定痫散对实验性癫痫的药理研究

本文利用机械电刺激和药物刺激引起小鼠惊阙。检测中药定痫散和化学致惊剂诱发小鼠最大电体克发作,观察了中药定痫散对这二种急性实验性癫痫的抗惊作用.结果表明:定痫散对二种方法诱发的惊阙均有显著的保护作用.

催乳口服液药理作用的实验研究

催乳口服液是用于治疗哺乳期无乳或缺乳的药物，本文报道了该药对哺乳期仔鼠体重，母鼠乳汁分泌以及母凤乳腺增生的影响。结果表明，该药对动物上述指标均有增进作用。催乳口服液的这些作用具有一定的临床应用价值。本文也为研究药物对泌乳过程的影响提供一个简便可靠的研究方法。

哇巴因和乌头碱诱发豚鼠和大鼠心律失常的离子作用靶点

目的 观察畦巴因和乌头碱对豚鼠和大鼠心肌单细胞离子通道的作用,确定两药诱发心律失常时离子靶点和最佳靶点,建立细胞水平的心律失常模型。方法 用全细胞膜片钳技术记录哇巴因和乌头碱对酶解法分离的豚鼠和大鼠心肌细胞离子通道的作用。结果 5;μmol·L^(-1)哇巴因使豚鼠心肌细胞APD延长、I_(Ca-L)增加、I_k减少、I_(k1)减少;1μmol·L^(-1)乌头碱使大鼠心肌细胞APD延长、I_(Ca-L)增加、I_(to)减少、I_(k1)增加。结论 哇巴因和乌头碱诱发心律失常的离子靶点有APD,I_(Ca-L),I_k,I_(to)和I_(k1)而最佳靶点应为APD,I_(Ca-L),I_k和I_(to)。在单细胞水平分别应用哇巴因和乌头碱诱发豚鼠和大鼠心律失常.具有稳定性高、条件可控、重复性好等优点,可用于药物筛选和机制研究。

蔓荆子活性成分vitexicarpin诱导K562细胞凋亡的机制

目的 探讨vitexicarpin对人癌细胞增殖的抑制活性及其抗癌机制。方法 以SRB法进行细胞毒测定,观察细胞的形态学变化并用流式细胞术分析癌细胞的凋亡率,DNA琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞的DNA梯带,以Westernblotting法进行蛋白质检测。结果 Vitexicarpin对K562等 4种人癌细胞表现了较强的增殖抑制活性。处理后的K562细胞表现出典型的凋亡形态特征、出现了剂量依赖性增加的亚二倍体峰并呈现出典型的DNA梯形条带;PARP和caspase- 3被剪切、胞浆中细胞色素c增高、Bcl 2表达减少、Bax表达未见明显变化。结论 Vitexicarpin通过激活线粒体调控的凋亡通路诱导K562细胞凋亡。

大黄素对豚鼠单个心室肌细胞胞浆游离钙浓度及L-型钙电流的影响

目的 研究大黄素 (emodin)对豚鼠心室肌细胞钙信号的影响。方法 酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测量豚鼠心室肌细胞钙信号的变化。结果 在静息状态下 ,1～10 0 μmol·L- 1 大黄素对 [Ca2 +]i 均无影响 ;对 6 0mmol·L- 1 KCl诱导的外钙内流引起的胞浆钙升高有不同的影响 ,1μmol·L- 1 表现为促进作用 ;10 μmol·L- 1 无作用 ;10 0 μmol·L- 1 则表现为抑制作用。膜片钳研究结果表明 ,1μmol·L- 1 大黄素可明显促进L 型钙电流 ,10 μmol·L- 1 对L 型钙电流无影响 ;10 0 μmol·L- 1 明显抑制L 型钙电流。结论 大黄素对心肌细胞内钙及L

复方丹参滴丸对缺氧心肌细胞内钙离子平均荧光强度的影响

目的 :探讨复方中药丹参滴丸对缺氧 /复氧心肌细胞的保护作用。方法 :培养的乳鼠心肌细胞 ,用钙探针Fluo - 3/AM染色 ,利用激光扫描共聚焦显微镜观察心肌细胞缺氧 /复氧及在复方丹参滴丸保护作用下心肌细胞内钙离子荧光强度变化。结果 :缺氧加丹参保护组 ,细胞内钙离子荧光强度 (12 17 78± 312 0 7)明显低于单纯缺氧组 (15 0 9 43± 5 0 8 5 8) ;缺氧复氧加丹参组 ,细胞内钙离子荧光强度为 (15 6 7 91± 5 77 6 1) ,亦较缺氧再给氧组 (16 17 6± 477 5 3)低。结论 :复方丹参滴丸对缺氧心肌细胞有明显保护作用。

抗心律失常药物作用的新靶点——M_3-R/IK_(M_3)(英文)

目的 研究心脏M3受体 /M3受体介导的钾通道与心律失常的关系,寻找抗心律失常药物的新靶点。方法分别以结扎大鼠左冠状动脉前降支所致急性心律失常模型和膜片钳技术为基础,观察M3受体的干预作用及作用机制。结果 M3受体阻断剂 4DAMP(4 diphenylacetoxy N methylpiperidine methiodide)加重结扎大鼠冠状动脉前降支所致心律失常,而M3受体激动剂胆碱能明显对抗其作用。其他亚型受体阻断剂,M1受体阻断剂 (prienzepine)、M2受体阻断剂(methotramine)和M4受体阻断剂 (tropicamide)对结扎大鼠左冠状动脉前降支所致急性心律失常无影响。在膜片钳实验中发现,胆碱可激活一种延迟整流钾电流(IKM3 ),此电流可被M3受体阻断剂 4DAMP明显抑制。而M1,M2和M4受体阻断剂对胆碱介导的电流无作用。结论 胆碱通过激动心肌M3受体诱发一外向钾电流 (IKM3 ),并在维持心脏离子通道平衡中起重要作用。M3受体 /IKM 可能是抗心律失常新靶点。

蚓激酶的心肌保护作用及机制

目的研究蚓激酶对心肌缺血的保护作用,并进一步探讨其可能机制。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型,观察蚓激酶对心肌缺血的保护作用;应用全细胞膜片钳和激光扫描共聚焦技术,研究蚓激酶对L-型钙电流(ICa-L)和细胞内游离钙离子浓度的影响。结果蚓激酶80,40和20 mg.kg-1剂量组均可缩小心肌梗死面积。膜片钳研究结果表明,当刺激电压为+10 mV时,10和50μmol.L-1蚓激酶使ICa-L降低共聚焦结果显示,在静息状态下,10μmol.L-1蚓激酶对[Ca2+]i无明显影响;但10μmol.L-1蚓激酶对60 mmol.L-1KC l诱导的[Ca2+]i升高却有明显抑制作用,并且在整个实验过程中(240 s)并未出现明显的峰值。结论蚓激酶对大鼠心肌缺血具有保护作用,其机制可能与抑制ICa-L及下调[Ca2+]i有关。

苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇对HERG钾通道表达的影响

由于HERG钾通道在心律失常的发生与治疗中具有双重作用,因此成为近年来研究的热点。本文主要通过免疫荧光化学染色法、激光共聚焦显微镜及Western blotting法分别定性、定量地检测不同浓度的苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇对稳定转染在HEK-293细胞中HERG钾通道表达的影响。研究发现,苦参碱(1μmol·L-1)和氧化苦参碱(1μmol·L-1)均能够促进定位于HERG-HEK细胞膜上的HERG钾通道的表达(n=5,P<0·05),苦参碱(100μmol·L-1)能够抑制定位于HERG-HEK细胞膜上的HERG钾通道表达(n=5,P<0·05),氧化苦参碱(100μmol·L-1)对HERG钾通道表达没有影响,白藜芦醇不影响HERG-HEK细胞中HERG钾通道表达。结果表明,低浓度的苦参碱促进HERG钾通道表达,高浓度的苦参碱抑制HERG钾通道表达,低浓度的氧化苦参碱促进HERG钾通道表达,白藜芦醇不影响HERG钾通道表达。这为苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇抗心律失常作用机制及安全性提供了理论依据。

抗心律失常药物作用最佳靶点研究

目的:通过研究乌头碱、哇巴因致心律失常作用的离子靶点,揭示抗心律失常药物作用的最佳靶点。方法:采用全细胞膜片钳技术研究乌头碱、硅巴因对大鼠单个心室肌细胞动作电位时程(APD)、L-型钙电流(ICa)、钠电流(INa)、内向整流钾电流(IK1)以及瞬时外向钾电流(Ito)的作用。结果:乌头碱(1μM)使大鼠单个心室肌细胞90%复极化动作电位时程(APD90)从给药前的150.23±7.02ms延长至236.03±23.22ms(n=8,p<0.01)。ICa在0mV刺激电位下从-727.9±178.0pA增加至-1082.1±222.2pA(n=6,p<0.01);IK1在-110mV刺激电位下从-2122.0±511.1pA增加到-2536.3±386.5pA;乌头碱(1μM)抑制Ito,在+50mV刺激电压下,Ito从3203.6±617.1pA下降到2809.0±547.3pA。同时增加INa。哇巴因5μM使大鼠心肌细胞APD缩短(APD90从86.3±25.2ms缩短至58.9±20.8msn=5,p<0.01),ICa在+10mV刺激电位下从-1326.9±318.9pA减少到-782.3±395.3pA;使Ik1从-1868.3±187.8pA增加到-2392.8±366.7pA(刺激电压-120mV,n=10,p<0.01);使Ito从1272.7±317.6pA增加到1706.6±485.5pA(刺激电压+60mV,n=5,p<0.01)。结论:乌头碱、哇巴因诱发心律失常发生的活性点或最佳靶点是ICa,INa,IK1,Ikr和Iks。APD缩短或过度延长均可致心律失常。

M_3受体对体外H_2O_2 诱导大鼠心肌细胞凋亡的保护作用(英文)

目的 探讨M3受体激动对H2 O2 诱导的大鼠培养心肌细胞凋亡的作用 ,进一步阐明其机制。方法 末端标记法 (TUNEL)进行细胞凋亡检测 ;免疫组化方法检测Bcl 2和Fas的表达 ;共聚焦显微镜观察 [Ca2 + ]i荧光强度变化。结果 M3受体激动剂胆碱 (10mmol·L- 1 )可减少H2 O2 诱导的心肌细胞凋亡的数量 ,并可增加心肌Bcl 2的表达 ,减少Fas表达 ,抑制H2 O2 诱导的 [Ca2 + ]i荧光强度的升高。但预先应用 4DAMP (10nmol·L- 1 )阻断M3受体可逆转胆碱作用。结论 激动M3受体对H2 O2 诱导的心肌细胞凋亡有保护作用 ,其机制可能与Bcl 2和Fas表达以及下调[Ca2 + ]i有关。

氧化苦参碱心肌保护作用及其作用靶点的研究

目的研究氧化苦参碱对心肌缺血的保护作用,并进一步探讨其可能的作用靶点。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型,观察氧化苦参碱对心肌缺血的保护作用;应用TUNEL法检测氧化苦参碱对心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡指数的影响;应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)研究氧化苦参碱对急性心肌缺血大鼠心肌L型Ca2+通道蛋白mRNA表达的作用。结果氧化苦参碱大、中、小剂量(20、10、5mg/kg)组均可缩小心肌梗死面积;氧化苦参碱大、中剂量能明显提高血清SOD活力、降低MDA水平;TUNEL法证实氧化苦参碱可降低心肌细胞凋亡指数;RT-PCR检测结果表明,急性心肌缺血大鼠心肌L型Ca2+通道蛋白α1CmR-NA表达水平明显高于假手术组(P<0.01),经氧化苦参碱治疗后,心肌L型Ca2+通道蛋白α1CmRNA表达降低(P<0.05)。结论氧化苦参碱对大鼠急性心肌缺血具有保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化,降低大鼠心肌L型Ca2+通道蛋白α1CmRNA表达,从而抑制心肌细胞凋亡有关。

人口服黄连素的药代动力学研究

人口服黄连素的药代动力学研究包丽华李宝馨杨宝峰王慧珍郝晓敏吴少宏李文汉（哈尔滨医科大学药理教研室，哈尔滨１５００８６）中国图书分类号Ｒ９７２；Ｒ９６９．１近年来，许多实验表明黄连素具有抗心律失常和治疗心功能不全的作用〔１，２〕。但传统上认为，黄连素口...

M_3受体激动剂对大鼠和家兔心脏血流动力学的影响

目的 研究胆碱对大鼠和家兔心脏M3 受体的激动作用及其引起的血流动力学改变。方法 经右颈总动脉插管入左心室 ,用八导生理记录仪测定大鼠和家兔血流动力学参数。结果 iv胆碱 10mg·kg-130s后 ,大鼠的心率 (HR)比基础值明显降低 ,10min后恢复。±dp/dtmax和LVSP于给药 10min后明显降低。上述抑制作用可被选择性M3 受体阻断剂 4 DAMP 0 12mg·kg-1所对抗。家兔iv胆碱 5mg·kg-1后 1min ,心率明显降低 ,此作用可被 4 DAMP所对抗。±dp/dt,LVSP亦有下降趋势 ,但无统计学差异。M3 受体阻断剂 4 DAMP对大鼠和家兔血流动力学无明显影响 ,但预先给药可阻断胆碱引起的血流动力学变化。结论 胆碱通过激动心脏M3

大鼠心室肌M_3受体与间隙连接蛋白43作为抗心律失常药物靶点的综合研究

目的在蛋白质分子水平研究心律失常相关蛋白质M3受体与间隙连接蛋白43之间的结构相互作用,并为其作为筛选药物靶点提供依据.方法通过免疫组化结合激光共聚焦显微镜,及免疫沉淀与免疫印迹技术,研究M受体与间隙连接蛋白43的结构性共定位关系.结果证实了大鼠心室肌细胞膜蛋白中M1～M5等5个亚型的存在;观察到大鼠单个心肌细胞膜上M3受体与间隙连接蛋白43的结构性共定位;发现M受体各亚型与间隙连接蛋白43均存在结构整合,且一定浓度离子型去垢剂可破坏M3受体与间隙连接蛋白43的结构整合关系,并进一步发现参与M3受体结构整合的是间隙连接蛋白43的磷酸化形式.结论大鼠心室肌M受体亚型与间隙连接蛋白43的磷酸化形式存在结构性共定位关系,且可被一定浓度离子型去垢剂破坏.

五倍子、蜈蚣对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的 探讨五倍子、蜈蚣对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及意义。方法 用MTT法和3 H-脯氨酸掺入法检测不同药物浓度、作用时间的五倍子和蜈蚣对体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及胶原蛋白合成的影响 ;用光镜和电镜观察五倍子、蜈蚣作用后瘢痕成纤维细胞的形态及细胞器超微结构变化。结果 五倍子和蜈蚣能抑制瘢痕成纤维细胞的增殖及胶原蛋白的合成 (P <0 .0 1) ,其抑制作用与剂量和时间有关。最佳浓度为 10μg/ml,五倍子在作用后 72h ,蜈蚣在作用后 4 8h ,抑制作用最强 ,抑制率分别为 89%和 92 %。五倍子、蜈蚣能明显影响成纤维细胞形态和超微结构 (细胞核、线粒体、粗面内质网等 )。结论 五倍子、蜈蚣能明显抑制瘢痕成纤维细胞增殖和胶原蛋白的合成。

黄连素单用及合用谷维素在家兔及健康志愿者体内的药代动力学研究

目的 :研究黄连素单用及与谷维素伍用在家兔和健康志愿者体内的药代动力学。方法 :反相高效液相色谱法 ,紫外检测。用 3P87程序软件处理数据 ,用t检验法进行显著性检验。结果 :在此色谱条件下 ,黄连素在 2 0～ 64 0 μg·L-1之间呈良好的线性关系 ,其最低检测极限为 2 0 μg·L-1,平均回收率为 (99 85± 3 2 0 ) %。黄连素单用制剂组 ,在家兔体内 :其最高血药浓度cmax为 92 7μg·L-1,tpeak为 0 63h ,AUC0 -∞ 为 4 91 7μg·L-1·h-1;在人体内 :其最高血药浓度cmax为 3 94 7μg·L-1,tpeak为2 3 7h ,AUC0 -∞ 为 3 0 2 8 3 μg·L-1·h-1。黄连素与谷维素合用制剂组 ,在家兔体内 :其最高血药浓度cmax为 2 10 8μg·L-1,tpeak为 0 65h ,AUC0 -∞ 为 110 5 4 g·L-1·h-1;在人体内 :其最高血药浓度cmax为 5 3 4 2 μg·L-1,tpeak为 2 4 5h ,AUC0 -∞ 为4 13 6 9g·L-1·h-1。两组体内的血药浓度 时间曲线无论在家兔及人体均符合一室开放模型。结论 :无论在家兔及人体 ,黄连素与谷维素合用比黄连素单用吸收好 ,说明谷维素可促进黄连素吸收 ,两组之间的AUC0 -∞ 值具有显著差别 (P <0 0 5 ) ,而其它的体内动力学行为基本一致。

青蒿素诱导K562细胞凋亡研究

[目的]研究青蒿素对体外培养的K562细胞的凋亡诱导作用及机制。[方法]MTT法测定药物对K562细胞生长的抑制作用;透射电镜观察药物对K562细胞形态学的影响;流式细胞仪检测经药物作用后的细胞凋亡率;用Rhodamine(Rh123)染色法检测细胞线粒体跨膜电位(Δψm)的变化。[结果]青蒿素对K562细胞生长有明显的抑制作用,细胞经药物作用48小时后的IC50为26.5μmol/L;电镜观察细胞有典型的凋亡形态特征;细胞凋亡率在一定范围内与药物浓度正相关。给药后跨膜电位明显下降。[结论]青蒿素可抑制K562细胞的生长,诱导K562细胞跨膜电位下降而导致细胞凋亡。

青蒿素抗心律失常作用的研究

青蒿素抗心律失常作用的研究王慧珍杨宝峰罗大力张晋廖淑杰１（哈尔滨医科大学药理教研室，哈尔滨１５００８６）中国图书分类号Ｒ９７２．２；Ｒ９７８．６１青蒿素（ａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ）是一低毒、有效的抗疟药〔１〕，在应用其治疗疟疾的同时，发现该药能使窦性心...