沉默整合素α6通过激活FOXO1信号通路促进人牙髓干细胞的成牙本质向分化

目的:探讨沉默整合素α6(integrinα6,ITGA6)是否通过激活FOXO信号通路影响人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)的成牙本质向分化。方法:利用课题组前期构建的ITGA6沉默慢病毒干扰hDPSCs,通过Real-time PCR和Western blot验证干扰效率,同时检测空载组(sh-NC)和ITGA6沉默组(sh-ITGA6)的FOXO信号通路活性。然后用AS1842856抑制FOXO1,经矿化诱导7 d后进行Western blot和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色来观察hDPSCs的成牙本质向分化情况。结果:Real-time PCR和Western blot结果显示构建的ITGA6沉默慢病毒能有效干扰hDPSCs中ITGA6的表达;与sh-NC组比,sh-ITGA6组FOXO1在mRNA水平表达上调(P<0.05),同时Western blot结果显示其在胞核表达量增加(P<0.05);Western blot检测成牙本质向分化标记物显示,sh-ITGA6组牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和牙本质基质蛋白-1(dentin matrix protein-1,DMP-1)表达上调(P<0.05),经AS1842856处理sh-ITGA6后,DSPP和DMP-1表达下降(P<0.05);ALP染色结果显示,sh-ITGA6组ALP染色明显加深,经AS1842856处理sh-ITGA6后,ALP染色变浅。结论:沉默ITGA6通过激活FOXO1信号通路促进hDPSCs的成牙本质向分化。

比较不同冲洗液对根管内氢氧化钙的清除效果及根管牙本质显微硬度的影响

目的:比较5种不同根管冲洗液对根管内氢氧化钙(CH)的清除效果及对牙本质显微硬度的影响。方法:在70颗单根管离体牙的根管壁上制备凹沟,10颗牙齿作为阴性对照组不导入CH糊剂,60颗牙齿导入CH糊剂,封药1周。1周后,10颗牙齿作为阳性对照组不去除CH糊剂,其余50颗牙齿根据清除氢氧化钙所使用的冲洗液不同随机分成5组(n=10),体视显微镜和SEM观察CH残余量,显微硬度计测试根管壁显微硬度。结果:10%柠檬酸、17%乙二胺四乙酸(EDTA)及1 g/L银杏叶提取物(EGb)溶液对CH的清除效果优于蒸馏水和2.5%NaClO溶液(P<0.05)。阴性对照组显微硬度值大于其余各组(P<0.05),其他组间比较无明显差异(P>0.05)。结论:5种冲洗液均不能完全清除根管内CH,但柠檬酸、EDTA及EGb溶液清除效果较好。CH封药1周降低根管牙本质显微硬度,冲洗液则无明显影响。

不同粘接系统联合硅烷偶联剂对陈旧性复合树脂粘接效果的影响

目的:研究不同粘接系统或联合硅烷偶联剂对陈旧性复合树脂粘接粘接强度和微渗漏的影响。方法:使用纳米型复合树脂制作树脂块,并储存在(37±1)℃的蒸馏水中2个月,表面经金刚砂车针打磨后,按表面处理方式不同分为5组:A:对照组(不进行化学处理);B:两步法自酸蚀粘接系统(Clearfil SE Bond,CSE组);C:硅烷偶联剂预处理+两步法自酸蚀粘接系统(硅烷+CSE组);D:通用型粘接系统(Single Bond Universal,SBU组);E:硅烷偶联剂预处理+通用型粘接系统(硅烷+SBU组)。上述表面处理后,使用新鲜树脂分别进行充填、固化。使用低速金刚石切割机分别沿两个垂直方向纵向片切样本,每组制备10个横截面积为1.0 mm2的试件条,进行微拉伸测试,并在体视显微镜下观察样本断裂模式。将粘接完成后的样本,通过亚甲基蓝染色法观察粘接界面的微渗漏。结果:实验组微拉伸粘接强度显著大于对照组(P<0.05),硅烷可以增大新旧树脂间粘接强度,且硅烷+SBU组微拉伸粘接强度最大(P<0.05)。体视显微镜下显示实验组样本断裂模式均以内聚断裂为主,对照组多为粘接界面断裂。实验组新旧树脂间微渗漏显著小于对照组(P<0.05);4个实验组新旧树脂间微渗漏无明显差异(P>0.05)。结论:表面使用粘接剂或联合硅烷偶联剂均可显著提高陈旧性树脂与新鲜树脂之间的粘接强度,并降低新旧树脂间微渗漏;硅烷偶联剂联合通用型粘接剂修复效果更佳。

口腔LED光固化灯职业性暴露对小鼠眼睛影响的实验研究

目的研究发光二极管(light emitting diodes,LED)光固化灯职业性暴露对小鼠眼睛的影响。方法 12只8周龄清洁级C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常对照组(n=6)及LED光固化灯照射组(n=6)。LED光固化灯照射组小鼠暗适应24 h后开始实验,每天照射3 h,连续照射3 d,正常对照组小鼠饲养于正常环境下。LED光固化灯照射前后进行光学相干断层扫描成像(Optical coherence tomography,OCT)来研究小鼠视网膜外核层厚度的变化,采用苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosin staining,HE)评估LED光固化灯照射后小鼠视网膜组织形态改变。结果 OCT结果显示,LED光固化灯照射后小鼠视网膜外核层厚度明显变薄(P<0.05)。HE结果显示,LED光固化灯照射使小鼠视网膜形态学发生改变,感光细胞间紧密连接遭到破坏。结论口腔LED光固化灯照射会导致小鼠视网膜外核层变薄及光感受器损伤。