软骨微粒脱细胞基质微载体的制备及其特性研究

目的制备以软骨微粒脱细胞基质为原料的微载体,为体外大量培养软骨细胞提供实验依据。方法利用胰蛋白酶等试剂制备直径为0.100～0.154mm的软骨微粒脱细胞基质并寻找胰蛋白酶的最佳含量及时间。取绵羊的新鲜膝、肘关节软骨600g,随机分为5组,每组8例,用不同含量的胰蛋白酶作用2～36h。标本进行大体观察,苏木精-伊红、胶原染色,光镜及扫描电镜观察,密度、含水量测定。结果微粒软骨脱细胞基质微载体无抗原性成分存在,主要含有胶原,氨基葡聚糖等混合细胞外基质成分。微粒呈不规则形,表面粗糙。软骨微粒脱细胞基质干重密度为0.6547g/mL,湿重密度为1.0627g/mL,含水量为72%。胰蛋白酶的最佳含量为0.25g/L,最适作用时间为(18.3±1.6)h。结论以软骨微粒为原料的微载体具有天然细胞外基质成分,是一种体外培养软骨细胞的良好载体。

汉坦病毒通过线粒体途径诱导Vero E6细胞凋亡

目的探讨汉坦病毒诱导非洲绿猴肾细胞Vero E6凋亡的机制。方法汉坦病毒感染VeroE6细胞后应用Western blot检测胞浆内汉坦病毒核心蛋白(N蛋白)的表达情况,应用DNA-ladder和流式细胞术检测汉坦病毒感染Vero E6细胞诱导凋亡的发生,用Western blot方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Cyt-c及Caspase-3的表达情况。结果汉坦病毒感染Vero E6细胞后,在胞浆内检测出汉坦病毒N蛋白。流式细胞仪检测到凋亡峰,DNA电泳可见典型的DNA梯带。Western blot显示随着感染时间的延长,Cyt-c蛋白及Caspase-3酶原活化片段表达增加,Bcl-2蛋白表达减少。结论汉坦病毒通过线粒体途径诱导Vero E6细胞凋亡。