞核的体密度逐渐减小，细胞质、线粒体及滑面内质网的体密度逐渐增大，脂滴的体密度呈现较大波动，在一定程度上反映了间质细胞的功能状态。３．生后第２周后，睾丸间质内明确见到明、暗两种细胞。

大鼠胎脑神经细胞与胶原复合体移植对脑损伤的修复

目的:评价胶原蛋白(Collagen)的细胞相容性;研究胶原蛋白(C)与大鼠胎脑神经细胞(FBN)复合体(C-FBN)脑内移植对脑损伤的修复作用。方法:将大鼠FBN与胶原蛋白联合体外培养,进行光镜、扫描电镜观察。并将体外联合培养3～5d的C-FBN(移植前48h培养液中加入BrdU)移植到大脑皮质损伤模型的大鼠脑损伤部位,术后3,6,10,15及30d光镜、BrdU免疫细胞化学染色(ICC)、透射电镜观察脑组织对移植物的反应、移植细胞生长状态及载体在体内的降解情况等。结果:胶原蛋白对FBN生长无不良影响;脑组织对移植物无明显的免疫排斥反应;胶原蛋白与周围脑组织整合好,有血管长入移植物中;载体内有大量存活神经细胞,而且术后各时段都检出BrdU阳性细胞;移植区有突触形成;胶原蛋白海绵吸收、降解快,可诱导组织再生。结论:胶原具有良好的细胞相容性和组织相容性,是神经组织工程的一种较为理想的生物载体材料;生物材料与胎脑神经细胞联合培养移植是治疗脑损伤较有前途的新方法。

大鼠FBN与胶原蛋白细胞载体联合培养及移植治疗脑损伤的实验研究

目的评价胶原蛋白(Collagen)的细胞相容性;研究胶原与大鼠胎脑神经细胞(FBN)复合体(C-FBN)脑内移植对脑损伤的修复作用。方法将大鼠FBN与Collagen联合体外培养,进行光镜、电镜观察,并将体外联合培养4天的C-FBN(移植前48h培养液中加入Brdu)移植到大脑皮质损伤模型的大鼠脑损伤部位,术后3d、6d、10d、15d及30d观察脑组织对移植物的反应、移植细胞生长状态及载体在体内的降解情况等。结果Collagen对FBN生长无不良影响;脑组织对移植物无明显的免疫排斥反应;Collagen与周围脑组织整合好,有血管长入移植物中;载体内有大量存活神经细胞,术后各时段都检出Brdu阳性细胞;Collagen吸收、降解快,可诱导组织再生。结论Collagen具有良好的细胞相容性和组织相容性,是神经组织工程的一种较为理想的生物载体材料;移植的FBN在脑内可以长时间存活。

大鼠睾丸支持细胞的分离纯化与鉴定

目的 简化大鼠睾丸支持细胞的分离纯化方法 ,通过不同方法对Sertoli细胞进行形态学观察鉴定。方法 取鼠龄 16～ 2 2天的雄性Wistar大鼠睾丸 ,采用酶次第消化 ,培养过程中纯化Sertoli细胞 ,并用多种方法对Sertoli细胞进行鉴定。结果 大鼠睾丸支持细胞占培养细胞总数的 90 %以上。HE染色 ,Sertoli细胞突起很多 ,核仁清晰 ,在胞质中可见吞噬物和大小不等的空泡 ;甲基绿 派洛宁染色 ,Sertoli细胞富含RNA ;Feulgen染色和透射电镜 ,核仁周围可见卫星核小体。结论 本实验培养方法可获得更多、纯度高的Sertoli细胞 ,HE染色、甲基绿 派洛宁染色。

大鼠骨髓间充质干细胞分化成心肌细胞的实验研究

目的 采用 5 氮杂胞苷 (5 aza)诱导骨髓间充质干细胞分化成心肌细胞。方法 分离培养骨髓间充质干细胞 ,采用密度为 1 .0 73的percoll分离液分离大鼠骨髓间充质干细胞并进行体外培养和连续传代 ,在第 3代细胞以5 氮杂胞苷进行诱导 ,用免疫组化的方法鉴定心肌特异性肌钙蛋白I的表达。结果 诱导前 ,骨髓间充质干细胞形态均一 ,呈多突起扁平形态 ,诱导后细胞形态发生变化 ,细胞之间形成连接 ,排列方向渐趋一致 ,免疫组化显示表达阳性。结论 5

大鼠胎脑神经细胞与几丁质多孔体、胶原蛋白海绵及明胶海绵生物相容性的实验研究

目的 评价大鼠胎脑神经细胞与几丁质多孔体、胶原蛋白海绵及明胶海绵的细胞相容性 ,为中枢神经组织工程材料的选择提供实验依据。方法 将大鼠胎脑神经细胞分别与几丁质多孔体、胶原蛋白海绵及明胶海绵联合体外培养 ,进行光、电镜观察 ,并测定 3种材料与细胞的吸附率。结果 神经细胞均能在 3种材料上贴附并生长 ,细胞吸附率分别为 31.5 4 %、30 .5 8%和 15 .5 4 % ,并且几丁质有促进细胞生长的作用。结论 几丁质、胶原蛋白及明胶 3种材料 ,尤其是几丁质 ,具有良好的神经细胞相容性 。

CD11c和NLDC-145单克隆抗体标记的阳性细胞的观察

目的 探讨CD11c和NLDC14 5单克隆抗体标记胸腺内何种间质细胞 ,并是否具有特异性。 方法 应用CD11c单克隆抗体及NLDC 14 5单克隆进行标记 ,采用免疫荧光双重染色法及免疫电镜法对胸腺内间质细胞进行观察。 结果 CD11c阳性细胞为指状嵌入突起细胞 (interdigitatingcell,IDC)及少数巨噬细胞。NLDC 14 5阳性细胞为胸腺上皮细胞。 结论 CD11c标记IDC ,NLDC 14 5标记胸腺上皮细胞。胸腺巨噬细胞中存在不同亚群。

大鼠胎脑神经细胞与几丁质多孔体、胶原蛋白海绵及明胶海绵生物相容性的研究(英文)

目的:评价大鼠胎脑神经细胞与几丁质多孔体、胶原蛋白海绵及明胶海绵的细胞相容性,为中枢神经组织工程材料的选择提供实验依据。方法:将大鼠胎脑神经细胞分别与几丁质多孔体、胶原蛋白海绵及明胶海绵联合体外培养,进行光、电镜观察,并测定3种材料与细胞的吸附率。结果:神经细胞均能在3种材料上贴附并生长,细胞吸附率分别为31.54%,30.58%和15.54%,并且几丁质有促进细胞生长的作用。结论:几丁质、胶原蛋白及明胶3种材料,尤其是几丁质,具有良好的神经细胞相容性,有可能作为神经系统组织工程的载体应用于临床。

Reelin信号通路在大脑新皮质形成中的作用

人类大脑皮层发育过程中,大量神经细胞从靠近脑室的增殖区产生并向软脑膜方向迁移,最终形成与人类许多高级功能相关的6层大脑新皮质结构,Reelin-Dab1信号通路在神经细胞迁移中起到了关键的作用。Reelin结合于迁移细胞膜上的极低密度脂蛋白受体(very lowlipoprotein recep-tor,VLDLR)和载脂蛋白E受体2(apolipoprotein E receptor2,ApoER2),磷酸化胞浆内的衔接蛋白disabled1(Dab1),继而与下游信号分子如细胞骨架蛋白等相互作用,指导皮层神经元的正确迁移和定位。本篇综述讨论了Reelin-Dab1信号通路在人类新皮质形成过程中的作用及近几年的研究新进展。

大鼠睾丸支持细胞的分离及培养方法

目的 简化大鼠睾丸支持细胞的分离培养方法 ,提高支持细胞的获取量。方法 取鼠龄 16～ 2 2天的Wistar大鼠 ,去除睾丸被膜 ,剪碎后用 0 .2 5 %胰蛋白酶和 0 .1%胶原酶次第消化。然后将其制成细胞悬液并分装入 2 5cm2 的培养瓶中 ,放置在 39℃ 5 %CO2 的培养箱孵育 48h ,以利于去除精原细胞。取出后冲洗两次 ,换液并移入 37℃ 5 %CO2培养箱进行培养。在此期间每天用倒置显微镜进行观察 ,并于培养第 6天做光镜和电镜观察。结果 在大鼠睾丸支持细胞的分离培养中 ,支持细胞占培养细胞总数的 90 %以上 ,大大提高了支持细胞的获取量。结论 应用本实验方法获取大鼠睾丸支持细胞获得成功并简化了国内现行的方法 。