手术切除荷瘤淋巴结后小鼠肺组织内CD45^+、CD68^+、CD163^+和CD11b^+免疫细胞表达的变化

目的:探讨手术切除荷瘤淋巴结对小鼠远隔脏器肺组织内免疫细胞表达的影响。方法:将小鼠B16F10黑色素瘤细胞接种至小鼠髂下淋巴结(SiLN),15天后手术切除荷瘤淋巴结,所有小鼠分为手术切除SiLN组和未切除SiLN组(对照组)。应用HE及Elastic-Masson(EM)胶原纤维染色观察小鼠肺组织的一般形态结构和胶原纤维的变化;免疫组化染色观察肺组织中CD45^+、CD68^+、CD163^+和CD11b^+免疫细胞表达变化。结果:与对照组相比,手术切除SiLN组小鼠肺组织炎细胞浸润显著增加;血管周围胶原纤维稀疏;CD45^+总免疫细胞、CD68^+巨噬细胞、CD163^+M2型巨噬细胞和CD11b^+髓源性抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)表达均显著增加(P<0.05)。结论:手术切除荷瘤淋巴结促进小鼠肺组织内CD163^+M2型巨噬细胞、CD11b^+MDSCs的表达增加,可能有利于远隔脏器肺组织内支持肿瘤细胞定植的炎性微环境的形成。

小鼠荷瘤淋巴结切除促进肺内跨内皮迁移相关分子CCL4、ICAM-1和VCAM-1的表达

目的检测切除小鼠荷瘤淋巴结后肺组织中与白细胞跨内皮迁移相关的趋化因子和黏附分子的表达,同时观察网状纤维改变以及波形蛋白(vimentin)及基质金属蛋白酶9(MMP9)表达情况,揭示它们在肺内预转移微环境形成中的变化及作用。方法将B16F10黑素瘤细胞接种至小鼠髂下淋巴结,20只小鼠被平均分为手术切除荷瘤淋巴结和未切除荷瘤淋巴结组(对照组)。15 d后手术切除荷瘤淋巴结;切除3 d后,收集小鼠肺组织。应用镀银染色观察肺网状纤维变化;采用Western blot法检测CC趋化因子配体4(CCL4)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、vimentin及MMP9的表达。结果与对照组相比,切除荷瘤淋巴结组肺组织内MMP9、vimentin表达明显增高;网状纤维断裂明显,其面积百分比降低,CCL4、ICAM-1、VCAM-1表达均显著增加。结论切除小鼠荷瘤淋巴结促使肺组织内ICAM-1、VCAM-1、CCL4、MMP9和vimentin的蛋白表达显著增加,有利于炎细胞黏附、跨越血管内皮进而形成炎性微环境。