戒酒灵口服液中葫芦素B、葫芦素E的TLC鉴别和HPLC含量测定

目的：建立戒酒灵口服液中葫芦素B和葫芦素E的TLC鉴别和HPLC含量测定的方法，为建立戒酒灵口服液质量标准提供参考。方法采用TLC法对戒酒灵口服液中葫芦素B和葫芦素E进行定性鉴别，并采用HPLC法对二者进行含量测定。色谱条件：COSMOSIL C18色谱柱（250 mm ×4.6 mm，5μm）；乙腈（A）和0.2％醋酸-水溶液（B）梯度洗脱（0.0～15.0 min：30％～40％ A；15.0～40.0 min：40％～45％A）；检测波长为234 nm；柱温为室温；流速为1 mL／min；进样量为10μL。结果在TLC图中，戒酒灵口服液的供试品溶液分别与葫芦素B、E的对照品溶液在相同位置上显现暗斑。含量测定实验中，葫芦素B和葫芦素E质量浓度分别在0.01574～0.3148 mg／mL和0.003744～0.07488 mg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率分别为97.7％（RSD＝1.29％，n＝6）和98.4％（RSD＝1.68％，n＝6）。戒酒灵口服液中葫芦素B和葫芦素E的平均含量分别为0.36 mg／mL（ RSD＝0.85％，n＝6）和0.033 mg／mL（ RSD＝0.78％，n＝6）。结论此鉴别和含量测定方法简便、快捷、准确、可靠，能有效地对戒酒灵口服液的质量进行控制。

氘代氨基酸合成的研究进展

氨基酸（amino acid）是所有生命物质结构的原始单位，其组成的蛋白质（protein）、多肽（polypeptide）以及体内的酶（enzyme）可以通过组织构造和酶等生理单位经过复杂的生化途径来获取和分配能源，从而维持生命体的本质特征。1931年美国化学家哈罗德·克莱顿·尤里（Harold Clayton Urey）利用光谱检测的方法发现了同位素氘的存在，随之也开始了氘代氨基酸的合成研究。

微RNA-195在大鼠长期脑低灌注诱发的神经元树突退化和神经元死亡中的作用及其分子机制

目的研究微RNA-195(miR-195)对慢性大脑低灌注(CBH)大鼠神经元树突退化及神经元死亡的调控作用及机制。方法在体利用双侧颈总动脉结扎建立大鼠CBH模型,离体进行神经元及脑组织块培养;过表达或抑制miR-195后,利用高尔基染色检测大鼠树突形态,TUNEL染色检测神经元死亡,Nissl染色检测神经元活性,PCR检测miR-195的表达,Western蛋白质印迹法检测N-APP和死亡受体DR6的表达,免疫荧光检测DR6,裂解胱天蛋白酶6和裂解胱天蛋白酶3的表达,荧光素酶双报告基因和微RNA屏蔽反义核苷酸技术检测miR-195对DR6的转录后调控。结果 (1)与假手术组相比,2VO能显著降低大鼠海马和皮质区锥体及颗粒神经元的树突总长度、总数量和sholl分析交叉点数,增加神经元死亡;同时能够抑制miR-195表达,上调N-APP和DR6的表达,激活胱天蛋白酶6和胱天蛋白酶3的裂解;海马局部注射AMO-195和2VO发挥同样作用,而给予miR-195能逆转由2VO或者AMO-195所引起的上述改变;(2)转染miR-195下调DR6的表达,转染AMO-195上调DR6的表达,而应用DR6-ODN屏蔽miR-195和DR6 mRNA的结合位点,可逆转miR-195对DR6的抑制作用;进一步用Luciferase实验证实,miR-195对DR6具有直接靶向调控作用;(3)AMO-195能够促进胱天蛋白酶6和胱天蛋白酶3裂解,抑制神经元突起生长,增加神经元死亡,这些作用能被miR-195以及DR6和N-APP的抗体所抑制。结论 miR-195通过抑制N-APP/DR6/胱天蛋白酶通路延缓CBH引起的神经元树突退化和神经元死亡。