应用差异PCR技术研究MTX耐药细胞的遗传学改变

基因扩增是介导细胞产生耐药性的一种普遍性机制。为探讨MTX耐药的小鼠细胞中与耐药机制形成有关的分子遗传学背景 ,应用差异PCR技术 ,检测了MTX耐药细胞中DHFR基因的扩增和过表达 ,并对c myc及p5 3基因状态与dhfr扩增之间的相关性进行了探讨。结果表明 :dhfr的扩增和过表达直接介导细胞耐药。未检测到c myc的扩增和p5 3拷贝数的变化 ;也未检测到c mycmRNA水平的改变 ,但p5 3基因的mRNA水平明显升高 ,显示p5 3可正常表达。这些结果表明dhfr的扩增与这两个候选基因的状态无关 。

我国东北地区3个群体DYS390多态位点的遗传学研究

目的 研究中国群体 Y染色体微卫星位点 DYS390遗传多态性 ,可以用于追溯人类进化上的父系祖先 ,也可以为人类基因组和法医学等研究积累数据。方法 采用 PCR技术扩增微卫星DNA片段 ,再经变性凝胶电泳及银染方法 ,对我国东北地区汉族、蒙古族及朝鲜族 3个群体的1 0 2例男性个体的 DYS390位点的遗传多态性进行了研究。结果 除汉族群体发现 5种等位基因外 ,朝鲜族和蒙古族群体均检出 4种。在汉族群体中 ,我们检出 1例具 2 2 3bp等位基因。等位基因频率分布在汉族、朝鲜族以 2 1 1 bp的频率为最高 ,分别为 0 .439和 0 .451 ;而蒙古族群体则以 2 1 5bp的频率为最高 ( 0 .433)。结论 3个群体之间 DYS390位点等位基因频率无显著性差异 ( Fisher精确概率检验 :P=0 .930 )。 3个群体中 DYS390位点 5种等位基因的分化程度以 2 2 3bp为最高 ,分化程度最低的为 2 1 1 bp。聚类分析表明 3个群体的父系亲缘关系较为密切 ,其中以汉族与朝鲜族之间的遗传距离最近。

实体瘤的细胞遗传学研究

肿瘤的染色体改变对其行为有重要影响,这不仅表现在恶性肿瘤的分型、预后上,对阐明肿瘤的发生机理也有重要作用.直至90年代,占全部肿瘤5%的血液和淋巴系统肿瘤的染色体研究资料已占全部肿瘤的90%,相反,占全部肿瘤80%的实体瘤,其染色体研究资料,仅占全部肿瘤的10%,而这些资料又大部分来源于对实体瘤细胞系的研究,原发性实体瘤的资料仅占全部肿瘤染色体研究资料的1%.

中国东北林蛙(Rana dybowskii)遗传多样性与分化研究(英文)

本文利用11个微卫星多态位点检测东北林蛙(Rana dybowskii)的遗传多样性和种群遗传结构。6个东北林蛙种群的75个个体分布于中国的小兴安岭和长白山地区。11个位点在所有种群中得到的等位基因数为2～10个不等,平均5.6个;平均期望杂合度(HE)为0.572,属于中度多态。基因分化系数(FST)分析表明小兴安岭和长白山地区的种群间遗传分化显著(P<0.001),基于Nei's DA遗传距离构建的UPGMA系统树和AMOVA的结果进一步验证了结论的准确性。因此, 建议将分布于小兴安岭和长白山的东北林蛙划分为两个单独的管理单元加以保护和管理。图2表7参46。

哈尔滨地区汉族群体的Gc亚型的分布

本文采用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术结合改良的磺基水杨酸沉淀法(phar-malyte,pH4.5～5.4),首次检测了Gc亚型在哈尔滨地区汉族群体(n=199)中的分布。基因频率为:GclF=0.4246,GclS=0.2587,Gc 2=0.3065,GcV=0.0101(1A7、1A6、1C2、1A9)。

医学遗传学实验教学的几点体会

从医学遗传学实验课的重要性、授课方式、授课手段以及实验评分方式等方面，阐述了强化医学遗传学实验课改革的几点体会，力求在加强学生独立实验能力、增强学生实验设计以及创新能力方面发挥作用。

肿瘤血管生成研究方法进展

自二十世纪七十年代Jodah Folkman提出肿瘤发展与血管生成相关的理论后,血管生成逐渐成为肿瘤领域的研究热点,并伴随着血管生成研究方法的蓬勃发展,本文对目前血管生成相关研究方法及进展进行了系统性综述,为后续肿瘤血管及肿瘤抗血管生成治疗相关研究提供方法学参考。

辛勤耕耘 桃李芳菲 纪念我国著名医学与人类遗传学家——李璞先生

李璞先生，1928年4月13日出生于天津市武清县亭上村。1939年，在武清县县立小学毕业后赴北京，考入教会育英中学（后更名为北京市立第八中学）。1943年由第八中学转入私立弘达中学，继而考入中南海内私立成达中学高中三年级学习。1945年秋考入了北京大学生物学系，1946年直接转入清华大学生物学系二年级继续深造，在校期间因出色的体育天赋，被选为清华大学篮球代表队队员，并加入清华大学黑桃体育会。1948年担任清华大学篮球代表队队长，黑桃体育会女子篮球队教练。1949年7月，完成了在清华大学的学业之后留校任助教，随即响应国家的号召参加了东北干部队，一个月后被分配到中国医科大学兴山市（现黑龙江省鹤岗市）预科学院生物系任助教。1950年5月，转调到哈尔滨医科大学任教。

类风湿性关节炎相关基因PTPN22 C1858T在中国6个民族中的遗传多态性研究

目的研究与类风湿性关节炎相关的PTPN22 C1858T在中国蒙古族、满族、达斡尔族、哈萨克族、回族和四川汉族6个民族中的遗传多态性。方法应用PCR—RFLP方法检测6个民族共539个个体中P即PTPN22 1858T等位基因频率。结果6个民族中PTPN22 1858T等位基因频率是0．0195（n=539）分布符合Hardy—Weinberg平衡；在蒙古族、满族、达斡尔族、哈萨克族、回族和四川汉族民族中PTPN22 1858T等位基因频率分别是0．0114、0．0143、0、0．0698、0．0216和0，且6个民族间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论获得了中国6个民族PTPN22 1858T等位基因频率数据，为评估中国不同人群对类风湿性关节炎的遗传易感性及流行病学研究提供了基本的数据。

人类与医学遗传学群体与家系资料分析计算机系统的功能与菜单结构（Ⅰ）

本文介绍我们用Ｃ语言编制的人类与医学遗传学群体与家系资料分析计算机系统的菜单结构与各子系统的功能。该系统可用于基因频率与群体分化分析；相关与遗传度分析；疾病关联分析；遗传异质性分析；ＡＧＦＡＰ遗传方式分析。尚可用于通径分析；数量性状的混合分布分析；分离分析与连锁分析等。对人类与医学遗传学及遗传流行病学研究都很有实用价值。

哈尔滨地区汉族群体Tf亚型的调查

本文应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳技术共检查哈尔滨地区710名无血缘关系的献血员的Tf遗传多态性,同时探讨了与性别及ABO血型间的关系,首次报道哈尔滨地区正常人的Tf基因频率,并发现此群体有Tf*C3和Tf*C4基因存在。

外泌体非编码RNA在肿瘤化疗耐药中作用的研究进展

肿瘤的化疗药物耐药是指肿瘤细胞对药物的敏感性降低,使药物的疗效下降甚至无效的现象,是肿瘤化疗失败的重要原因。外泌体是一类细胞外囊泡,由肿瘤微环境中的癌细胞和多种基质细胞分泌。外泌体可通过将它们的内含物(包括DNA、RNA、蛋白质和脂质等)转移到癌细胞中增加化疗药物抗性;同时外泌体的损耗也会逆转某些不利于肿瘤代谢的影响因素,并恢复对化疗药物的敏感性。非编码RNA(ncRNA)为不具备编码蛋白质功能的基因组转录产物,在基因转录、转录后及翻译水平发挥调控作用。研究较多的ncRNA包括微小RNA(microRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)和环状RNA(circRNA)等。近年来的研究发现,外泌体非编码RNA在细胞间通信中起着关键作用,能够影响肿瘤的发生、发展、转移、侵袭、肿瘤微环境以及耐药性。对肿瘤耐药相关的外泌体ncRNA进行研究,已经揭示了外泌体ncRNA在耐药与肿瘤发展中的一些分子机制、靶点通路以及功能。本文对microRNA、lncRNA和circRNA等外泌体ncRNA在肿瘤耐药中的相关功能和作用机制展开综述,希望对研究肿瘤耐药的液体活检分子标志物,理解肿瘤耐药的新机制,肿瘤耐药性的逆转和新化疗药物的开发提供新思路。

染色体外环状DNA的研究进展

染色体外环状DNA(eccDNA)是一类独立于染色体的环状闭合DNA分子,呈现单链或双链,长度主要在1 kb以下,广泛存在于自然界中。目前认为,eccDNA的起源并非随机而是具有明显的序列倾向性,并提示其具有潜在的调控基因表达和影响基因组稳定性和可塑性等作用。eccDNA的生成是一个多机制参与的复杂过程,主要包括染色体微缺失、细胞凋亡和凋亡介导的DNA片段化以及DNA损伤修复等过程。eccDNA染色体起源和亚细胞定位的不同,决定了eccDNA具有调控相关基因表达、产生特异转录本、激活免疫炎症反应等不同的功能。eccDNA在孕妇外周血、成神经管细胞瘤、晚期慢性肾病等不同生理或病理状态下,表现出长度、丰度和表观遗传学等方面的特异性分子特征,同时它的环状结构赋予其较高的稳定性,提示其可能具有成为新型生物标志物的潜力,在液体活检等领域可能具有应用价值。本综述旨在阐明eccDNA的生物学特性、生物学功能以及潜在应用等方面的最新研究进展,为了解eccDNA的发生机制、特征和作用以及为后续研究提供思路。

中国5个民族亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性的研究

本文利用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法，检测了７９名汉族、３０名鄂伦春族、３１名鄂温克族、３１名达斡尔族、２９名壮族随机选择正常个体亚甲基四氢叶酸还原酶基因６７７位核苷酸多态性并加以比较。结果表明，该位点多态频率具有种族差异，国内外１１个人群中，中国达斡尔族与汉族突变型等位基因Ｖ频率最高，分居第一位和第二位，提示亚洲人该频率偏高。

主成分分析与聚类分析在民族分化研究中的应用比较

目的 比较主成分分析与聚类分析两种聚类方法对 13个人群进行分类的结果。方法 采用两种数值分类方法并用Y染色体的 12种单体型的双等位基因频率数据 ,对朝鲜族等 13个人群进行分类 ,分析群体间的关系 ,并阐明民族的起源。结果 两种分类方法得到的结果不尽相同。主成分分析可以减少无关指标的影响 ,但是在简化数据降低维数的过程中又有可能丢失信息。聚类分析充分利用原始数据信息 ,但无法排除无关指标的“噪音”干扰。结论 主成分分析与聚类分析都适宜做多维复杂数据的分类研究 ,但在实际应用中 ,应运用两种分类方法得到的结果结合领域知识给出客观、合理的结论。

介导多药耐药的ABC转运蛋白超家族与MTX耐药性的关系研究

细胞耐药性的产生是导致肿瘤化疗失败的重要因素,尤其是多药耐药是目前研究的一个重点。ABC转运蛋白超家族成员介导药物的外排,与多药耐药密切相关。为了解该家族成员与MTX耐药的相关性,进一步探讨MTX的耐药机制,应用SuperArray基因芯片对MTX耐药前后编码ABC转运蛋白超家族成员的mdr1、mrp1、mrp2、mrp3、mrp5、mrp6和abcg27个基因进行检测,并对MRP1和MRP5蛋白表达进行了验证。结果显示,与MTX耐药性相关的ABC转运蛋白超家族成员主要为多药耐药相关蛋白,其中mrp1和mrp5呈现高表达,并且,在MTX抗性细胞中,MRP5在mRNA及蛋白水平的表达均明显增强,提示其在MTX耐药机制中起重要作用,可能为潜在的药物作用靶点。

中国东北汉族及3个少数民族DYS19和DYS287多态性研究

本文以中国东北汉族（６９例）和鄂温克、鄂伦春、达斡尔３个少数民族人群（１０８例）为研究对象，采用ＰＣＲ产物变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法分析了Ｙ染色体特异性微卫星ＤＹＳ１９的等位基因分布规律。结果显示：东北汉族人群中各等位基因分布较分散Ａ２．９％，Ｂ２６．０９％，Ｃ２６．０９％，Ｄ２８．９８％，Ｅ１５．９４％；东北汉族和３个少数民族人群的等位基因频率有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。我们还通过ＰＣＲ方法调查了以上４个人群中Ｙ染色体特异的Ａｌｕ序列插入位点ＤＹＳ２８７的多态性，在所研究４个人群中没有发现Ａｌｕ序列的插入，即均为ＹＡＰ－的个体。

野生型P53、P16基因协同对肺腺癌细胞系生长抑制作用的研究

为了探讨野生型P5 3基因及P16基因在恶性肿瘤基因治疗中的作用 ,用腺病毒为载体将野生型P5 3基因转入高、低转移的肺腺癌细胞系Anip973、AGZY83 -a和经野生型P16基因质粒转染的高、低转移肺腺癌细胞系Anip973(Anip973P16 )、AGZY83-a(AGZY83-aP16 )。对各组转染细胞进行生长曲线、MTT生长抑制率、原位末端标记、Western -blotting等技术检测分析。结果发现 (1)野生型P5 3蛋白的过表达对上述肺腺癌细胞系均呈现出较强的生长抑制作用。 (2 )野生型P5 3蛋白的过表达对高转移肺癌细胞系Anip973的抑制作用明显高于低转移细胞系AGZY83 -a。 (3)野生型p5 3蛋白的过表达对经野生型P16基因转染的高、低转移的肺癌细胞Anip973、AGZY83-a抑制作用明显高于未经P16基因转染的细胞。野生型P5 3基因可以作为肺腺癌基因治疗的候选基因。肿瘤抑制基因P5 3、P16的联合转染可能是对肺腺癌进行基因治疗的有效手段。

真核生物mRNA应激状态下的帽-非依赖性翻译

在真核生物中,mRNA翻译过程包括起始、延伸和终止。其中,翻译的起始阶段最为重要且复杂,它决定了mRNA能否被有效翻译成蛋白质。根据翻译起始机制的不同,真核生物mRNA翻译可以分为传统的帽-依赖性翻译和替代机制帽-非依赖性翻译。当外部环境的刺激或细胞自身的改变使细胞处于应激状态时,传统的帽-依赖性翻译被抑制或下调,替代机制帽-非依赖性翻译得以启动,以保证翻译的顺利进行。真核生物在应激状态下为了维持蛋白质合成的需求,采用多种翻译起始机制来实现帽-非依赖性翻译。其中较常见的是IRES(internal ribosome entry site)、m6A修饰和CITE(cap-independent translation enhancer)所启动的翻译。这些机制允许核糖体在mRNA的特殊区域内部进行启动,而不依赖于传统的m7G帽结构。通过这些机制,真核生物可以在应激状态下仍然进行蛋白质合成,以满足细胞的需要。本文在总结传统帽-依赖性翻译研究进展基础上,着重介绍IRES、m6A和CITE所启动的帽-非依赖性翻译,为更好地探索细胞应激状态下的翻译机制提供参考,为未来的翻译研究和应用提供更多的思路。