护理本科生临床实习教学的改革与实践

目的探讨护理本科生临床实习教学的改革方法与效果。方法专职教师撰写临床实习专科教学大纲,录制专科护理技能操作微课视频,设计编写临床综合护理案例,利用示教室组织护理本科实习生进行情境模拟,采用讨论法结合讲授法使学生掌握专科知识与技能后再进行临床实习,每周答疑或讲课1次,鼓励并授权学生以自学为主、主动实习的行为。出科前用问卷评价学生自主学习能力,比较改革前后学生的自主学习能力评分。结果教学改革后,学生自主学习能力总分及各维度得分均高于改革前(P<0.05)。结论临床实习教学改革激发了护理本科实习生的实习热情,提高了学生的自主学习能力。

肿瘤浸润淋巴细胞的体外培养及临床应用研究

目的:研究肺癌患者胸腔积液中肿瘤浸润淋巴细胞(tumorinfiltratinglymphocytes,TIL)对瘤细胞的杀伤活性及其表型变化,并对其回输后毒副反应及患者免疫功能进行观察。方法:应用贴壁法分离恶性胸腔积液中TIL,并经rIL2诱导培养;用间接免疫荧光法测定CD3+、CD4+和CD8+比例;应用3HTdR释放法测定TIL对自体瘤细胞和801D细胞的杀伤作用;用活化的自体TIL注入患者胸腔内,观察胸腔积液变化。结果:第21天时CD3+和CD8+比例明显提高,而CD4+比例和CD4+/CD8+比值变化不大;对自体瘤细胞和801D细胞的杀伤力明显提高;40例自体回输治疗胸腔积液的患者,有效率为72.5%,且一般状况好,毒副反应小,辅助检查无异常改变,免疫功能增强。结论:肺癌TIL过继免疫治疗对恶性胸腔积液患者是一种安全、有效的免疫治疗方法。

巨大甲状腺肿外科手术治疗体会

目的 总结巨大甲状腺肿外科手术治疗的体会.方法 回顾性分析115例巨大甲状腺肿患者的临床资料.115例患者胸片显示气管均有不同程度的受压、偏曲,明显呼吸困难者10例（8.69%）.良性为102例（88.7%）,恶性 13例（11.3%）,115例行甲状腺次全切除或甲状腺全切,姑息切除术.结果 术中大出血2例（1.73%）,术后声音嘶哑3例（2.6%）.术后手足麻木3例（2.6%）,表现为双手麻木,严重抽搐.5例术后作气管切开,2例术中作气管悬吊,无手术死亡.结论 充分的围手术期准备、甲状腺血管的处理技巧、加强术中对神经和甲状旁腺的保护、呼吸困难的及时处理是手术治疗的关键.

神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤

背景:近年来,神经干细胞移植已成为治疗神经退行性疾病和中枢神经系统损伤的研究热点。目的:探讨神经干细的定向分化调控机制和神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤的研究进展。方法:以"neural stem cells,stem cell transplantation,ischemic brain injury"为检索词,检索Pubmed数据库1990至2012年相关文献;以"神经干细胞,干细胞移植,缺血性脑损伤"为检索词,检索CNKI数据库2005至2012年相关文献。分析神经干细的定向分化调控机制和神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤的内容,排除重复研究。结果与结论:①体外分离培养的神经干细胞有胚胎来源、脐血来源和成体来源,主要采用机械分离法和胰酶消化法进行分离。②目前体外培养的神经干细胞分离鉴定的标记物有巢蛋白、波形蛋白1、5-溴脱氧尿嘧啶核苷、神经元特异性烯醇化酶等。③神经干细胞的分化调节是通过正负双重作用实现的,负性调节是通过对称性的分裂来增加神经干细胞数量,包括Notch信号途径和一些生长因子等。正性调节诱导神经干细胞分化,包括参与细胞合成的骨形态发生蛋白信号途径等。④神经干细胞移植的时间窗选择在实验动物脑缺血两三周后,时间过早和过晚均不适合细胞的存活。神经干细胞通过脑立体定位仪直接进行脑内移植治疗大鼠局灶性脑缺血损伤,移植后可见细胞在局灶性脑缺血大鼠脑室内和梗死中心均可长期存活,并可广泛迁移,移植神经干细胞后观察到其运动行为学评分有明显提高。缺血性脑卒中的神经干细胞移植治疗还存在一些问题需要解决,未来的临床应用前景广阔,是缺血性脑卒中患者的新希望。

细胞自噬在肿瘤中作用的研究进展

自噬(autophagy)是广泛存在于真核细胞中的基本生命现象,是程序性细胞死亡形式之一,近年来备受关注。自噬活性的变化与人类肿瘤的发生、发展密切相关,并可从多个层面影响肿瘤进程,包括肿瘤细胞凋亡、血管生成及抗肿瘤治疗等。本文就自噬及其在肿瘤中作用的研究进展进行简要综述。

苏木提取物对心脏移植大鼠T淋巴细胞亚群的免疫抑制和对心肌的保护作用

目的 探讨苏木不同提取物对心脏移植后大鼠T淋巴细胞亚群的免疫抑制和对心肌的保护作用。方法 应用大鼠腹腔同种异位心脏移植模型。受体来源于SD大鼠,供体Wistar大鼠。实验分为苏木醇提物组,苏木酯提物组、苏木水提物组、心脏移植组、对照组。术前2天给药,术后第7天采血,应用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群的变化,并检测心肌组织的病理改变。结果 苏木醇提物及水提物可抑制大鼠心脏移植后外周血CD4+／CD8+的升高,并可减轻心脏移植后急性排斥反应所引起的心肌病理损害。结论在苏木的不同提取物中,苏木醇提物和水提物对心脏移植后发生的急性免疫排斥反应有明显的抑制作用,对心肌有明显的保护作用。

纤维蛋白胶塑形、异体微粒软骨脱细胞基质支架的人工软骨研究

目的:利用软骨微粒脱细胞基质这种新型支架材料及纤维蛋白胶,体外构建可塑形及具有良好生物相容性的组织工程化软骨。方法:制备绵羊关节软骨微粒脱细胞基质并与体外扩增的异体关节软骨细胞及纤维蛋白胶混合,塑成圆柱形,体外培养。结果:软骨微粒脱细胞基质及纤维蛋白胶与异体软骨细胞有良好的生物相容性,软骨细胞生长和分泌功能良好,塑成的复合物具有一定的硬度和弹性。结论:塑成的圆柱形软骨细胞-异体软骨微粒脱细胞基质-纤维蛋白胶复合物可于体外形成软骨样组织,可进一步应用于体内修复关节软骨缺损。

尿道下裂术后并发症的预防护理

目的探讨护理干预对预防尿道下裂术后并发症的效果。方法将78例尿道下裂患儿随机分为两组。对照组38例采用常规护理方法。观察组40例于术前5d用1∶5000高锰酸钾溶液浸泡患处和1∶20碘伏棉球擦拭会阴,术后采用弹力绷带固定阴茎伤口,生理盐水5ml加庆大霉素8万U从尿道支架管滴入,红外线局部照射伤口并配合舒适护理。结果观察组术后并发症发生率为7.5%,对照组为26.3%,两组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论实施综合护理干预有助于预防尿道下裂手术患儿术后并发症的发生。

核蛋白1在肿瘤发展过程中的作用及相关研究进展

核蛋白1（NUPR1）,又称为p8、com1,是在大鼠胰腺炎模型中首先鉴定得到的小分子核蛋白,其在急性胰腺炎的发展过程中,可被强烈而迅速地诱导表达。在应激条件下,NUPR1表达通常呈上调趋势,说明NUPR1可以被宿主体内的微环境所影响。

转基因技术在组织工程体外软骨组织培养中的应用

目的:研究骨形态发生蛋白-2重组腺病毒(Ad-BMP-2)转基因对骨髓基质细胞(mesenchymalstemcell,MSC)与纤维蛋白凝胶构成的复合物体外培养的影响。方法:Ad-BMP-2转染原代培养的MSC,通过细胞生长曲线、免疫组化、甲苯胺蓝染色透射电镜观察转基因MSC的BMP-2和CollagenⅡ及蛋白多糖表达。结果:转基因MSC经纤维蛋白体外三维培养后免疫组化和甲苯胺蓝染色呈阳性;电镜显示细胞生长良好,有基质合成。结论:Ad-BMP-2能够通过促进MSC分泌BMP-2诱导CollagenⅡ和蛋白多糖的表达,在纤维蛋白三维支架中形成软骨基质。

胰十二指肠切除术后胃瘫的治疗体会

目的探讨胰十二指肠切除术(pancreaticoduodenectomy,PD)后胃瘫(postoperative gastroparesis syn-drome,PGS)的病因、发生机制及治疗方法。方法回顾性分析7例胰十二指肠切除术后PGS的临床资料及诊疗过程。结果PGS多发生于胰十二指肠切除术后7～14 d,经分阶段营养支持、改善胃肠动力等保守治疗,PGS均在术后4周内消除。结论胰十二指肠切除术后PGS的病因复杂,采取保守支持治疗是治疗胰十二指肠切除术后PGS的有效手段,分阶段营养支持是治疗的重要措施,不宜采用手术治疗。

急性胰腺炎发病机制研究进展

急性胰腺炎(acutepancreatitis,AP)一直是基础与临床研究的热点与难点,其发病机制至今尚未完全阐明。随着研究的不断深入,除了传统的“胰酶自身消化”学说外,白细胞过度激活炎性因子级联瀑布效应、胰腺微循环障碍、细胞凋亡、肠道细菌易位、“二次打击”学说等多种理论丰富了人们对AP发病机制的认识。本文就AP发病机制的研究进展作一综述。

软骨微粒脱细胞基质微载体的制备及其特性研究

目的制备以软骨微粒脱细胞基质为原料的微载体,为体外大量培养软骨细胞提供实验依据。方法利用胰蛋白酶等试剂制备直径为0.100～0.154mm的软骨微粒脱细胞基质并寻找胰蛋白酶的最佳含量及时间。取绵羊的新鲜膝、肘关节软骨600g,随机分为5组,每组8例,用不同含量的胰蛋白酶作用2～36h。标本进行大体观察,苏木精-伊红、胶原染色,光镜及扫描电镜观察,密度、含水量测定。结果微粒软骨脱细胞基质微载体无抗原性成分存在,主要含有胶原,氨基葡聚糖等混合细胞外基质成分。微粒呈不规则形,表面粗糙。软骨微粒脱细胞基质干重密度为0.6547g/mL,湿重密度为1.0627g/mL,含水量为72%。胰蛋白酶的最佳含量为0.25g/L,最适作用时间为(18.3±1.6)h。结论以软骨微粒为原料的微载体具有天然细胞外基质成分,是一种体外培养软骨细胞的良好载体。

纤维蛋白凝胶基质材料用于组织工程修复兔关节软骨缺损与Ⅰ型胶原凝胶和混合凝胶性能特征的比较

目的:观察纤维蛋白凝胶、Ⅰ型胶原凝胶、混合凝胶3种不同生物型细胞外基质用于组织工程修复兔关节软骨缺损形态学及性能特征比较。方法:实验于2002-01/2003-12在哈尔滨医科大学附属二院实验中心进行。6月龄日本大耳白兔48只。①人工软骨制备:传代培养兔骨髓基质干细胞,与纤维蛋白原凝胶、Ⅰ型胶原凝胶、纤维蛋白-Ⅰ型胶原混合凝胶混合制成3种人工软骨。②模型制备与动物分组:兔麻醉后取膝关节外侧切口,显露髌股关节面,作直径4.5mm,深3mm转孔获得关节软骨缺损模型。48只兔分为4组,每组12只。纤维蛋白凝胶组,缺损区充填骨髓基质细胞纤维蛋白凝胶;Ⅰ型胶原凝胶组,充填骨髓基质细胞Ⅰ型胶原凝胶;混合凝胶组,充填骨髓基质细胞纤维蛋白-Ⅰ型胶原混合凝胶;空白对照组,不充填材料。术后各组动物膝关节不予外固定,自由活动。③标本观察:分别于4,8,12周每组取3只(6侧膝关节)麻醉后处死,行膝关节大体观察,选择损伤区股骨干切片作苯胺蓝、苏木精-伊红染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色采用光学显微镜观察,并按改良的Seller评分(0分为正常关节,分数越高表示关节退行性变越严重)进行量化评分。结果:①各组兔膝关节4周及12周时大体形态学观察:4周时:纤维蛋白凝胶组、混合凝胶组为淡粉色半透明的软骨样结构,Ⅰ型胶原凝胶组、空白对照组多数缺损区仍呈暗红色,表面不规则。12周时:纤维蛋白凝胶组、混合凝胶组修复组织与周围软骨平滑过渡高度一致、光泽度较正常软骨略差;Ⅰ型胶原凝胶组、空白对照组修复区多数不平整,中央凹陷且存在龟裂。②各组兔股骨组织切片观察结果:纤维蛋白原凝胶、混合凝胶组各时间点组织化学染色均显著优于Ⅰ型胶原凝胶组和空白对照组;纤维蛋白原凝胶、混合凝胶组无显著差异。③组织切片的Seller评分结果:纤维蛋白凝胶组、混合凝胶组在8,12周均显著低于Ⅰ型胶原凝胶组与空白对照组犤8周:(19.7,20.5)分比(27.0,25.1)分,P<0.05;12周:(7.4,9.1)分比(18.2,20.0)分,P<0.05犦。结论:纤维蛋白凝胶作为支架材料修复缺损软骨,材料成分接近透明软骨,优于Ⅰ型胶原,与纤维蛋白Ⅰ型胶原混合物无显著差异,可作为理想的细胞外基质用于组织工程修复关节软骨缺损。

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂早期干预大鼠急性胰腺炎的疗效

目的观察急性胰腺炎大鼠血浆血管紧张素Ⅱ水平变化并探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂——缬沙坦(Valsartan)对其的早期干预作用。方法 54只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、急性胰腺炎组、缬沙坦干预组。采用胆胰管逆行注射法制做大鼠急性胰腺炎模型。缬沙坦干预组在制模后10 min给予缬沙坦 40 mg/kg。在病程不同时间点测定大鼠血清淀粉酶、脂肪酶、血浆血管紧张素Ⅱ水平,并观察胰腺组织病理学改变。结果急性胰腺炎组随病变进展,胰腺炎病理由水肿向出血坏死发展,血管紧张素Ⅱ水平持续升高。缬沙坦干预组血浆血管紧张素Ⅱ水平较急性胰腺炎组明显升高(P<0．05),其血清淀粉酶、脂肪酶水平,胰腺组织病理学评分较急性胰腺炎组明显下降(P<0．05)。结论早期应用缬沙坦可使急性胰腺炎大鼠血浆血管紧张素Ⅱ水平明显升高,对大鼠急性胰腺炎有一定的治疗作用。

青藤碱对肺癌A549细胞增殖的抑制作用

目的:研究青藤碱对肺癌A549细胞增殖的影响及其机制。方法:以不同浓度青藤碱分别处理体外培养的A549细胞,采用MTT法检测24h、48h、72h后A549细胞的增殖状态,流式细胞仪测定细胞凋亡;细胞免疫组化检测Cox-2蛋白表达量。结果:以0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、2.5、5.0、10.0mmol/L青藤碱作用于A549细胞后,细胞增殖明显受到抑制,呈时间和剂量依赖性。青藤碱处理组细胞早期凋亡率较对照组升高,呈时间和剂量依赖性;Cox-2蛋白表达明显抑制。结论:青藤碱在体外能有效抑制肺癌细胞增殖。

甲状腺手术中喉返神经的显露方法及疗效研究

目的分析甲状腺手术中喉返神经的显露对预防喉返神经损伤的效果。方法150例甲状腺疾病患者采用解剖显露喉返神经方法行甲状腺腺叶切除或次全切除，解剖显露喉返神经270条。结果术中发现喉不返神经6例，其中喉返神经损伤2条，术后恢复良好，顺利出院。结论在甲状腺良恶性疾病手术中，熟悉喉返神经正常解剖及变异，常规解剖和显露可大大降低并发症，减少喉返神经的损伤。

γ-干扰素对兔胆总管愈合过程中细胞增殖和转化的影响

目的观察γ-干扰素(IFN-γ)对兔胆总管损伤愈合过程中核增殖抗原(PCNA)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,为临床防治胆管狭窄寻求一条新的途径。方法制作兔胆总管损伤修复模型16只,随机分为实验组和对照组各8只,实验组每天肌注IFN-γ 10万IU/kg,对照组肌注等体积生理盐水,8周后处死动物,取材,行HE染色,PCNA和α-SMA免疫组化染色,图像分析仪定量分析。结果实验组细胞增殖指数和α-SMA平均阳性染色面积百分比与对照组相比差异均有显著性意义。结论γ-干扰素通过抑制胆管壁PCNA和α-SMA的表达,抑制胆管壁细胞增殖和转化。

甲状腺手术术后伤口出血的诊疗体会

我院2000年至2011年甲状腺手术1325例中发生术后出血12例,发生率为0.91%,报告如下. 临床资料 1.一般资料：本组12例,其中男1例,女11例,年龄25～67岁,结节性甲状腺肿11例,甲状腺癌1例,再次手术者10例,放置引流管8例,皮下出血1例,伤口活动性出血11例.颈丛麻醉2例,全麻插管10例.

^(99m)Tc标记抗CEA单抗C50在直肠癌TME术中的应用

目的探讨99mTc标记的单克隆抗体(monoclonalantibody,McAb)C50在直肠癌手术中的应用价值。方法将99mTc标记抗CEA单抗C50在直肠镜直视下注射于32例直肠癌患者癌周粘膜下;给药后次日行全直肠系膜切除术(to-talmesorectalexcision,TME),术中使用手持式γ探测仪(gamma-detectingprobe,GDP)对肿瘤、区域淋巴结、手术切缘、直肠系膜等靶部位(target,T)进行放射性检测,以正常肠壁为对照本底(normaltissue,NT),以T/NT≥3为判别直肠系膜、肠壁浸润及淋巴结转移的标准;全部标本行病理学检验;病理学阴性的淋巴结标本进行免疫组化染色(S-P法)寻找微转移灶。结果GDP探测判别肿瘤的灵敏度为93·75%,判别切缘的特异度为95·15%。判别淋巴结的灵敏度及特异度分别为93·10%、90·10%,与临床判别相比差异有显著性意义(P<0·05)。免疫组化证实RID能够检出部分病例中常规病理检验未发现的淋巴结微转移灶。结论应用99mTc标记抗CEA单抗C50对直肠癌原发病灶及转移灶进行放射免疫检测,有较高的特异性和亲和力,可准确区分肿瘤及正常组织并探测出微小转移病灶,并从肿瘤免疫学方面证实了TME的科学性。