MiR-146a在神经系统疾病中的作用及研究进展

MicroRNAs(miRNAs)是一类18~25个核苷酸长度的小分子非编码RNA,其可以在转录后水平调节基因表达,神经系统各组织器官表达大量的miRNA。miR-146a作为人类中枢神经系统中表达最为丰富的miRNAs之一,现已经被证实其在多种神经系统疾病中表达发生变化,并通过以多种基因为靶点调控转录后的病理通路,进而参与疾病的发生发展。本文对miR-146a在不同种类神经系统疾病中的调控作用和相关机制进行综述。

LncRNA、AFAP1-AS1表达与重症肌无力发病相关性研究

目的探讨lncRNA肌动蛋白丝相关蛋1-反义RNA1(AFAP1-AS1)在重症肌无力(MG)患者中的表达水平及其临床意义。方法收集2020年1月至2021年12月期间收治的35例MG患者和35例健康体检者的外周静脉血,提取外周血单个核细胞(PBMCs)中的总RNA,应用RT-PCR方法检测AFAP1 AS1的表达水平,并进一步分析在MG各亚组中AFAP1 AS1的表达水平,并分析AFAP1-AS1与定量MG评分(QMGS)之间的相关性。结果MG患者PBMCs中AFAP1-AS1的表达水平(1.498±1.136)显著高于健康对照组(0.619±0.707),差异有统计学意义(Z=-3.46,P=0.001)。AFAP1-AS1的表达水平在胸腺增生亚组(2.212±0.314)中明显高于胸腺正常组(1.076±0.197),差异有统计学意义(t=3.228,P=0.0028),在性别亚组及早发晚发亚组中差异无统计学意义。且AFAP1-AS1与QMGS评分之间不具有相关性。结论AFAP1-AS1在MG患者的PBMCs中表达水平明显上调,可视为MG新的分子诊断标志物。

CYP2C19基因型对丙戊酸及其与苯妥英联合用药时血药浓度影响

目的 探讨细胞色素P450 2C19(CYP2C19)基因对丙戊酸(VPA)血药浓度,以及VPA和苯妥英(PHT)联合应用时对其VPA血药浓度的影响。方法 应用变性高效液相(DHPLC)技术对CYP2C19两个常见的等位基因突变进行了分析;应用荧光偏振免疫法(FPIA)测定口服抗癫痫药物患者的血药浓度。结果 81例癫痫患者中CYP2C19外显子4(*3)和外显子5(*2)位点均为野生型(*1/*1)的发生率为37.0％,CYP2C19*2和CYP2C19*3的等位基因频率分别为31.5％和3.7％。单一应用VPA时,弱代谢患者较正常代谢患者的VPA血药浓度有所升高(P<0.05)。联合应用PHT和VPA可使VPA血药浓度显著降低(P<0.01),CYP2C19正常代谢患者VPA血药浓度降低尤为明显(P<0.01);在VPA与PHT联合用药过程中,约半数CYP2C19正常代谢患者VPA血药浓度不能达到治疗血药浓度。结论 CYP2C19基因多态性影响VPA的血药浓度变化,在联合应用PHT时对VPA血药浓度的影响尤为明显,从而影响抗癫痫的临床疗效。

脑梗死伴牙周炎患者CRP、IL-6和sICAM-1水平检测的研究

目的:探讨慢性牙周炎与脑梗死患者血清中C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)和可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)水平变化及相关关系。方法:纳入经头颅CT或MRI证实确诊脑梗死并伴牙周炎的患者[(CI+CP)组]33例,单纯慢性牙周炎患者(CP组)30例,脑梗死患者(CI组)32例和健康志愿者(H组)38例。记录简化牙石指数、探诊岀血阳性率、探诊深度和附着水平丧失,检测血清中CRP、IL-6和sICAM-1的含量。结果:各组间牙周病指数差异有显著性(P<0.05),与CP组、CI组、H组相比,(CI+CP)组的CRP、IL-6和sICAM-1水平明显升高(P<0.01)。结论:CRP、IL-6和sICAM-1可能与脑梗死和牙周炎病理机制相关,牙周炎和脑梗死之间存在一定的关联。

基质金属蛋白酶-9与脑梗死的关系

近年研究发现炎症在动脉粥样硬化及脑梗死中发挥重要作用,炎性标志物基质金属蛋白酶-9(MMP-9)可降解细胞外基质,削弱纤维帽的结构,增加动脉粥样硬化斑块的不稳定性,加速斑块裂解,促进斑块破裂和血栓形成。脑梗死时MMP-9过度表达可破坏血-脑脊液屏障并形成脑水肿,在继发性脑出血和脑损伤过程中发挥了关键性作用。

ＣＹＰ２Ｃ１９和ＣＹＰ２Ｃ９等位基因在中国人群中多态性分布

目的：探讨细胞色素Ｐ４５０（ＣＹＰ）２Ｃ１９（ＣＹＰ２Ｃ１９）和ＣＹＰ２Ｃ９在中国人群中的等位基因多态性分布，分析影响上述基因多态性的因素。方法：应用聚合酶链反应—变性高效液相（ＰＣＲ—ＤＨＰＬＣ）技术分析了１５０例癫痫患者ＣＹＰ２Ｃ１９外显子４（＊３）、外显５（＊２）和ＣＹＰ２Ｃ９外显子７（＊３）的等位基因变异，观察这二种基因多态性在癫痫患者中分布的特征。结果：１５０例癫痫患者ＣＹＰ２Ｃ１９＊３、ＣＹＰ２Ｃ１９＊２和ＣＹＰ２Ｃ９＊３均为野生型的发生率为３８、７％，ＣＹＰ２Ｃ１９＊２、ＣＹＰ２Ｃ１９＊３和ＣＹＰ２Ｃ９＊３等位基因频率分别为３４．３％、５．３％和７．３％。ＣＹＰ２Ｃ１９＊２和ＣＹＰ２Ｃ１９＊３等位基因分布频率存在性别之间的显著差异，Ｐ值分别为Ｐ＜Ｏ．０５、Ｐ＜Ｏ．０１；而ＣＹＰ２Ｃ９＊３的等位基因分布频率不存在性别之间的显著差异。ＣＹＰ２Ｃ１９基因型存在性别之间的显著差异，Ｐ＜Ｏ．０１。存在ＣＹＰ２Ｃ９＊３等位基因多态性的个体一定出现ＣＹＰ２Ｃ１９＊２的等位基因多态性。结论：性别因素可能对ＣＹＰ２Ｃ１９酶的活性产生影响，应用同时经ＣＹＰ２Ｃ９和ＣＹＰ２Ｃ１９代谢的药物时，需进行基团型测定。

E-选择素预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤的影响

目的:研究E-选择素鼻粘膜耐受对大鼠脑缺血-再灌注损伤的作用及其机制。方法:E-选择素或PBS单程诱导耐受或加强诱导耐受48 h后,用改良的Zea Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血模型,缺血2h再灌注22 h后,流式细胞仪测定血中CD3+CD4+T细胞及CD3+CD8+T细胞含量,TTC染色法测定脑梗死体积,RT-PCR检测脑梗死区E-选择素、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)的表达,黄嘌呤氧化酶法检测脑组织中SOD水平。结果:E-选择素单程诱导耐受组CD3+CD4+T细胞与CD3+CD8+T细胞比值增加(P<0.05)。与其它组相比,E-选择素加强诱导耐受组脑梗死体积减小了40.87%(P<0.05),CD3+CD8+T细胞所占比例减小、CD3+CD4+T细胞与CD3+CD8+T细胞比值增高(P<0.05),脑组织中SOD水平升高(P<0.05),E-选择素、ICAM-1表达减少(P<0.05),LFA-1表达有减少趋势。结论:E-选择素鼻黏膜耐受诱导脑缺血耐受可减轻脑缺血-再灌注损伤,其作用机制与CD8+T细胞减少,CD4+T细胞与CD8+T细胞比值增加、SOD水平升高及E-选择素、ICAM-1表达减少有关。

雌激素与重症肌无力胸腺细胞增殖及凋亡的关系

重症肌无力（MG）是乙酰胆碱受体抗体（AchR-Ab）介导的、细胞免疫依赖的及补体参与的一种神经肌肉接头（NMJ）处传递障碍的自身免疫性疾病,主要累及NMJ突触后膜上的乙酰胆碱受体（AchR）。MG患者大多伴胸腺发育异常,85%的患者血清AchR-Ab阳性,而50%的患者伴胸腺增生,

巴曲酶对大鼠脑缺血-再灌注血小板活化因子及其受体基因表达的影响

目的探讨巴曲酶对大鼠局灶性脑缺血-再灌注后血小板活化因子(PAF)含量及PAF受体基因表达的影响。 方法将健康Wistar雄性大鼠40只分为五组,各组8只。Ⅰ组为假手术组;Ⅱa组为等渗盐水组缺血6 h再灌注6 h组;Ⅱb组为等渗盐水组缺血6 h组;Ⅲa组为巴曲酶组缺血6 h再灌注6 h组;Ⅲb组为巴曲酶组缺血6 h组。用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)及再通模型。应用逆转录聚合酶链反应技术检测MCAO及再通后缺血半暗带皮质PAF受体基因表达,同时用Elisa方法检测血浆PAF含量。结果Ⅱa组、Ⅱb组大鼠血浆PAF含量分别为(1 480±249)ng／L和(1 052±199)ng／L,PAF受体基因表达的吸光度(A)值分别为0.44±0.06和0.48±0.05;Ⅰ组大鼠血浆PAF含量为(506±55)ng／L,PAF受体基因表达A值为1.07±0.27。Ⅱa组、Ⅱb组与Ⅰ组大鼠的上述两个指标比较,差异均有显著意义。Ⅲa、Ⅲb组大鼠PAF含量分别为(848±80)ng／L和(743±105)ng／L,PAF受体基因表达A值分别为0.63±0.08和0.67±0.06,分别与Ⅱa组、Ⅱb组大鼠比较,差异均有显著意义。 结论 巴曲酶可降低脑缺血-再灌注后血浆中PAF含量,并且可能对脑缺血-再灌注缺血半暗带皮质组织PAF受体基因表达有影响。

阿尔茨海默病的发病机制及药物治疗的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种慢性进行性神经变性疾病,早期临床表现为近期记忆力下降,后来逐渐发展为生活不能自理最终死亡。目前,有许多种假说阐述其发病机制,如β-淀粉样蛋白、载脂蛋白E、一些金属元素、炎症因子等,但都不全面,也有人认为其可能与朊蛋白有关。部分药物被用于治疗AD,如美金刚、胆碱酯酶抑制剂等,但疗效均不显著。一些新的治疗理念和方法也逐渐被发现,如脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)以及免疫疗法等,但其远期疗效还需进一步证实,且一些副作用还并未被人们所知晓。本文主要对阿尔茨海默病的发病机制及药物治疗的研究进展进行了综述。

β-分泌酶抑制剂对tau过磷酸化大鼠β-CTF代谢的影响及机制研究

目的:在tau过磷酸化大鼠中,通过检测淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)C末端片段的表达,研究抑制β-分泌酶(BACE1)对其代谢的影响及机制。方法:24只SD大鼠随机分为四组,包括正常对照组、假手术组、OA组、OA+BACE1抑制剂组。Western blot法检测β-CTF、APP及BACE1表达;RT-PCR法检测APP及BACE1;水迷宫检测大鼠行为学。结果:OA组β-CTF表达显著增加(p<0.05),而OA+BACE1抑制剂组与OA组相比,β-CTF表达减少(p<0.05);四组大鼠的APP在蛋白及mRNA水平表达无显著差别(p>0.05);OA组BACE1在蛋白及mRNA水平的表达增加,而OA+BACE1抑制剂组BACE1的蛋白表达较OA组减少(p<0.05),两组大鼠mRNA表达水平无明显差异(p>0.05)。OA+BACE1抑制剂组大鼠在给予BACE1抑制剂后行为学有所改善(p<0.05)。结论:(1)tau过磷酸化通过促进神经元内BACE1表达,导致APP代谢途径发生转变,从而引起β-CTF表达增加;(2)β-CTF表达增加可引起tau过磷酸化大鼠行为学改变;(3)抑制BACE1可改善大鼠的学习及记忆能力,支持BACE1作为AD的治疗靶点。

继发性远隔改变研究进展

神经系统一旦发生局灶损害后,常常在远离原始病灶部位出现功能或结构改变,研究者将其称为继发性远隔改变（remote change/secondary change）。这种现象常出现于缺血性脑卒中或其它局灶性脑损伤中。它的存在是经典的＂神经网络＂概念的一种体现。关注这种现象将有助于明确神经网络的传导方式,并可能改变对脑卒中等局灶性脑损伤疾病诊疗的认识。

大脑中动脉闭塞大鼠继发丘脑损害与NAD含量关系探讨

目的观察大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠继发性丘脑病变,探讨其与NAD含量改变的关系,并考察缺血48 h后补充外源性NAD+能否减轻损害程度。方法建立5组动物分组,分别为MCAO模型组、建模48 h后补充NAD+组(NAD组)、建模48 h后补充溶剂组(溶剂组)、假手术组和空白对照组。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型,并于建模48 h后向NAD组腹腔注射NAD+50 mg/kg,同时向溶剂组腹腔注射等量0.9%Na Cl溶液。于建模4周后处死大鼠,取丘脑行免疫组化,测定β淀粉样蛋白前体(APP)表达情况,尼氏染色计数形态完整细胞数,并使用酶循环法测定丘脑NAD含量。结果与假手术组、空白对照组比较,模型组APP表达较高,NAD含量及完整神经元个数减少(P<0.05)。与模型组比较,NAD组APP表达较低,NAD含量及完整神经元个数较高(P<0.05)。结论大脑中动脉供血区发生局部脑缺血后,丘脑处存在继发性病变。NAD含量变化与继发性丘脑损害相关。脑梗死48 h后补充外源性NAD+能够减轻丘脑损害。